簡介：分類號密級UDC編號碩士學位論文MIR22和MIR200B對胃癌細胞生物對胃癌細胞生物學行為行為的影響及其機制研究的影響及其機制研究研究生姓名唐云云指導教師姓名、職稱蘇琦教授唐海林博士學科、專業(yè)名稱病理學與病理生理學研究方向胃癌發(fā)生及防治的分子機制2014年12月本研究基金資助項目本研究基金資助項目1、國家自然科學基金310006292、國家自然科學基金811028543、國家自然科學基金311009354、國家自然科學基金811003755、湖南省自然科學基金07JJ30336、湖南省高校創(chuàng)新平臺開放基金09K0747、湖南省衛(wèi)生廳科研課題計劃項目B20080678、湖南省教育廳科學研究重點項目09A0779、湖南省科技廳科技計劃2008SK3010

簡介：中圖分類號中圖分類號R73733R71174碩士學位論文大蒜素對人宮頸癌大蒜素對人宮頸癌HELA細胞生物學行為的干預研究細胞生物學行為的干預研究院（系）、所院（系）、所臨床醫(yī)學院研究生姓名研究生姓名陳建瓊學科、專學科、專業(yè)婦產科學導師姓導師姓名毛熙光教授二Ο一Ο年四月二Ο一Ο年四月大蒜素對人宮頸癌大蒜素對人宮頸癌HELA細胞生物學行為的干預研究細胞生物學行為的干預研究導師毛熙光教授研究生陳建瓊摘要目的探討大蒜素是否具有抑制人宮頸癌HELA細胞的增殖，誘導其凋亡的作用，并從分子水平研究大蒜素對HELA細胞生長調控機制。方法將HELA細胞分別與不同濃度大蒜素25UGML、5UGML、10UGML、20UGML、40UGML、80UGML、160UGML共同培養(yǎng)24H、48H、72H后，以WST1法檢測各組細胞OD值，計算細胞增殖抑制率；再以不同濃度大蒜素25UGML、5UGML、10UGML、20UGML、40UGML、80UGML、160UGML干預HELA細胞24H及以相同濃度大蒜素10UGML干預HELA細胞24H、48H和72H，以流式細胞儀檢測各組HELA細胞凋亡率并測定細胞周期G0G1期、S期、G2M期所占比例。以20UGML、40UGML、80UGML大蒜素干預HELA細胞24H后，提取各組細胞總RNA和總蛋白，進行定量RTPCR擴增，分析大蒜素對ΒCATENIN，CMYC及CYCLINDLMRNA表達的影響；WESTERNBLOT法分析大蒜素對HELA細胞ΒCATENIN蛋白表達的影響。以上實驗均重復3次，實驗數據用XS表示，采用SPSS170軟件統(tǒng)計分析，以P＜005為有統(tǒng)計學意義。結果WST1法發(fā)現，25160UGML濃度范圍內的大蒜素作用HELA細胞2472H后，細胞增殖抑制率由24％上升至82％，大蒜素對HELA

簡介：造血干細胞HEMATOPOIETICSTEMCELL，HSC是不均一的具有自我更新和多向分化潛能的細胞群在發(fā)生學上，HSC屬于成體干細胞，至少可分化為12種血細胞利用造血干細胞的這一特性，進行HSC移植可能使遺傳血液病、免疫缺陷病及惡性腫瘤等完全治愈。遠紅外線FARINFRAREDRAYS，FIR，41000ΜM是指41000ΜM的不可見光，其中對人體健康最有益的遠紅外線波長為415ΜM據基爾霍夫定律證實，人體本身是一個遠紅外輻射源，他可以吸收及發(fā)射遠紅外光，所以當遠紅外線照射人體時，其頻率與身體中的細胞分子、原子間的水分子運動頻率相一致時，引起共振效應，其能量最高且能被生物體所吸收，使皮下組織深層部位的溫度升高，產生的熱效應使水分子活化，處于高能狀態(tài)，加速人體需要的生物酶的合成，同時活化蛋白質等生物分子，從而增強機體免疫力和生物細胞的組織再生能力通過科學檢測，遠紅外線的熱效應和使人體共振吸收后主要產生的影響有激活生物大分子包括核酸和蛋白質；促進血液循環(huán)；增強新陳代謝；提高人體免疫功能和鎮(zhèn)痛作用。還有報道稱，遠紅外線可保持細胞高數量、高活性，促進損傷自愈，血管擴張，改善微循環(huán)，增加血流量，對血液循環(huán)有良好的作用，進一步抑制血壓的上升，在防止血管內血栓形成的同時增進健康，防止老化，并具有消炎，止痛的作用。正因為遠紅外對人類些疾病有治療作用，因此遠紅外產品接蹱而至?？茖W家早已注意到其對人體的副作用。因此本文以小鼠骨髓造血干祖細胞為研究對象，觀察遠紅外線對靶細胞生物學特性的影響，旨在對遠紅外線的生物學影響的機理進行探討，并為臨床治療疾病提供實驗依據。本實驗所用方法應用體外小鼠骨髓細胞培養(yǎng)技術，觀察遠紅外線對粒單祖細胞CFUGM、紅系祖細胞CFUE、巨核細胞CFUMEG和成纖維細胞CFUF增殖和分化的影響，并且利用免疫熒光納米粒子IFNB檢測靶細胞表面分化抗原CD，進一步評估遠紅外線對造血干祖細胞的影響。進一步通過RTPCR檢測法證明遠紅外線的生物學影響的機理。實驗結果證明遠紅外線在37℃條件下照射時，CFUE，CFUF，CFUMEG和CFUGM生成有促進作用，小鼠骨髓細胞表面標記有變化，靶細胞經2MIN照射后，增殖最旺盛。2MIN組與其它實驗組1MIN，5MIN，10MIN數據經統(tǒng)計學處理，具有差異性P均005。通過RTPCR進行MGMCSF、MIL2和MIL3基因的擴增最終證明了遠紅外線的生物學效應。結論遠紅外線對小鼠骨髓造血干祖細胞的增殖具有正調節(jié)作用。

簡介：10422200712973碩士學位論文SHANDONGUNIVERSITYMASTER’STHESIS論文題目抑癌基因PDCD4在腎透明細胞癌中的表達及生物學意義EXPRESSIONOFTUMORSUPPRESSORGENEPDCD4IN作專導CLEARCELLRENALCARCINOMA合作導師2010年5月11日356材料與方法9結果17討論18結論21文獻綜述一24附圖表30參考文獻36致射40攻讀學位期間發(fā)表的學術論文目錄41

簡介：前言樹突狀細胞DENDRITICCELLS，DC是指具有典型樹突狀形態(tài)、膜表面高度表達主要組織相容性復合體MAJHISTOCOMPATIBILITYCOMPLEX，MHCⅠ類和Ⅱ類分子，能有效攝取、加工、提呈抗原，并能顯著刺激初始型T淋巴細胞增殖的一類細胞。作為目前發(fā)現的具有相對特異性表面標志的功能最強的專職抗原提呈細胞ANTIGENPRESENTINGCELL，APC，DC在調節(jié)免疫應答過程中起著雙重作用，一方面，DC在觸發(fā)和調節(jié)非特異性免疫反應和特異性免疫反應中起關鍵作用另一方面，DC也能夠調節(jié)T細胞反應，產生外周免疫耐受，表現出功能上的高度可塑性。因此，DC是機體免疫反應的始動者，參與機體多種自身免疫性疾病、免疫缺陷病、腫瘤及一些炎癥反應的病理過程，在機體抗感染免疫及腫瘤應答免疫中起重要作用。甘草甜素GLYEYRRHIZIN，GL是中藥甘草的主要成分，是從藥用植物甘草根、莖中提取的一種有效活性成分，具有高甜度、低熱量、安全無毒的特點，具有免疫調節(jié)、抗炎、抗病毒、抗變態(tài)反應等作用，現運用于臨床各種疾病的治療，取得了明顯確切的療效。鑒于甘草甜素和樹突狀細胞在免疫系統(tǒng)中的顯著地位，本實驗就甘草甜素對小鼠髓系DC24細胞株表型及生物學功能的調節(jié)作用進行研究，并探討其免疫刺激功能及機制。實驗方法采用本教研室保存并傳代的C57BL6小鼠髓系DC24細胞株及甘草甜素進行實驗，復蘇培養(yǎng)細胞，應用MTT方法、掃描電鏡技術、流式細胞儀檢測技術、體外刺激淋巴細胞增殖、酸性磷酸酶活性檢測、酶聯免疫吸附試驗等檢測DC24細胞表型和生物學功能的各種指標。實驗結果1、甘草甜素處理后，DC24細胞表面可見很長的突起而未作處理的細胞（即RPMI1640組）的突起很短甚至沒有突起。2、甘草甜素處理的DC24細胞能夠上調其表面MHCⅡ、CD86和CD40分子的表達。3、甘草甜素組DC24細胞，與適宜比例的淋巴細胞培養(yǎng)，可促進淋巴細胞的增殖。4、甘草甜素處理的DC24細胞中的酸性磷酸酶活性低于RPMI1640組。5、甘草甜素處理的DC24細胞比未做任何處理的對照組（即RPMI1640組）IL12分泌量增加。結論1、適宜濃度的甘草甜素能夠顯著促進DC24細胞形態(tài)學的成熟。2、適宜濃度的甘草甜素顯著增加DC24細胞的MHCⅡ，CD40和CD86分子的表達，刺激DC24細胞發(fā)成熟。3、適宜濃度的甘草甜素作用于DC24細胞后使得其促進淋巴細胞增殖功能增強，上調DC24細胞的生物學功能。4、適宜濃度的甘草甜素作用于DC24細胞，使DC24細胞內的酸性磷酸酶活性下降，表明DC吞噬抗原能力下降，提呈能力增加，趨向成熟。5、適宜濃度的甘草甜素顯著增加DC24細胞培養(yǎng)上清中IL12的含量，說明甘草甜素促進DC24成熟的同時，上調DC24的功能。

簡介：隸。軔大璺碩士學位論文U一干擾素對人肺腺癌A549細胞生物學行為和B7H4分子表達的影響本人聲的研究成果人已經發(fā)表位而使用過作了明確的東南大論文的復印電子文檔的文被查閱和英文摘要等究生院辦理研究生簽名

簡介：目的利用人胚胎干細胞具有多向分化潛能的特性，使用小分子化合物特異性作用于調節(jié)表皮外胚層及角膜上皮細胞分化發(fā)育過程中重要信號通路的某些調控位點，結合ΒFGF，誘導人胚胎干細胞向角膜上皮樣細胞方向分化，以獲得角膜上皮樣細胞。方法懸滴法培養(yǎng)人胚胎干細胞，獲得具有向三個胚層分化潛能的擬胚體EMBRYONICBODIES，EBS。將獲得的擬胚體于3D培養(yǎng)體系中懸浮培養(yǎng)，利用小分子化合結合ΒFGF，誘導擬胚體逐步向外胚層、表皮外胚層、角膜上皮樣細胞方向分化。懸浮培養(yǎng)4天后轉為貼壁培養(yǎng)，利用貼壁誘導培養(yǎng)條件及不同種類誘導培養(yǎng)基，進一步誘導細胞向角膜上皮樣細胞方向分化。分別于誘導第10、20、30天取材，從基因水平、細胞水平檢測OCT4、P63、PAX6、K12、K14表達水平，判斷各組分化程度及分化效率。結果小分子化合物可下調干細胞標記物表達水平，上調角膜上皮樣細胞相關標記物表達水平小分子化合物可誘導人胚胎干細胞向角膜上皮樣細胞方向分化小分子化合物結合不同誘導培養(yǎng)基在不同誘導階段調控基因表達水平效率不同。結論小分子化合物聯合ΒFGF，通過特異性阻斷WNT、TGFΒ信號通路，可誘導人胚胎干細胞向角膜上皮樣細胞方向分化。在誘導分化過程中，干細胞標記基因表達水平下調，角膜上皮細胞發(fā)育調控基因及角膜上皮細胞特征性標記基因表達水平上調。與基礎培養(yǎng)基組（陰性對照組）、基礎培養(yǎng)基誘導培養(yǎng)基組（陽性對照組）、誘導培養(yǎng)基誘導培養(yǎng)基組（陽性對照組）相比，小分子化合物誘導上述基因表達上調時間出現早，且上調水平明顯高于其他三組。同時，小分子化合物結合不同誘導培養(yǎng)基、在誘導分化不同階段的誘導分化效率存在差異。若為短期（1020天）誘導，小分子化合物SHEM、小分子化合物UM組誘導效率高若誘導周期長30天以上，則以小分子化合物KSFM、小分子化合物DKSFM組誘導效率高。

簡介：四川大學碩士學位論文惡性膠質瘤細胞系的建立及其腫瘤干細胞生物學特性的初步研究姓名王靜申請學位級別碩士專業(yè)腫瘤學指導教師王修杰20070401四川大學碩士學位論文惡性膠質瘤細胞系的建立及其腫瘤干細胞生物學特性的初步研究碩士生王靜導師王修杰教授中文摘要腦腫瘤是成人危害性極大的惡性腫瘤之一，兒童因腫瘤而死亡的主要腫瘤類型，發(fā)病率和死亡率不斷升高，嚴重的威脅著人類的健康和生命在過去25年里，原發(fā)惡性腦腫瘤病人一直在增加，尤其在中年人以每年12％的速率在增加。2006年，在美國約有18120個新發(fā)腦腫瘤病人，其中約12820個死亡。多形性膠質母細胞瘤GLIOBASTONAMULTIFORME，GBM，顱內腫瘤分類屬星形細胞瘤Ⅲ一Ⅳ級，是最常見的顱內原發(fā)腫瘤之一，約占成人因腫瘤而死亡總人數的23％。多形性膠質母細胞瘤病人占所有膠質瘤病人的一半以上，在北美每年約有8000到10000的新發(fā)病例，發(fā)病高峰多在45歲至55歲之間。近十年來，雖然對該腫瘤的病理生理特性有了進一步的理解，但是其治療沒有任何進展。經外科手術、甚至聯合放療與化療，患者愈后仍很差，其中位生存期無明顯改善，一般在912個月之間，且病人幾乎無一例外的會出現腫瘤復發(fā)。最近研究發(fā)現，腦腫瘤中存在著具有干細胞自我更新特性的細胞亞群即腦腫瘤干細胞BRAINTUMORSTEMCELL，BTSC，是引發(fā)腫瘤并維持腦腫瘤生長的細胞來源TUMORINITIATINGCEIL，TIC，腫瘤干細胞可耐化療、耐放射，在腫瘤的復發(fā)過程中起著決定性的作用。BTSC是一群具有自我更新和重建原腫瘤組織表現型的腫瘤細胞，它具有三大特點即無限增

簡介：毛囊是哺乳動物特有的一種結構復雜的皮膚附屬器官，是一個富含干細胞，由神經外胚層和中胚層交互作用形成的系統(tǒng)。一生不斷經歷生長期、退行期和休止期的周期性循環(huán)毛乳頭對誘導和維持毛囊的周期性循環(huán)必不可少，其大小決定了毛囊的大小和生長期的長短。毛乳頭細胞具有確定和維持毛母質細胞增殖分化的作用，而毛球部毛母質細胞的增殖分化是毛囊周期性生長調控的關鍵。與其他組織器官的再生一樣，上皮細胞與相應間質細胞間的相互作用在毛囊的周期性生長調控中具有重要意義。綠茶是一種全世界受到廣泛歡迎的飲料，EGCG是綠茶茶多酚的主要活性成分之一，具有廣泛的生物學活性，已有大量研究表明其具有清除氧自由基抗氧化、抗腫瘤及對紫外線輻射的光保護等作用1但EGCG對毛發(fā)生長及毛乳頭細胞增殖的影響國內還未見報道。低氧誘導因子1HYPOXIAINDUCIBLEFACTOT1，HIF1是1992年由SEMENZA2在HEP3B細胞株中發(fā)現的一種DNA結合蛋白，可調控多種基因的表達。其中HIF1Α是專一調節(jié)O2的HIF1亞單位，決定了HIF1的活性，它與靶基因結合，促進其轉錄，使機體產生一系列低氧適應反應。現已證實HIF有調節(jié)紅細胞生成、鐵代謝、血管形成和葡萄糖代謝等多種作用，同時隨著對HIF1Α研究的進展，發(fā)現其與細胞生長的各種應答機制有密切的關系3。由于毛囊生長的關鍵部位毛球部深埋于真皮深層，皮膚表面的局部用藥很難滲透到毛球部，而成纖維細胞緊鄰表皮下方，并包裹在毛囊周圍。我們研究小組前面的研究中已經做到將目的基因HIF1Α通過脂質體直接導入成纖維細胞，導入后在毛囊周圍的成纖維細胞表達弄口分泌某些關鍵因子，如VEGF，FGF等，從而發(fā)揮促毛發(fā)生長的作用，達到治療毛發(fā)疾病的目的。作為該課題的一部分，本實驗證明了HIF1Α在毛囊和培養(yǎng)的毛乳頭細胞中的表達，進一步為研究HIF1Α促進毛發(fā)生長的機理提供了理論依據。本課題的研究主要包括以下兩部分一EGCG對體外培養(yǎng)的人毛囊和毛乳頭細胞生物學活性的影響顯微分離人毛囊，在加入不同質量濃度EGCG0～250MGL的WILLIAMSE培養(yǎng)基中培養(yǎng)，觀察毛囊生長情況；利用兩步酶法分離培養(yǎng)人毛乳頭細胞，加入不同質量濃度的EGCG0～500MGL，48H后，利用噻唑藍MTT法檢測細胞增殖，流式細胞儀檢測細胞周期。結果顯示與空白對照組比較，01，1MGL的EGCG對體外培養(yǎng)的毛囊生長有明顯促進作用P005；MTT顯示156，312，625MGL的EGCG能夠明顯促進毛乳頭細胞的增殖P005；流式細胞儀檢測78，156，312和625MGLEGCG作用48H后，S期和G2M期細胞比率明顯增加，G0G1期細胞比率明顯減少，細胞增殖指數明顯增加由525％增至564％，1461％，3251％，3735％，細胞增殖指數與EGCG濃度呈顯著正相關R0933因此，我們得出結論一定濃度的EGCG能夠促進體外培養(yǎng)的人毛囊生長及人毛乳頭細胞增殖。二HIF1Α人毛囊和毛乳頭細胞中的表達分離完整的人生長期毛囊，提取總RNA，RTPCR法檢測HIF1ΑMRNA的表達。利用兩步酶法分離培養(yǎng)人毛乳頭細胞，取第三代毛乳頭細胞，分為正常培養(yǎng)組和200ΜM氯化鈷處理組。提取總RNA，RTPCR法檢測HIF1ΑMRNA的表達；提取細胞總蛋白，用WESTERNBLOT法檢測人毛乳頭細胞中HIF1Α蛋白的表達；用免疫熒光法進一步檢測人毛乳頭細胞中HIF1Α蛋白的表達并定位。RTPCI濕示人毛囊及分離培養(yǎng)人毛乳頭細胞均表達HIF1ΑMRNA。WESTERNBLOT顯示200ΜM氯化鈷處理的人毛乳頭細胞表達HIF1Α蛋白，正常培養(yǎng)組未能檢測到HIF1Α蛋白。免疫熒光顯示200ΜM氯化鈷處理的人毛乳頭細胞胞漿、胞核中均有HIF1Α蛋白的表達，正常培養(yǎng)組未能檢測到HIF1Α蛋白。因此我們可以得出結論人毛囊和毛乳頭細胞均可表達缺氧誘導因子，但常氧下HIF1Α蛋白迅速降解，故免疫熒光、WESTERNBLOT檢測不到氯化鈷可模擬缺氧環(huán)境，加氯化鈷處理的人毛乳頭細胞免疫熒光、WESTERNBLOT均檢測到HIF1Α的表達。

簡介：博士專業(yè)學位論文（2013屆）胰腺癌干細胞胰腺癌干細胞OCT4、NANOG基因基因生物學特性的研究生物學特性的研究THESTUDYOFBIOLOGICALACTERISTICSOFOCT4NANOGOFPANCREATICCANCERSTEMCELLS研究生姓研究生姓名陳錦鵬陳錦鵬指導教師姓名指導教師姓名錢海鑫錢海鑫專業(yè)名稱普通外科普通外科研究方向消化道腫瘤消化道腫瘤論文提交日期論文提交日期20130920蘇州大學學位論文原創(chuàng)性聲明學位論文使用授權聲明扉頁摘要1ABSTRACT3第一部分第一部分人胰腺癌腫瘤干細胞的分選和生物學特性的研人胰腺癌腫瘤干細胞的分選和生物學特性的研究5第一章緒論511課題來源、研究的目的和意義512國內外研究概況613論文的主要研究內容7第二章材料與方法821研究對象及儀器設備8211研究對象8212主要儀器與試劑822實驗流程與方法11221人胰腺癌干細胞的獲得11222RTPCR檢測OCT4、NANOG基因的表達112221用TRIZOLREAGENT提取未分選的PANC1細胞CD24CD44ESA細胞總RNA。112222逆轉錄（RT）122223PCR反應12223細胞免疫熒光測OCT4和NANOG的表達13224CCK8法檢測細胞增殖率及生長曲線。13225CCK8法檢測細胞耐藥性14第三章結果1531胰腺癌細胞的培養(yǎng)和干細胞的獲得15

簡介：點擊查看更多慢病毒介導RNAi干擾β-catenin對小鼠骨髓間充質干細胞生物學行為的影響.pdf精彩內容。

簡介：第一章胞外核苷酸對人內皮細胞增殖的影響及其機制研究第一節(jié)胞外核苷酸對人內皮細胞增殖、凋亡及自噬的影響目的觀察胞外核苷酸對人臍靜脈內皮細胞增殖、凋亡及自噬的影響。方法采用不同濃度的胞外核苷酸ATP，ADP，UTP，UDP持續(xù)干預人臍靜脈內皮細胞HUVECCS，通過CCK8細胞增殖試驗檢測其對HUVECCS增殖的影響及時間效應，流式細胞術觀察不同濃度的ATPADP對HUVEC細胞周期時相分布及細胞凋亡的影響，質粒轉染及免疫熒光技術觀察高濃度的ATPADP對誘導HUVECCS細胞自噬的影響，免疫印記進一步檢測細胞的自噬活動。結果與陰性對照組相比，ATP在低濃度1，5，10ΜM時對HUVWECCS增殖沒有影響，ADP僅在1ΜM時促進細胞增殖，但ATP和ADP在高濃度50，100ΜM時均顯著抑制細胞增殖，且呈時間依賴性，而UTP、UDP對HUVECCS增殖沒有影響；高濃度的ATPADP并不誘導HUVECCS凋亡，但是顯著增加S期的細胞比例，降低G2M期的細胞比例，對G0G1期細胞比例沒有明顯影響細胞自噬試驗表明高濃度的ATPADP顯著誘導LC3GFP融合蛋白的形成，免疫印記表明對照組與ATPADP干預組的HUVECCS均表達高水平的LC31和LC32。結論高濃度的ATPADP通過將細胞周期阻滯于S期并誘導細胞自噬性死亡而抑制HUVECCS增殖，但并不涉及誘導細胞凋亡。第二節(jié)ATP抑制人內皮細胞增殖的機制研究目的闡明ATP抑制人臍靜脈內皮細胞增殖的具體機制。方法采用RTPCR檢測靜息狀態(tài)下人內皮細胞表達的P2Y受體亞型，RTPCR、WESTERNBLOT檢測不同濃度的ATP對人內皮細胞表達P2Y2和P2Y11的影響；通過CCK8細胞增殖試驗檢測非特異性P2受體阻斷劑蘇拉明對ATP抑制HUVECCS增殖作用的影響；SHRNA質粒轉染試驗闡明介導ATP抑制HUVECCS增殖作用的P2Y受體亞型；WESTERNBLOT檢測高濃度的ATP對ERK信號通路的活化情況，CCK8細胞增殖試驗檢測ERK通路阻斷劑U0126和PD98095對ATP抑制細胞增殖效應的影響；流式細胞術檢測ATP對順鉑誘導細胞死亡效應的影響，RTPCR及P2Y11SHRNA質粒轉染試驗闡明其可能機制。結果1、RTPCR結果顯示靜息狀態(tài)下，HUVECCS表達高水平的P2Y2和P2Y11受體，同時表達低水平的P2Y1，4，13，14受體；原代的人主動脈內皮細胞表達高水平的P2Y11受體，同時表達低水平的P2Y2，413，14受體；RTPCR結果表明ATP呈濃度依賴性上調HUVECCSP2Y2和P2Y11受體的MRNA表達；WESTERNBLOT結果表明ATP呈濃度依賴性上調HAECP2Y2和P2Y11受體的蛋白表達。2、CCK8細胞增殖試驗表明高濃度盼ATP對HUVECCS增殖的抑制作用可以被非特異性P2受體阻斷劑蘇拉明100ΜM完全阻斷。3、P2Y2和P2Y11SHRNA質粒轉染HUVECCS24H后，RTPCR檢測其瞬時轉染效率，結果表明SHRNA顯著下調了HUVECCSP2Y2和P2Y11的MRNA表達；CCK8細胞增殖試驗表明同空白對照組相比，P2Y11SHRNA組ATP在高濃度時對HUVECCS增殖的抑制作用被阻斷，而P2Y2SHRNA組ATP在高濃度時仍顯著抑制HUVECCS增殖。4、WESTERNBLOT結果表明ATP在100ΜM時呈時間依賴性活化ERK信號通路，其誘導ERK磷酸化的時間從1MIN持續(xù)到SMIN，其中以4～8MIN時最明顯，且ATP誘導的ERK磷酸化可以被其特異性阻斷劑U0126所阻斷。U0126或者PD98095均可抑制或者協同ATP抑制HUVECCS增殖P5、流式細胞術結果表明ATP在高濃度50，100ΜM時能顯著增強順鉑誘導的細胞死亡效應與單用順鉑組相比，P6、P2Y11SHRNA質粒轉染HUVECCS后，ATP在高濃度50，100ΜM時下調BCL2MRNA表達的效應被部分阻斷，而且順鉑誘導的細胞死亡率明顯降低P結論ATP在高濃度時對HUVECCS細胞增殖的抑制作用由P2Y11受體介導，該過程并不依賴于ERK信號通路的活化。高濃度的ATP通過P2Y11受體下調BCL2家族成員的基因表達水平，從而增強人內皮細胞對順鉑的敏感性。第二章胞外核苷酸對人臍血內皮祖細胞生物學功能的影響及其機制研究第一節(jié)胞外核苷酸對人臍血內皮祖細胞增殖的影響目的分離純化臍帶血來源的單個核細胞并誘導培養(yǎng)為內皮祖細胞，觀察胞外核苷酸對其增殖的影響。方法采用密度梯度離心法分離人臍帶血中的單個核細胞，用含有多種生長因子的內皮祖細胞專用EGM2培養(yǎng)基誘導培養(yǎng)，通過形態(tài)學、免疫熒光及逆轉錄多聚酶鏈反應RTPCR檢測并鑒定細胞的生物學特性；采用RTPCR檢測靜息狀態(tài)下人內皮祖細胞EPCS表達的P2受體亞型，并采用不同濃度的胞外核苷酸ATP，ADP，UTP，UDP持續(xù)干預EPCS，通過CCK8細胞增殖試驗檢測其對EPCS增殖的影響。結果1、分離培養(yǎng)的內皮祖細胞早期以集落為中心呈放射狀生長，晚期形成典型的“鋪路石”樣改變，DILACLDL和FITCUEA雙染陽性初步鑒定其為內皮祖細胞。RTPCR結果表明早期的EPCS表達較高水平的干細胞表面標志物CD133、CD31和CD34，而弱表達內皮細胞表面標志物VECADHERIN；2、RTPCR結果顯示靜息狀態(tài)下，EPCS表達較高水平的P2X4，6，7受體和P2Y2，4，11受體，同時也弱表達P2Y13，14受體；ATP、UTP在5ΜM時均能上調EPCSP2Y2受體MRNA的表達；3、與陰性對照組相比，僅ATP在高濃度50，100ΜM時顯著抑制EPCS增殖，而ADP、UTP、UDP對細胞增殖均沒有明顯影響。結論人臍血中可分離培養(yǎng)出較高純度的內皮祖細胞；高濃度的ATP顯著抑制EPCS增殖，但介導該作用的P2受體亞型有待進一步研究。第二節(jié)胞外核苷酸對LPS誘導人臍血內皮祖細胞細胞因子表達的影響及可能機制目的觀察低濃度的ATP、UTP對LPS誘導EPCS細胞因子表達的影響并闡明其可能機制。方法采用RTPCR檢測TLRS在EPCS中的表達情況及1MGML的LPS對EPCS細胞因子表達的影響；采用RTPCR檢測不同濃度的ATP、UTP0，5，50ΜM對EPCS表達TLR4、TLR4協同受體CD14和TLR調節(jié)蛋白MYD88的影響；采用RTPCR檢測ATP、UTP在5ΜM濃度時對LPS誘導EPCS細胞因子表達的影響；RTPCR、WESTERNBLOT檢測ATP、UTP在低濃度時對LPS誘導EPCS表達TLR4、CD14和MYD88的影響；WESTERNBLOT檢測ATP、UTP在低濃度時對LPS誘導EPCSNFΚB信號通路活化情況的影響。結果1、RTPCR結果顯示靜息狀態(tài)下，EPCS表達TLR1～10，其中TLR4的表達水平最高，其次為TLR2，TLR10和TLR3；1MGML的LPS能顯著上調IL1Β、MCP1、ICAM1、VCAM1、E選擇素、IFNΑ和TNFΑ在EPCS中的MRNA表達水平；2、不同濃度的ATP、UTP0，5，50ΜM干預處理EPCS后，RTPCR結果表明ATP、UTP在5ΜM濃度時能顯著下調TLR4、CD14和MYD88的MRNA表達；3、ATP、UTP在5ΜM濃度時能顯著下調LPS誘導的MCP1，VCAM1，IFNΑ和TNFΑ在EPCS中的MRNA表達水平，而對IL1Β和ICAM1的表達無明顯影響；4、ATP、UTP在低濃度時顯著下調LPS誘導的CD14和MYD88在EPCS中的MRNA和蛋白表達水平，同時也下調LPS誘導的TLR4MRNA在EPCS中的表達；5、ATP、UTP在低濃度時顯著抑制LPS誘導的NFΚB磷酸化。結論ATPUTP在低濃度時能顯著抑制LPS誘導的炎癥因子和細胞因子在EPCS中的表達，該作用可能通過P2Y2受體負性調節(jié)TLR4信號通路，最終通過抑制NFΚB的磷酸化而實現。

簡介：目的以人神經膠質瘤細胞株SHG44為生物模型，研究900MHZ微波單獨及聯合Γ射線照射對細胞的生物學效應。方法將細胞隨機分為對照組、2MWCM2、4MW／CM2和6MW／CM2微波暴露組各組記為C，M2，M4和M6。細胞輻照2H／D，連續(xù)照射3D后，聯合組再接受5GY的Γ射線照射。共分為單獨Γ射線組、2MW／CM2Γ射線組、4MW／CM2Γ射線組和6MW／CM2Γ射線組記為I，IM2，IM4和IM6。Γ射線由蘇州大學輻照中心提供采用60CO輻照，照射劑量5GY，劑量率為1GY／MIN。1采用MTT法和克隆法測定細胞的生長增殖情況。2利用流式細胞儀檢測細胞的周期和凋亡情況。3測定各組細胞超氧化物歧化酶SUPEROXIDEDISMUTASE，SOD活力和丙二醛MALONDIALDEHYDE，MDA的含量。4用RTPCR方法和WESTERNBLOT法檢測各組細胞中HSP70在MRNA和蛋白水平的表達。5以正常大鼠神經膠質細胞為研究對象，選取部分上述指標MTT法和凋亡進行檢測。6用BPCL微弱發(fā)光測量儀檢測細胞在各生長階段，微波處理后超微弱發(fā)光的變化。結果1單獨微波輻射中，M4和M6組的細胞增殖活性顯著下降。聯合照射組中，IM6組細胞的增殖活性與單撕射線組相比顯著下降。各單獨微波組細胞的克隆形成率均下降。聯合照射組中，與I組相比，IM4與IM6組的克隆率顯著下降。微波和Γ射線對增殖活性和克隆率有協同抑制作用。2與單獨微波組相比，聯合組G1期百分比顯著升高，而G2期和S期比例均有所下降，但無統(tǒng)計學差異。單獨微波輻射后，細胞凋亡率隨著微波強度的增加有上升的趨勢且呈直線相關，但各組間無統(tǒng)計學差異。與I組相比，IM4和IM6組的凋亡率顯著升高。與單獨微波組相比，各聯合組凋亡率顯著上升。微波與Γ射線對細胞凋亡率存在協同促進作用。3單獨微波組中，M6組的MDA含量上升，各單獨微波組SOD活性也有上升趨勢，但各組間沒有統(tǒng)計學差異。與I組相比，各聯合組MDA含量均顯著上升，IM6組的SOD活性顯著下降。微波與Γ射線對MDA含量有協同促進作用，對SOD活性的抑制有加強作用。4單獨微波照射后，HSP70的表達有上升的趨勢，但各組間無統(tǒng)計學差異。Γ射線照射后HSP70表達顯著下降。微波和Γ射線對細胞HSP70的表達無交互作用。5大鼠原代神經膠質細胞的增殖活性經微波、Γ射線和聯合照射處理后，與對照組相比均沒有統(tǒng)計學差異，僅Γ射線組和聯合組有下降的趨勢。各處理組均無明顯凋亡發(fā)生。Γ射線使ATP酶的活性顯著升高，微波和Γ射線對ATP酶活性無交互作用。6細胞的超微弱發(fā)光在接種后第1D即顯著增強，一直維持到第5D后顯著下降。微波輻射后第1D發(fā)光強于對照組，第2D恢復到對照水平。H202處理后細胞超微弱發(fā)光顯著增強。結論1微波和Γ射線均能抑制人神經膠質瘤細胞的增殖，且兩者之間有協同抑制作用。微波和Γ射線還可對細胞氧化損傷產生協同和加強的作用。2聯合照射未明顯抑制大鼠原代神經膠質細胞的增殖和促進其凋亡的發(fā)生，但可使ATP酶活性增高。3細胞增殖和氧化劑處理能使細胞的超微弱發(fā)光明顯增強，微波引起細胞發(fā)光增強為早期一過性的。

簡介：同等學力申請博士學位博士學位論文學校代碼10023學號ZB2009002中國人群外周T和NK細胞淋巴瘤臨床、病理和分子生物學特點PERIPHERALT‘CELLANDNK。CELLLYMPHOMASINCHINESEPOPULATIONACIINICAL，PATHOLOGICALANDMOLECULARBIOLOGICALSTUDY所院姓名指導教師導師小組學科專業(yè)研究方向完成日期中國醫(yī)學科學院腫瘤研究所腫瘤醫(yī)院馮曉莉口審口潘秦鏡馬潔腫瘤學淋巴瘤臨床病理特點2012年12月北京協和醫(yī)學院中國醫(yī)學科學院博士研究生學位論文表索弓表索引表1免疫組化一抗來源及其識別抗原的部位16表2BIOMED2多重引物TCRG和TCRB序列及長度21表3PT／NKCL各型的總例數以及所占的百分比23表4PT／NKCL的平均年齡、中位年齡及最小和最大年齡24表5各型的男女比以及各型結內外的發(fā)病率25表6血清132微球蛋白在各型的升高百分比率25表7血清LDH在各型的升高百分比26表8CD2在PT／NKCL各型中的表達率28表9CD3在PT／NKCL各型中的表達率29表10CD4在PT／NKCL各型中的表達率30表11CD5在PT／NKCL各型中的表達率31表12CD7在PT／NKCL各型中的表達率一32表L3CD8在PT／NKCL各型中的表達率33表14CD10在PT／NKCL各型中的表達率34表15CD56在PT／NKCL各型中的表達率35表16TIA在PT／NKCL各型中的表達率36表17GB在PT／NKCL各型中的表達率37表L8PERFORIN在PT／NKCL各型中的表達率38表19CD30在PT／NKCL各型中的表達率39表20ALK在PT／NKCL各型中的表達率40表21RLM23在PT／NKCL各型中的表達率413

簡介：彳腳兒4基因表達對大腸癌細胞生物學特性的變化及機理的研究⑧論文作者簽名指導教師簽名論文評閱人L評閱人2評閱人3評閱人4評閱人5匿名評閱匿名評閱匿名評閱匿名評閱匿名評閱答辯委員會主席鄭撾教授浙江太堂勝瘤班究所委員1金湛伎教授浙江太堂醫(yī)堂院隘屬盈E逸去醫(yī)院委員2裘垡態(tài)主任醫(yī)垣浙江省蟲醫(yī)院委員3王撻波主任醫(yī)咂逝江太堂醫(yī)堂院阻屬邵逸去醫(yī)院委員4潘宏銘主任醫(yī)垣逝江太堂醫(yī)堂院隘屬邵逸去醫(yī)院答辯日期2011年5月MECHANISMSINVOLVEDINBIOLOGICALBEHAVIORCHANGEWITH彳D卯724EXPRESSIONINCOIONCANCERCEULINES⑧AUTHOR’SSIGNATUREA●●●3UPERVLS0R7SS12NATURETHESISREVIEWER1THESISREVIEWER2THESISREVIEWER3THESISREVIEWER4THESISREVIEWER5ANORIYMOUSREVIEWANON”NOUSREVIEWANORL弘NOUSREVIEWANONYMOUSRE、RIEWANONYMOUSREVIEWCHAIR．_PROFZHENSHU2NDA佑LIATEDHOSPITALOFZHEJIAILGUNIVERS時COMMITT∞OFO髓LDEFENCECOMMI他EMAN1．呈墮MHONGCH啪SIRRULLRUNSHAWHOSPITALOFZHEJI鋤GUNIVERS時COMMITTEEMAN2CHIEFPHYSICIAQIUHUSENZHEJIANGCHINESEMEDICINEHOSPI詛LSIRRUNRUTLSHAWHOSPJTALOFZHEJIANGUNIVERSILYCOMMITTEEMAN3CHIEFPHYSICIAWANGLINBOSIRRUNRUNSHAWHOSPITALOFZ11EJIANGUNIVERS柳COMMITTEEM觚4』MEFPHYSICIAPALLH0NGMINSIRRULLRUILSHAWHOSPITALOFZHEJI鋤GUILIVERS衙DATEOFORALDEFENCEMAY2011