簡介：ATHESISDISSERTATIONSUBMITTEDTOZHENGZHOUUNIVERSITYFORTHEDEGREEOFMASTER。EFFECTOF5AZA2DEOXYCYTIDINEONEC9706CELLWITHANALYSISOFTHEROLEOFTFPI一2GENEBYYABINGDUSUPERVISORPROF．QINGXIAFANONCOLOGYTHEFIRSTAFFILIATEDHOSPITALOFZHENGZHOUUNIVERSITYMAY2011原創(chuàng)性聲明本人鄭重聲明所呈交的學位論文，是本人在導師的指導下，獨立進行研究所取得的成果。除文中已經(jīng)注明引用的內容外，本論文不包含任何其他個人或集體已經(jīng)發(fā)表或撰寫過的科研成果。對本文的研究作出重要貢獻的個人和集體，均已在文中以明確方式標明。本聲明的法律責任由本人承擔。學位論文作者矛彳朗L日期勿，F(xiàn)年G月≯‘日學位論文使用授權聲明本人在導師指導下完成的論文及相關的職務作品，知識產(chǎn)權歸屬鄭州大學。根據(jù)鄭卅I大學有關保留、使用學位論文的規(guī)定，同意學校保留或向國家有關部門或機構送交論文的復印件和電子版，允許論文被查閱和借閱；本人授權鄭州大學可以將本學位論文的全部或部分編入有關數(shù)據(jù)庫進行檢索，可以采用影印、縮印或者其他復制手段保存論文和匯編本學位論文。本人離校后發(fā)表、使用學位論文或與該學位論文直接相關的學術論文或成果時，第一署名單位仍然為鄭州大學。保密論文在解密后應遵守此規(guī)定。學位論文作者

簡介：點擊查看更多再生障礙性貧血患兒骨髓間充質干細胞生物學特性及其對造血的影響的研究.pdf精彩內容。

簡介：多囊卵巢綜合征PCOS是生育年齡婦女常見的生殖內分泌疾病，中醫(yī)辨證其屬于“痰濕性”不孕癥范圍，其中醫(yī)病因病機可以簡單概括為“痰壅胞宮”。現(xiàn)代研究顯示痰濁的主要生物學基礎是糖脂代謝異常，即胰島素抵抗IR，又稱“選擇性胰島素抵抗”。早期工作顯示PCOS患者卵巢組織及細胞本身存在IR，表現(xiàn)為胰島素調節(jié)糖代謝信號途徑受損，調節(jié)促分裂途徑放大，卵巢反應向性升高?？梢奝COS中醫(yī)發(fā)病機制一“痰壅胞宮”的現(xiàn)代生物學基礎等同于卵巢局部IR。臨床資料顯示PCOS患者在進行輔助生育技術治療不孕癥時易于發(fā)生卵巢過度刺激綜合癥OHSS，是OHSS發(fā)生的高危因素，但在輔助生育技術治療前預防性服用二甲雙胍可以顯著降低OHSS的發(fā)生率，提示卵巢局部IR可能與PCOS患者促排卵治療中易于發(fā)生OHSS有關，其機制可能是卵巢局部的選擇性IR導致胰島素促分裂途徑放大，卵巢反應性升高，顆粒細胞的增殖效應亢進，使血管活性因子VEGF等分泌增多引起血管通透性升高?；诖苏J識，試驗選擇豬卵巢顆粒細胞作為體外研究對象，用PI3K胰島素信號轉導通路調節(jié)糖代謝的關鍵分子特異性阻斷劑渥曼青霉素作用于卵巢顆粒細胞人工誘導IR的細胞模型，通過蛋白印跡、逆轉錄聚合酶鏈反應及激素測定等現(xiàn)代分子生物學技術，從現(xiàn)代分子生物學角度研究PCOS“痰壅胞宮”的中醫(yī)病因病機及其在輔助生育技術中發(fā)生OHSS的現(xiàn)代分子生物學基礎。試驗結果顯示在IR的狀態(tài)下，顆粒細胞的孕激素合成能力顯著降低，雌激素合成能力沒有明顯變化，芳香化酶P450AROM、促分裂原活化蛋白激酶MAPK、增殖細胞核抗原PCNA、血管內皮生長因子VEGFMRNA表達亢進。上述實驗結果表明，在IR的狀態(tài)下，胰島素受體信號轉導通路糖代謝通路受損的同時，其促分裂通路放大，卵巢反應性升高，血管活性因子分泌增加，導致血管通透性升高，這可能是PCOS促排卵治療易于發(fā)生OHSS的原因；同時在IR的狀態(tài)下，芳香化酶的表達亢進，繼發(fā)于卵泡膜細胞雄激素合成亢進則顆粒細胞雌激素合成能力亦亢進，而雌激素與FSH之間有嚴格的負反饋調節(jié)，雌激素合成亢進抑制垂體產(chǎn)生卵泡生長必需的FSH，從而導致卵泡發(fā)育過早停滯引起不排卵可能是PCOS患者不孕的原因；但IR的狀態(tài)下，孕激素合成能力下降，這表明孕激素的合成與’PI3K的激活有關，IR狀態(tài)下，孕激素的合成能力降低與PCOS患者不孕及妊娠后流產(chǎn)可能有關。

簡介：目的通過研究全氟己烷對肺泡巨噬細胞所分泌的各種細胞因子的蛋白質表達、凋亡和細胞周期以及吞噬功能的影響，探討急性肺損傷時應用PFC治療的分子作用機理及其對肺局部防御機能的影響。方法健康雄性WISTAR大鼠放血處死后全肺灌洗獲取AM，貼壁純化。采用4種方法干預將AM分為4組1正常對照C組不做任何干預；2脂多糖LPS組按10UGML的劑量加入LPS刺激；3全氟己烷PFH組按30％體積比PFH培養(yǎng)液加入的PFH；4脂多糖全氟己烷LPSPFH組加入PFH和LPS。在預培養(yǎng)20H后重懸AM，分4組干預處理4H后，收集AM，與1％雞紅細胞懸液培育后制片，瑞氏染色觀察并計算吞噬率和吞噬指數(shù)，采用單因素方差分析比較組間差異；提取各組細胞的蛋白質應用蛋白質芯片飛行時間質譜技術比較組間的蛋白質表達差異；在純化后即用無血清培養(yǎng)液培養(yǎng)并分為4組干預24H。收集AM，應用透視電鏡進行形態(tài)學觀察，并聯(lián)合流式細胞技術采用單因素方差分析比較各組間凋亡率和細胞周期的差異。結果1LPS組與C組、PFH組與C組及LPS組和LPSPFH組相比較共發(fā)現(xiàn)有15個相對分子量的差異表達蛋白質，分別為3343DA、4796DA、4968DA、5175DA、5546DA、7600DA、7918DA、9776DA、10934DA、11529DA、14853DA接近14849DA、15257DA、15823DA、13763DA、14001DA。其對應的SWISSPROT蛋白數(shù)據(jù)庫中共發(fā)現(xiàn)了47種相應的蛋白質。2LPS組和LPSPFH組的凋亡率分別明顯高于C組和LPS組1006±172％2410±319％VS106±013％1006±172％，P＜001，而PFH組與C組的凋亡率比較無顯著統(tǒng)計學意義281±041％VS106±013％P＞005；細胞周期的各指標在4組間均無統(tǒng)計學差異P＞005。3AM的吞噬率和吞噬指數(shù)呈線性相關性關系，從高到低依次為LPS組2588±203321±009，LPSPFH組1250±207229±008，C組825±167173±018，PFH組350±120116±019，各組間的差異有顯著的統(tǒng)計學意義P＜001。4AM可吞噬雞紅細胞和PFH，且吞噬后體積增大；C組和PFH組未見明顯的凋亡變化，LPS組和PFHLPS組可見到典型的凋亡細胞存在；結論1LPS可活化AM調節(jié)其蛋白質表達。PFH可能通過抑制其分泌和基因表達的雙重作用而調節(jié)活化AM內的蛋白含量。2PFH對體外培養(yǎng)的AM凋亡并無明顯影響，而對于LPS刺激培養(yǎng)的AM凋亡則有誘導作用；AM的細胞周期不受LPS和PFH的影響。3LPS可增強體外培養(yǎng)AM的吞噬活性；PFH對AM的吞噬活性有一定的抑制作用；活化的AM在PFH抑制作用下，其吞噬活性較未活化狀態(tài)下AM的吞噬活性為高。

簡介：上海交通大學博士學位論文扉頁物學行為的影響研究THEEXPRESSIONOFSIRT4ING鑫VINTESTINALCARCINOMAANDITSEFFECTONHUMANCOLOF，．ALCANCERCELLSTRAINS’BIOLOGICALBEH奄NR、STUDY學科專業(yè)作者姓名研究生學號指導教師答辯日期普外科黃國裕0127249285彭志海2015年4月28日上海交通大學博士學位論文學位英文題名頁PHD，STHESISTHEEXPRESSIONOFSIRT4INGASTROINTESTINALCARCINOMAANDITSEFFECTONHUMANCOLORECTALCANCERCELLSTRAINS’BIOLOGICALBEHAVIORSTUDYAUTHORSUPE陽以SOR刪OR“RESE僦HFⅢLDSDEGREE咖TFTI小JDS唧SISDE剛SEGUOYUHUANGZHIHAIPENGSURGERYGENERALSURGERYNEMOLECULARBIOLOGICALMECHANISMOFTHEOCCURRENCEANDDEVELOPMENTOFDIGESTIVESYSTEMNEOPLASMSDOCTORSHANGH面FIRSTPEOPLE’SHOSPITALNATIONALHI曲TECHNOLOGYRESEARCHANDDEVELOPMENTPMGRAMSS2014AA020803．NATIONALNATURALSCIENCEFOUNDATIONOFCHINA81220108021，PROJECTOFSHANGHAI●，一●／1●BCLENCEANDIECLQ_NOLOFFY50MMLSSLON14411950502，JO砒RESEARCHPROJECTSOFSHANGHAIMUNICIPALHOSPITALSHDCL2012105，PROJECTOFSHANGHAIJIAOTONGUNIVERSITYYG2012ZD01．20150428

簡介：東南大學碩士學位論文DLC1基因結構域對結腸癌HT29細胞生物學行為的影響及其機制的研究姓名吳鵬申請學位級別碩士專業(yè)基礎醫(yī)學；病理與病理生理學指導教師黃培林20110512東南大學碩士學位論文PCDNA3．1．△SAM．DLC．1、PCDNA3．1．△STAI?。瓺LCL亞克隆重組質粒并轉染HT29細胞。2．MTT實驗、平板克隆實驗、NANSWEN侵襲實驗及流式細胞術結果顯示，PCDNA3．1．△I地OGAP．HT29亞克隆轉染組細胞的增殖能力、侵襲能力及凋亡細胞比例與對照組及空載組相比均無明顯差別，而高于DLC．1基因全長轉染組。并且，PCDNA3．1．△RHOGAP。HT29亞克隆轉染組細胞的RHOA蛋白活性和ROCK活性較DLC．1基因全長轉染組明顯增強，與對照組及空載組相比無明顯差別。3．PCDNA3．1．△SAM．HT29亞克隆轉染相對于DLC．1基因全長轉染組更顯著的抑制了細胞增殖及RHOA蛋白的活性，增強凋亡，但該組細胞侵襲、ROCK活性與全長轉染組相比無明顯差異。4．PCDNA3．1．△START．HT29亞克隆轉染相對于DLC．1基因全長轉染組，細胞增殖、侵襲能力增強，凋亡細胞減少，且‰A蛋白活性、ROCK活性均升高?！窘Y論J1．DLC一1基因在HT29細胞中發(fā)揮抑癌作用具有RHOGAP依賴性，RHOGAP結構域可能通過抑制RHO刖ROCK通路發(fā)揮抑癌基因作用。2．SAM結構域可能是內源性RH0GAP活性的自身抑制區(qū)域，同時，SAM結構域可能通過與其他蛋白、對蛆或DNA的相互作用而影響ROCK活性及細胞侵襲。3．START結構域可能協(xié)助RHOGAP結構域而起作用，具體作用途徑尚需進一步研究明確?！娟P鍵詞1肝癌缺失基因．1；基因轉染；結直腸癌；RHOGAP結構域；SAM結構域；START結構域1本課題受國家自然科學基金30471937和高等學校博士學科專項科研基金200802860040資助ⅡI

簡介：目的探究大鼠外周血間充質干細胞（PBMSC）有效的富集方法，并評價其表型特征、生長曲線、集落形成率以及體外培養(yǎng)向中胚層多系分化能力，為PBMSC作為間充質干細胞（MSC）的種子細胞新來源用于治療難治性組織損傷性疾病提供有價值的實驗依據(jù)。方法①選用4周齡SD大鼠，按100GKGDAY的劑量每日一次連續(xù)5天皮下注射粒細胞集落刺激因子（GCSF）進行干細胞動員；經(jīng)左心腔采血，用密度梯度離心法分離出單個核細胞，繼而用貼壁培養(yǎng)法得到成纖維樣集落生長細胞；細胞培養(yǎng)至第2代，用流式細胞術（CD90、CD44、CD29、CD45、CD11B和CD79A）和免疫細胞化學染色法（CD73、CD105、CD34和HLADR）分析分離、培養(yǎng)的PBMSC的表型特征。②MTS檢測繪制第2代（P2）PBMSC的生長曲線，并計算細胞倍增時間；采用龍膽紫染色法分析比較GCSF動員和未動員的SD大鼠外周血CFUF的集落形成率（CFE）。③取生長良好的P2代PBMSC，用商品化誘導培養(yǎng)基誘導其向成骨、成軟骨以及成脂細胞分化，于誘導21天后，分別采用茜素紅、阿利新藍和油紅O染色分析誘導效果。結果①外周血單個核細胞原代培養(yǎng)至6～7天可見明顯的成纖維樣細胞的集落樣生長，培養(yǎng)至21天細胞生長匯合度可達80％；傳代細胞貼壁能力強，形態(tài)均一，呈梭形漩渦狀生長。②FCM和免疫組化結果表明，富集的PBMSC高表達CD90、CD44、CD29、CD73及CD105，不表達CD45、CD11B、CD79A、CD34和HLADR。③生長曲線顯示，傳代培養(yǎng)的PBMSC增殖能力強，于培養(yǎng)次日即可進入對數(shù)生長期，細胞倍增時間為392H；CFUF集落形成率的結果表明，動員后的大鼠PBMSC的集落形成率為1567±207106，而未動員組僅為033±058106，兩者比較差異顯著（P﹤001）。④PBMSC的中胚層系分化能力誘導培養(yǎng)結果表明，經(jīng)成骨誘導分化21天后，茜素紅染色有明顯的鈣結節(jié)形成；經(jīng)軟骨細胞誘導分化21天后，阿利新藍染色誘導細胞胞漿內有大量糖胺聚糖形成；經(jīng)成脂細胞誘導分化21天后，油紅O染色顯示細胞內有大量脂滴形成。結論本實驗從大鼠外周血中分離富集到高豐度、高純度的PBMSC，其具備MSC的表型特征、生長特點和向中胚層多系的分化能力，進一步確證了大鼠PBMSC的存在和應用潛力。

簡介：中南大學博士學位論文MIF基因在膀胱癌組織中的表達及其反義表達載體對膀胱癌細胞生物學效應的研究姓名劉玉明申請學位級別博士專業(yè)泌尿外科學指導教師蔣先鎮(zhèn)20070501鱒士學位論文串文嫡要后的關系。3MIF與MMP9的關系。鵑果免疫組化結果圭膀胱癌組織中MIF器自高表達；兩正常膀胱上皮組織無表達。2MIF蛋自的表達水平隨臨床分期的增高而顯著增強PO05。3MIF的嵩表達是患者預后不良的危險因素。圣膀胱癌組織中基質金屬蛋自酶9MATRIXMETALLOPROTEINASE9，MMP9蛋患高表達；兩正常膀胱上皮組織無表達。RTPCR結果1所有膀胱癌組織中MIFMRNA均有表達，而正常膀胱癌組織中無L例表達。2MIFMRNA的表達水平隨臨床分期的增高麗顯著增強P005。3膀胱癌組織中MMPMRNA的表達異常增高；麗蘢常膀胱上皮組織無表達。3BTCC中MIFMRNA的表達與刪P9MRNA的表達具有相關性PEARSON系數(shù)0。470，PO018，MIF可能從轉錄水平鍵進MMP9的表達?！揪w論MIF基因MRNA水平和蛋白水平均表明MIF在膀胱移行細胞癌中表達異常增強，其表達在BTCC侵襲進展過程中起重要作用；MIF可能是評估患者預后一個有用指標。MMP9在膀胱移行細胞癌中表達增強。膀胱移行細胞癌中MIF與MMP9的表達具有楱關性，高表達的MIF可能從轉錄水平促進刪P9的表達。關鍵詞膀虢移行細胞癌，MIF，1愚4P9，臨床意義第二章MIF反義黼真核表達載體的鑒定及其抑制BIU87細胞MIF表達【匿的】為研究MIF反義RNA對膀胱癌細胞體外生物學的影響，建立并鑒定巍穩(wěn)定表達MIF反義RNA的膀胱癌細胞株，探討其對MIF表達的影響。方法將PSECTAGMIF、PCDNANTIMIF和空載體PSECTAG、PCDNA。質粒及熒光質粒PN3EGFP分別轉化細菌、擴增提取純化屠，應用脂質體介導的方法，PCDNA3ANTIMIF、空載體PCDNA。分別轉染體外培養(yǎng)的膀胱癌細胞株BIU一87，G418篩選抗性克隆并擴大培養(yǎng)傳代，利用RTPCR，WESTERBLOTING和細胞免疫組化法分別分析其對冒的基因MIF在MRNA和蛋囪水平靛表達的影喃。LL

簡介：點擊查看更多人骨形態(tài)發(fā)生蛋白-7基因轉染對原代培養(yǎng)兔髓核細胞生物學活性的影響.pdf精彩內容。

簡介：博士學位論文TIO2納米管對牙周膜干細胞和頜骨間充質納米管對牙周膜干細胞和頜骨間充質干細胞生物學行為影響的研究干細胞生物學行為影響的研究高暉培養(yǎng)類別全日制學位類型學術學位一級學科專業(yè)類口腔醫(yī)學二級學科專業(yè)口腔基礎醫(yī)學研究方向牙周組織再生指導教師金巖教授培養(yǎng)單位口腔醫(yī)院二O一五年五月第四軍醫(yī)大學THEFOURTHMILITARYMEDICALUNIVERSITY分類號R7802UDC61631密級公開第四軍醫(yī)大學博士學位論文目錄縮略語表1中文摘要3英文摘要8前言14文獻回顧16一、牙周組織再生的研究進展16二、TIO2納米管形貌對不同類型細胞生物學功能的影響23三、TIO2納米管的體內研究32正文34實驗一TIO2納米管微觀形貌的制備3411材料3412方法3513結果3514討論3615結論37實驗二TIO2納米管對牙周膜干細胞成牙周組織的影響3821材料3822方法3923結果4424討論5225結論54實驗三TIO2納米管對頜骨間充質干細胞生物學行為的影響5531材料5532方法5533結果57

簡介：目錄一、摘要中文摘要胃癌細胞系中FILAGGRIN基因突變的生物學意義及分子調控機制（1）英文摘要BIOLOGICALSIGNIFICANCEMOLECULARREGULATYMECHANISMOFFILAGGRINGENEMUTATIONINGASTRICCANCERCELLLINES（3）二、論文胃癌細胞系中FILAGGRIN基因突變的生物學意義及分子調控機制前言（5）第一部分胃癌細胞系中FILAGGRIN基因突變的生物學意義材料和方法（7）結果（13）討論（20）結論（23）第二部分胃癌細胞系中FILAGGRIN基因突變的分子調控機制材料和方法（25）結果（26）討論（28）結論（28）本研究的創(chuàng)新性與自我評價（29）三、參考文獻（30）四、附錄附錄英文縮略詞表（36）五、綜述FILAGGRIN基因及聚角蛋白微絲蛋白的研究現(xiàn)狀及進展（37）六、攻讀碩士期間發(fā)表文章情況（47）七、個人簡歷（49）八、致謝（50）基金資助內蒙古自治區(qū)科技創(chuàng)新團隊項目資助KJT2013北京大學腫瘤醫(yī)院腫瘤防治研究所分子生物學實驗室

簡介：天津醫(yī)科大學碩士學位論文應用組織芯片和細胞芯片技術研究肺癌中FHIT和相關蛋白的表達及其生物學意義姓名袁玲申請學位級別碩士專業(yè)病理學與病理生理學指導教師王新允20070501天律醫(yī)科大學碩士研究生論文和淋巴結轉移癌組織中失表達率分別為LO％、333％、517％和500％，原發(fā)性肺癌組MSI2蛋白的失表達率高于正常組P005；正常組與癌前病變組、正常組與轉移癌組、原發(fā)癌與轉移癌、原發(fā)癌與癌前病交、癌前病變與轉移癌之間FHIT表達差別無統(tǒng)計學意義PO05且惦12的表達與分化程度有關。而與性別、年齡、肉眼類型、臨床分期及是否伴有淋巴結轉移無關PO053P21蛋白陽性產(chǎn)物主要定位于胞漿或核，在各組中的陽性率分別為正常組90096，癌前病變組75096，原發(fā)性肺癌組“9％，淋巴結轉移性肺癌組25096；正常組和癌前病變組陽性率顯著高于原發(fā)性肺癌組和淋巴結轉移性肺癌組JDO054經(jīng)SPEARMAN等級相關分析，三種蛋白在組織芯片中表達的相關關系結果為FHIT與IIS12的表達呈明顯正相關R產(chǎn)0345，P005。5用我們的方法制作出的細胞芯片排列整齊，分布均勻，無掉片，符合觀察需要。HE染色鏡下每點均可見具有診斷意義的腫瘤細胞，基本無重疊現(xiàn)象。檢測結果與同時制作的相應涂片進行比較，結果完全一致。對細胞芯片進行了FHIT，MSH2，P21免疫組化染色后，細胞無明顯減少，胞漿或胞核呈棕黃色顆粒狀。所得陽性結果與各例相應涂片檢測結果完全一致。將細胞芯片檢測結果與進行FHIT，MSH2，P21免疫組化染色的組織芯片中ⅢⅣ期肺癌的檢測結果進行比較，差異均無統(tǒng)計學意義P005N

簡介：EB病毒BARFL原型和變異型基因對鼻咽癌細胞生物學行為的影響中文摘要背景和目的EB病毒EPSTEINBARRVIRUS，EBV編碼早期基因BARFL是新近確立的EBV致癌基因之一，其轉化作用已在多種細胞系中得到證實。由于BARFL在多數(shù)鼻咽癌NASOPHARYNGEALCARCINOMA，NPC和EBV相關胃癌組織中表達，推測其可能在NPC、胃癌等上皮細胞性腫瘤的發(fā)生中發(fā)揮重要作用。我們前期在檢測BARFL基因多態(tài)性時發(fā)現(xiàn)V29A變異型在NPC中的檢出率高于健康人群。本研究旨在探討B(tài)ARFL基因對NPC細胞系腫瘤原性的影響以及BARFL基因變異型對其致癌潛能的影響，為研究BARFL參與NPC的作用及機制提供依據(jù)。方法構建BARFL基因原型B958和變異型V29A慢病毒表達載體，分別轉染EBV陰性NPC細胞系CNE，殺稻瘟菌素篩選，RTPCR和QRTPCR鑒定目的基因表達獲得BARFL原型和變異型基因穩(wěn)定轉染細胞。以對照病毒轉染細胞為對照，進行MTT實驗、細胞周期檢測、平板克隆形成實驗、凋亡誘導實驗和細胞遷移實驗，檢測BARFL原型和變異型基因對CNE細胞生物學行為的影響。結果1成功構建BARFL基因原型和變異型基因穩(wěn)定轉染細胞，2種基因在EBV陰性NPC細胞系中均能有效表達。2細胞增殖實驗BARFL原型和變異型基因轉染細胞及對照病毒轉染細胞MTT吸光度值、平板克隆形成率和細胞周期細胞增殖指數(shù)均無顯著性差異P均大于O05。3凋亡誘導實驗順鉑299／M1誘導48H，感染BARFL原型和變異型慢病毒細胞的存活率均高于對照病毒感染細胞，差異有顯著性P均小于005，而細胞凋亡率低于對照病毒感染細胞，差異有顯著性P均小于005，變異型與原型之間細胞存活率和凋亡率均無顯著性差異P均大于005。4細胞遷移實驗BARFL原型和變異型慢病毒感染細胞的遷移能力高于對照病毒感染細胞，差異有顯著性氏005，變異型與原型之間細胞遷移無顯著性差異尸005。結論1BARFL基因對EBV陰性NPC細胞系CNE無明顯促增殖作用，但可提高其抗凋亡能力和遷移能力，從而增強CNE細胞腫瘤原性，在NPC發(fā)生發(fā)展過程中可能起重要作用。2BARFLV29A變異型對BARFL致癌潛能無明顯影響。碩士研究生楊穎病原生物學指導老師羅兵教授關鍵詞EB病毒；BARFL；鼻咽癌；細胞生物學行為BETWEENPROTOTYPEANDVARIANTBARF1一EXPRESSINGCELLSWASNOTSIGNIFICANTINCELLVIABILITYANDAPOPTOSISRATE胗0054THEPROTOTYPEBARF1一EXPRESSINGCELLSANDVARIANTBARF1EXPRESSINGCELLSLEDTOSTRONGERMIGRATIONCAPABILITYTHANTHENONEXPRESSINGCELLS尸005CONCLUSION1BARFLGENEHASNOSIGNIFICANTEFFECTONTHEPROLIFERATIONOFEBVNEGATIVENPCCELLLINECNE，BUTITCANINCREASEITSANTIAPOPTOSISANDMIGRATIONABILITIES，SUGGESTINGBARF1ENHANCETHEONCOGENICABILITYINCNECELLSANDMAYPLAYIMPORTANTROLESINTHEDEVELOPMENTANDPROGRESSOFNPC2THEV29AVARIANTOFBARF1HASNOSIGNIFICANTEFFECTONCARCINOGENICABILITYOFBARF1GENEPOSTGRADUATESTUDENTYINGYANGPATHOGENBIOLOGYDIRECTEDBYPROFBINGLUOKEYWORDSEPSTEINBARRVIRUS；BARFL；NASOPHARYNGEALCARCINOMA；CELLBIOLOGICALBEHAVIOR

簡介：甲氧滴滴涕（METHOXYCHLMXC）是環(huán)境內分泌干擾物的一種，化學名為二甲二苯三氯乙烷，作為滴滴涕的替代物廣泛使用，在土壤、河流、動植物體內、人體體液，甚至孕婦血液、胎盤、臍血、新生兒體內都檢測到了甲氧滴滴涕。滋養(yǎng)細胞（CYTOTROPHOBLASTCT）是構成胎盤的主要細胞，包括絨毛外和絨毛滋養(yǎng)細胞兩個亞型，其侵襲、免疫耐受、增殖分化、激素合成、物質代謝等生物學功能是妊娠發(fā)生、維持的必要條件。動物實驗發(fā)現(xiàn)甲氧滴滴涕可以造成不孕、流產(chǎn)率增加，因此研究甲氧滴滴涕對滋養(yǎng)細胞生物學功能的影響具有重要意義。本研究為滋養(yǎng)細胞亞型的原代培養(yǎng)、鑒定后用侵襲小室、RTPCR、WESTERNBLOT、放射免疫等方法研究甲氧滴滴涕對其侵襲能力、免疫耐受以及激素合成等生物學功能的影響。研究目的1研究MXC對絨毛外滋養(yǎng)細胞侵襲能力的影響；2研究MXC對絨毛外滋養(yǎng)細胞免疫耐受功能的影響；3研究MXC對絨毛滋養(yǎng)細胞HCG、P合成的影響。研究方法1用胰蛋白酶消化法得到單細胞懸液后流式細胞儀分選出滋養(yǎng)細胞亞型。光鏡，激光共聚焦，透射電鏡鑒定。2使用侵襲小室檢測空白對照組與1ΜMOLL甲氧滴滴涕處理組培養(yǎng)24H后絨毛外滋養(yǎng)細胞侵襲能力變化。3WESTERNBLOT檢測空白對照組與1ΜMOLL甲氧滴滴涕處理組培養(yǎng)24H后絨毛外滋養(yǎng)細胞MMP2、MMP9、HLAG蛋白表達。4RTPCR法檢測空白對照組與1ΜMOLL甲氧滴滴涕處理組培養(yǎng)24H絨毛外滋養(yǎng)細胞HLAGMRNA表達。5用放射免疫法檢測空白對照組與1ΜMOLL甲氧滴滴涕處理組絨毛滋養(yǎng)細胞培養(yǎng)48H后HCG、P值。結果1胰蛋白酶消化法加流式細胞儀分選出的細胞經(jīng)鑒定為絨毛外滋養(yǎng)細胞與絨毛滋養(yǎng)細胞。2甲氧滴滴涕處理組絨毛外滋養(yǎng)細胞穿膜細胞數(shù)與空白對照組相比減少，侵襲能力下降（T3509，P001），有統(tǒng)計學意義。3甲氧滴滴涕處理組絨毛外滋養(yǎng)細胞與空白對照組相比MMP9、MMP2蛋白表達下降。4甲氧滴滴涕處理組絨毛外滋養(yǎng)細胞與空白對照組相比HLAG蛋白和MRNA表達下降。5甲氧滴滴涕處理組絨毛滋養(yǎng)細胞合成HCG與空白對照相組比減少（T3079，P001），有統(tǒng)計學意義；甲氧滴滴涕處理組絨毛滋養(yǎng)細胞合成P與空白對照相組比減少（T2159，P001），有統(tǒng)計學意義。結論1胰蛋白酶消化法加流式細胞儀可以分選出滋養(yǎng)細胞亞型。2甲氧滴滴涕可以抑制絨毛外滋養(yǎng)細胞侵襲能力，其機制可能是減少絨毛外滋養(yǎng)細胞合成MMP2、MMP9。3甲氧滴滴涕降低絨毛外滋養(yǎng)細胞HLAG蛋白和MRNA表達。4甲氧滴滴涕可以抑制絨毛外滋養(yǎng)細胞合成HCG、P。

簡介：極低頻（EXTREMELYLOWFREQUENCY，ELF）電磁場指頻率在300HZ以下的電磁場，與我們日常生活關系極為密切，高壓輸電線以及工業(yè)生產(chǎn)、日常生活中電器所產(chǎn)生的電磁場（5060HZ）都屬于此范圍。近二十多年來大量流行病學調查表明，ELF電磁場暴露可能與兒童白血病、腦部腫瘤與乳腺癌的發(fā)生有關。ELF電磁場與癌癥發(fā)生的關系已成為目前國內外生物磁學領域研究的熱點。干細胞是研究發(fā)育生物學與腫瘤發(fā)生最有效的工具，間充質干細胞（MESENCHYMALSTEMCELLSMSCS）是骨髓組織中除造血干細胞以外的另一種干細胞，具有極強的分化潛能，任何對MSCS生物學特性上的影響都有可能對人體發(fā)育產(chǎn)生無法估量的后果。ELF電磁場引起宏觀生物效應需要時間的積累，我們此項研究的目的正在于衡量ELF電磁場的累積效應對MSCS的影響。本文以人間充質干細胞（HUAMNMSCSHMSCS）為研究對象，研究了50HZ，20MT電磁場對HMSCS生長、代謝與分化的影響。本文的創(chuàng)新點在于第一次使用HMSCS作為研究對象，較為系統(tǒng)的分析了電磁場對細胞生長和代謝的作用，指出了其中的部分關聯(lián)性，并初步探索了電磁場對HMSCS分化的可能影響。此外，本文還以肝癌細胞SKHEP1和早幼白血病細胞HL60作為研究對象，考察了50HZ，20MT電磁場對腫瘤細胞的影響，以期揭示其可能的治療作用。本實驗中HMSCS在50HZ，20MT電磁場下每天照射12H，照射23D，期間以MTT法檢測細胞數(shù)目，以葡萄糖乳酸、谷氨酰胺谷氨酸代謝及NAK濃度和滲透壓分析法檢測細胞代謝狀況，以堿性磷酸酶及茜素紅染色，堿性磷酸酶和鈣的定量分析來判斷HMSCS的成骨分化能力。本實驗中對腫瘤細胞SKHEP1和HL60均采用連續(xù)照射法，除上述部分檢測外，另用DNA梯度電泳，HOECHST33258染色和AOEB染法對電磁場照射后細胞的壞死與凋亡狀況進行分析。本文表明，HMSCS在50HZ，20MT電磁場作用下，生長18D后細胞數(shù)目比同期對照組中的要低245％，指數(shù)生長期的比生長速率比對照組低222％，細胞需要更多的時間（34D）用于擴增。照射組的葡萄糖、乳酸、谷氨酰胺和谷氨酸的平均比代謝率分別為7981010GCELLDAY、165109GCELLDAY、491109MMOLCELLDAY和692109MMOLCELLDAY，均比相應的對照組要低。電磁場直接作用于細胞，促使細胞的NAK從NAK通道中流出，最終導致細胞外NAK濃度增加，滲透壓也隨之增加。但本實驗對HMSCS的分化研究表明，電磁場的照射對于HMSCS的成骨分化未表現(xiàn)出顯著影響。本文研究同時表明，50HZ，20MT電磁場對腫瘤細胞SKHEP1和HL60的生長和代謝具有抑制作用，并引起滲透壓的改變，在一定程度上還可引發(fā)腫瘤細胞的凋亡。