簡介：STUDYONBIOLOGICALEFFECTSOFQUERCETINONB0VIE卜匠MAA心壓ARYEPIT髓LIA。LCELLSBYCHENJINGSUPERVISORPROFESSORWANGGENLINATHESISSUBMITTEDTONANJINGAGRICULTURALUNIVERSITYINPARTIALFULFILLMENTOFTHEREQUIREMENTFORMASTERDEGREEOFAGRONOMYNANJINGAGRICULTURALUNIVERSITYNANJING，210095，PRCHINACOMPLETEDINAPRIL2012COMMENCEMENTINMAY2012原創(chuàng)性聲明本人鄭重聲明所呈交的學(xué)位論文，是本人在導(dǎo)師的指導(dǎo)下，獨(dú)立進(jìn)行研究工作所取得的成果。除文中已經(jīng)注明引用的內(nèi)容外，本論文不包含任何其他個(gè)人或集體已經(jīng)發(fā)表或撰寫過的作品成果。對(duì)本文的研究做出重要貢獻(xiàn)的個(gè)人和集體，均已在文中以明確方式標(biāo)明。本人完全意識(shí)到本聲明的法律結(jié)果由本人承擔(dān)。學(xué)位論文作者需親筆簽名I伢韻少桫年否7月多日＼，J＼I學(xué)位論文版權(quán)使用授權(quán)書本學(xué)位論文作者完全了解學(xué)校有關(guān)保留、使用學(xué)位論文的規(guī)定，同意學(xué)校保留并向國家有關(guān)部門或機(jī)構(gòu)送交論文的復(fù)印件和電子版，允許論文被查閱和借閱。本人授權(quán)南京農(nóng)業(yè)大學(xué)可以將本學(xué)位論文的全部或部分內(nèi)容編入有關(guān)數(shù)據(jù)庫進(jìn)行檢索，可以采用影印、縮印或掃描等復(fù)制手段保存和匯編本學(xué)位論文。保密口，在一年解密后適用本授權(quán)書。本學(xué)位論文屬于不保密口。請(qǐng)?jiān)谝陨戏娇騼?nèi)打“√”學(xué)位論文作者需親導(dǎo)師需親筆簽名少今年∥月占日鈔L餌J67月6日

簡介：』㈣LOCALIZATIONEXPRESSIONANDINFLUNCINGFACTORS0FABCTRANSPORTERBREASTCANCERRESISTANCEPROTEINBCRPINTISSUESOFBR0ⅢERSBVSULIYADIRECTEDBYPROFWANGLIPINGATHESISSUBMITTEDTONANJINGAGRICULTURALUNIVERSITYINPARTIALFULFILLMENTOFTHEREQUIREMENTSFORTHEMASTERDEGREEOFAGRONOMYCOMPLETEDINDECEMBER2011COMMENCEMENTINDECEMBER2011目錄目錄摘要IABSTRACTIII本文部分縮寫的中英文對(duì)照V引言ⅥI第一章文獻(xiàn)綜述LLABCATPBLNDINGCASSETTE轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白家族簡介12BCRP的結(jié)構(gòu)23BCRP在組織中的分布及細(xì)胞定位24BCRP的底物35BCR_P對(duì)藥物體內(nèi)過程的影響451藥物吸收方面452藥物分布和代謝方面453與藥物排泄的關(guān)系66影響B(tài)CRP表達(dá)和功能的因素661疾病對(duì)BCRP表達(dá)和功能的影響762年齡對(duì)BCRP表達(dá)和功能的影響763性別和激素對(duì)BCRP表達(dá)和功能的影響864飲食中某些物質(zhì)對(duì)BCRP表達(dá)和功能的影響865藥物對(duì)BCRP表達(dá)和功能的影響866BCRP的基因多態(tài)性對(duì)BCRP蛋白表達(dá)及功能的影響97與獸醫(yī)相關(guān)的研究1071BCRP在常見動(dòng)物的定位及表達(dá)1072BCRP在乳腺的功能與藥物殘留LL73BCRP對(duì)獸藥的口服生物利用度及聯(lián)合用藥的影響128展望12參考文獻(xiàn)14第二章BCRP蛋白在肉雞組織中的定位和表達(dá)23L材料與方法。2311材料2312方法252結(jié)果2921免疫組織化學(xué)方法對(duì)BCRP蛋白的定位2922RNA抽提結(jié)果3223REALTIMEPCR動(dòng)力擴(kuò)增曲線、產(chǎn)物熔解曲線3224肉雞各組織BCRPMRNA和蛋白的檢測33；討論；ZI4，J、結(jié)35參考文獻(xiàn)36第三章不同日齡肉雞組織中BCRP表達(dá)規(guī)律的研究39L材料與方法～4011實(shí)驗(yàn)材料40

簡介：學(xué)校代碼10126分類號(hào)UDC論文題目學(xué)號(hào)密級(jí)編號(hào)奶牛乳腺上皮細(xì)胞的分離鑒定及DBP誘導(dǎo)B一酪蛋白的分泌研究THEISOLATIONANDIDENTIFICATL0NOFBOVINEMAMMARYEPITHETLCALCELLANDDBPINDUCEDSECRCT10NOFBCASEIN學(xué)院生金疊堂堂院專業(yè)動(dòng)塹堂研究方向生殖生塹當(dāng)墮生塹拉盔姓名寶釜目指導(dǎo)教師王瀣塞巫究雖2014年5月目錄摘要??????????????????????????????????一1關(guān)鍵詞?????????????????????????????????3ABSTRACT?．．．．????．．．．?．???．．．．．．?．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．4KEYWORDS?????????????????????????????????????????一6縮略詞表?????????????????????????????????7ABBREVIATIONS?．。?????．．。．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．?．．????．．．．。．．．．．．．?．．．．．．．．．．．．．．．．。．。．．。?．。。．，。．．。．．．。．，．．，7第一章奶牛乳腺上皮細(xì)胞的分離鑒定???????????????????．8引言??????????????????????????????????．81．1實(shí)驗(yàn)材料??????????????????????????????．91．1．1主要儀器和設(shè)備等????????????????????????，91．1．2主要試劑及耗材?????????????????????????．91．1．3活體材料的獲取?????????????????????????101．2實(shí)驗(yàn)方法??????????????????????????????101_2．1乳腺細(xì)胞的原代培養(yǎng)???????????????????????101．2．2牛乳腺上皮細(xì)胞冷凍和解凍培養(yǎng)??????????????????121．2．3牛乳腺上皮細(xì)胞的純化??????????????????????121．2．4牛乳腺上皮細(xì)胞的形態(tài)觀察實(shí)驗(yàn)??????????????????131．2．5牛乳腺上皮細(xì)胞生長曲線的繪制??????????????????131．26牛乳腺上皮細(xì)胞染色體制備及核型分析???????????????131．2．7牛乳腺上皮細(xì)胞的免疫熒光鑒定??????????????????14112_8PCR檢測D一酪蛋白在MRNA水平的表達(dá)?????????????．151．3實(shí)驗(yàn)結(jié)果??????????????????????????????161．3．1牛乳腺上皮細(xì)胞的原代培養(yǎng)????????????????????161．32牛乳腺上皮細(xì)胞純化???????????????????????181．3．3細(xì)胞形態(tài)觀察結(jié)果????????????????????????181．3．3牛乳腺上皮細(xì)胞的生長曲線????????????????????191．3．4牛乳腺上皮細(xì)胞的染色體制各及核型分析??????????????20

簡介：分類號(hào)S856學(xué)校代碼10129UDC6362學(xué)號(hào)2011216041呼和浩特地區(qū)某奶牛場奶牛乳腺炎病原菌的分離鑒定和藥敏試驗(yàn)HOHHOTREGIONASEPARATIONOFDAIRYCOWMASTITISPATHOGENIDENTIFICATIONSUSCEPTIBILITYTEST申請(qǐng)人馮超學(xué)位類別獸醫(yī)碩士指導(dǎo)教師王鳳龍教授田志高級(jí)獸醫(yī)師論文提交日期二〇一三年六月HOHHOTREGIONASEPARATIONOFDAIRYCOWMASTITISPATHOGENIDENTIFICATIONSUSCEPTIBILITYTESTABSTRACTBOVINEMASTITISISONEOFTHEMOSTCOMMONDISEASESOFDAIRYCOWBREEDINGCAUSEHUGEECONOMICLOSSESWHICHISINFLUENCEDBYMANYFACTSOFWHICHTHEPATHOGENICMICROGANISMSINFECTIONISONEOFTHEMAINEXPERIMENTALOBJECTIVETHISEXPERIMENTFROMACTUALLYCOMBINEDWITHCLINICALPRACTICE，COLLECTINGMILKSAMPLEFROMADAIRYFARMCOUNTINGONMILKSOMATICCELLCOUNTDIFFERENTIALCOUNTINGTHESEPARATIONOFBACTERIALCULTUREIDENTIFICATIONDRUGSUSCEPTIBILITYTESTEXPERIMENTALRESULTSOFTHEDATATHENFEDBACKTOCOWGUIDETHECLINICALMEDICATIONBREEDINGMANAGEMENTEXPERIMENTALMETHODSUSINGSOMATICCELLCOUNTMETERSOMATICCELLCOUNTONMILKSAMPLESWITHNEWMANSDYEINGMETHODSOMATICCELLCOUNTUNDERTHEMICROSCOPEWILLINGMILKSAMPLESWEREINOCULATEDONBLOODAGARMEDIUMQUEFUMANMAIKANGKAICULTUREMEDIUMFSEPARATIONOFTHEBACTERIACULTURECULTIVATINGTHETYPICALBIOCHEMICALIDENTIFICATIONOFBACTERIASTAPHYLOCOCCUSAUREUSFIVEBIOCHEMICALIDENTIFICATIONOFGENUS14BIOCHEMICALIDENTIFICATIONOFECOLIIDENTIFICATEDTHEBACTERIARESPECTIVELYMADE21KINDSOFDRUGSUSCEPTIBILITYTESTTHEEXPERIMENTALRESULTSCOLLECTINGTHE80CASESOFMILKSAMPLESSOMATICCELLCOUNTINUNDER2X105ARE34CASESBETWEENTHE2X1055X105ARE9CASESMETHAN5X105ARE37CASESTHEINCIDENCERATEOFMASTITISIS575THESUBCLINICMASTITISINCIDENCERATEIS1125THESUBCLINICMASTITISTAKEMASTITISINCIDENCERATEISABOUT1957SOMATICCELLMAINLYNEUTROPHILSMACROPHAGESLYMPHOCYTESTHETHREECELLACCOUNTSFABOUT98OFTHETOTALNUMBEROFSOMATICCELLSTHEMACROPHAGESARETHEMAINLYCELLSINNMALMILKTHENEUTROPHILSARETHEMAINLYCELLSINMASTITISMILKCULTIVATETHEBACTERIAAREMAINLYCOMPOSEDOFSTAPHYLOCOCCUSAUREUSECOLINOTCULTIVATESTREPTOCOCCUSCULTUREBACTERIAIN43CASESOFMILKSAMPLESSTAPHYLOCOCCUSACCOUNTEDF6977ENTEROBACTERACCOUNTEDF3023STAPHYLOCOCCUSAUREUSACCOUNTEDF4419EPIDERMISSTAPHYLOCOCCUSACCOUNTEDF1860STAPHYLOCOCCUSSAPROPHYTICACCOUNTEDF698ESCHERICHIACOLIACCOUNTEDF1395PROTEUSSPACCOUNTEDF930SHIGELLACHALMERACCOUNTEDF465KLEBSIELLASPACCOUNTEDF233TO

簡介：分類號(hào)UDC論文題目學(xué)校代碼10126密級(jí)編號(hào)THL7／IL一17在金黃色葡萄球菌小鼠乳腺感染模型中的動(dòng)態(tài)變化及功能初探學(xué)院中心生僉型堂堂醫(yī)學(xué)號(hào)圣曼QQ墨Q壘Z研究生割塞壹指導(dǎo)教師王遴副夔援專業(yè)筮生塑堂研究方向盆王魚瘞堂2013年4月15日內(nèi)蒙古大學(xué)碩士學(xué)位論文TH．17／IL．17在金黃色葡萄球菌小鼠乳腺感染模型中的動(dòng)態(tài)變化及功能初探摘要金黃色葡萄球菌乳腺炎發(fā)病機(jī)制復(fù)雜，深入了解乳腺對(duì)金黃色葡萄球菌感染的免疫應(yīng)答機(jī)制，是預(yù)防和控制金黃色葡萄球菌乳腺炎發(fā)生的關(guān)鍵。THL7細(xì)胞亞群及其分泌的主要細(xì)胞因子IL．17在胞外細(xì)菌感染和介導(dǎo)慢性炎癥中發(fā)揮重要作用。尤其是最新研究發(fā)現(xiàn)，Ⅲ．17在防御皮膚金黃色葡萄球菌感染中發(fā)揮了重要的免疫保護(hù)作用，為預(yù)防和治療金黃色葡萄球菌皮膚感染提供了新的靶點(diǎn)。乳腺作為機(jī)體特殊的組織器官，在金黃色葡萄球菌感染后，THL7細(xì)胞／IL．17的動(dòng)態(tài)變化規(guī)律如何發(fā)揮何種功能尚無研究報(bào)道。本論文在建立金黃色葡萄球菌感染小鼠乳腺炎模型的基礎(chǔ)上，以THL7細(xì)胞及其主要效應(yīng)因子IL．17作為研究對(duì)象，采用流式細(xì)胞術(shù)、REAL．TIMEPCR和ELISA檢測THL7細(xì)胞及IL．17在金黃色葡萄球菌感染乳腺炎癥中的應(yīng)答規(guī)律，體外試驗(yàn)驗(yàn)證IL．17在刺激牛乳腺上皮細(xì)胞分泌細(xì)胞因子的作用，初步評(píng)價(jià)IL．17在金黃色葡萄球菌感染乳腺后發(fā)揮的功能，為明確金黃色葡萄球菌乳腺炎的發(fā)病機(jī)制提供新的實(shí)驗(yàn)資料。結(jié)果1．成功建立了金黃色葡萄球菌感染小鼠乳腺炎模型，隨感染時(shí)間推移，小鼠乳腺炎癥加重，乳腺組織中炎性細(xì)胞浸潤程度增加。2．在攻菌后3、6、9天，THL、TH2和THL7細(xì)胞數(shù)顯著升高；細(xì)胞因子IFN7、IL．12THL，

簡介：分類號(hào)分類號(hào)碩士學(xué)位論文題目目中國中國荷斯坦荷斯坦奶牛HSP702基因的基因的多態(tài)性及其與乳腺炎的相關(guān)性多態(tài)性及其與乳腺炎的相關(guān)性TITLEPOLYMORPHISMINHSP702GENEANDASSOCIATIONWITHMASTITISINCHINESEHOLSTEIN學(xué)科、專業(yè)業(yè)神經(jīng)生物神經(jīng)生物學(xué)研究方向向分子生物分子生物學(xué)作者姓名名黃品導(dǎo)師及職導(dǎo)師及職稱稱蔡亞非蔡亞非教授教授論文提交日期論文提交日期2013年4月授予學(xué)授予學(xué)位日期位日期安徽師范大學(xué)學(xué)位評(píng)定委員會(huì)辦公室中國荷斯坦奶牛HSP702基因的多態(tài)性及其與乳腺炎的相關(guān)性安徽師范大學(xué)碩士學(xué)位論文二○一三年四月

簡介：點(diǎn)擊查看更多乳腺癌SET7-9表達(dá)水平及其與乳腺癌病理特征相關(guān)性研究.pdf精彩內(nèi)容。

簡介：分類號(hào)S墨三三UDC博士學(xué)位論文水牛乳腺基因表達(dá)譜與生長激素轉(zhuǎn)基因水牛的初步研究王錦學(xué)科專業(yè)動(dòng)物遣佳直獨(dú)皇鏊殖指導(dǎo)教師互徨題班究雖論文答辯日期2013匝一學(xué)位授予日期水牛乳腺基因表達(dá)譜與生長激素轉(zhuǎn)基因水牛的初步研究摘要水牛是中國南方極具開發(fā)潛力的主要家畜，具有耐粗飼、乳品品質(zhì)好等優(yōu)點(diǎn)。但由于我國本地水牛產(chǎn)奶性能低下，致使奶水牛產(chǎn)業(yè)的發(fā)展緩慢。因此，如何應(yīng)用現(xiàn)代生物技術(shù)培育出高產(chǎn)奶量的水牛新品種是目前要解決的主要問題。本研究首先分析了水牛泌乳期和非泌乳期乳腺組織基因表達(dá)譜，尋找差異表達(dá)基因，研究水牛的泌乳機(jī)制，并為培育高產(chǎn)奶量的轉(zhuǎn)基因水牛提供豐富的候選基因素材；然后，探索轉(zhuǎn)座子系統(tǒng)在水牛轉(zhuǎn)基因中的應(yīng)用，以期提高水牛轉(zhuǎn)基因的效率；構(gòu)建了乳腺特異性生長激素基因GH轉(zhuǎn)基因表達(dá)載體，在乳腺細(xì)胞和乳腺組織中進(jìn)行檢測，分析外源GH基因的表達(dá)對(duì)乳蛋白等基因表達(dá)的影響；最后，采用隨機(jī)整合、轉(zhuǎn)座子主動(dòng)整合等轉(zhuǎn)基因技術(shù)將重組GH基因?qū)胨；蚪M，生產(chǎn)GH轉(zhuǎn)基因的水牛胚胎，以期培育出高產(chǎn)奶量轉(zhuǎn)基因水牛新品種。本研究取得的主要結(jié)果總結(jié)如下1水牛泌乳期與非泌乳期基因表達(dá)譜及差異表達(dá)分析。構(gòu)建水牛泌乳期和非泌乳期乳腺組織基因表達(dá)譜，分析差異表達(dá)和泌乳期高豐度表達(dá)的基因，探討水牛泌乳的分子機(jī)制，也為轉(zhuǎn)基因水牛提供外源基因乳腺泌乳期特異性表達(dá)啟動(dòng)子?；虮磉_(dá)譜序列拼接后獲得114，014個(gè)單一的UNIGENES，與牛的基因組信息比對(duì)注釋了30290個(gè)基因，可以定位到270條相應(yīng)的通路上PATHWAY，其中與乳脂肪、乳蛋白和乳糖合成代謝通路相關(guān)基因表達(dá)豐度較高。在泌乳期乳腺組織中特異性表達(dá)的基因有3053個(gè)，占到所有基因序列的268％。比較水牛乳腺兩個(gè)時(shí)期基因表達(dá)量，泌乳期表達(dá)量

簡介：內(nèi)蒙古農(nóng)業(yè)大學(xué)研究生學(xué)位論文獨(dú)創(chuàng)聲明本人申明所呈交的學(xué)位論文是我本人在導(dǎo)師指導(dǎo)下進(jìn)行的研究工作及取得的研究成果。據(jù)我所知，除了文中特別加以標(biāo)注和致謝的地方外，論文中不包括其他人已經(jīng)發(fā)表或撰寫過的研究成果，也不包括為獲得我校或其他教育機(jī)構(gòu)的學(xué)位或證書而使用過的材料，與我一同工作的同志對(duì)本研究所做的任何貢獻(xiàn)均已在論文中作了明確的說明并表示謝意。申請(qǐng)學(xué)位論文與資料若有不實(shí)之處，本人承擔(dān)一切相關(guān)責(zé)任。論文作者簽名擅窒日期絲蘭芏笸魚竺旦內(nèi)蒙古農(nóng)業(yè)大學(xué)研究生學(xué)位論文版權(quán)使用授權(quán)書本人完全了解內(nèi)蒙古農(nóng)業(yè)大學(xué)有關(guān)保護(hù)知識(shí)產(chǎn)權(quán)的規(guī)定，即研究生在攻讀學(xué)位期間論文工作的知識(shí)產(chǎn)權(quán)單位屬內(nèi)蒙古農(nóng)業(yè)大學(xué)。本人保證畢業(yè)離校后，發(fā)表論文或使用論文工作成果時(shí)署名單位為內(nèi)蒙古農(nóng)業(yè)大學(xué)，且導(dǎo)師為通訊作者，通訊作者單位亦署名為內(nèi)蒙古農(nóng)業(yè)大學(xué)。學(xué)校有權(quán)保留并向國家有關(guān)部門或機(jī)構(gòu)送交論文的復(fù)印件和電子文檔，允許論文被查閱和借閱。學(xué)?？梢怨紝W(xué)位論文的全部或部分內(nèi)容保密內(nèi)容除外，采用影印、縮印或其他手段保存論文。論文作者簽名擅寶指導(dǎo)教師簽名J帷日期上嘞伽RELATIVITYOFTHESOMECYTOKINESONAPOPTOSISOFMILKSOMATICCELLINBOVINEMASTIFFSABSTRACTCOWMASTITISISAHIGHINCIDENCEOFADISEASEINDAIRYCOWCULTIVATIONINDUSTRYAFTERINFECTEDWITHPATHOGENICBACTERIUM，CYTOKINEWASRELEASEDTEGULATETHEIMMUNERESPONSEDIFFERENTCYTOKINESMAYINDUCEORINHIBITAPOPTOSISINDIFFERENTCELL，THEFACTORSAFFECTINGBOVINEMASTIFFSMILKSOMATICCELLAPOPTOSISINSEVERALCELLSHAVENOTBEENREPORTED82COWMILKSAMPLESCOMEFROMACERTAINFARMSWEREPATHOGENSISOLATEDINTHISSTUDYCYTOKINEIL6，IL8，TNFALEVELSWEREMEASUREDBYUSINGRIA，ITS’CORRELATIONWEREDISCUSSEDMILKSOMATICCELLSWERECOUNTEDBYUSINGDMSCC，CORRELATIONBETWEENIL6，IL8，TNF一0【ANDCHANGESINSCCWEREDISCUSSEDMILKSOMATICCELLSAMPLESWEREISOLATEDANDPREPARED，F(xiàn)LOWCYTOMETERANALYSISWASUSEDTODETECTAPOPTOSISOFMILKSOMATICCELLS，ANDAPOPTOSISRATEINLYMPHOCYTES，MACROPHAGES，NEUTROPHILS，MAMMARYEPITHELIALCELLSWERECALCULATED，CORRELATIONBETWEENIL6，IL8，TNFAANDAPOPTOSISRATEOFMILKSOMATICCELLWERESTUDIEDTHERESULTSSHOWTHATIL6，TNF0【，IL一8INMILKWEREARISENWITHTHEMASTITISINFLAMMATIONINTENSIFIED；THEREHASSOMECORRELATIONBETWEENIL一6，TNFQ，IL8ANDSCC，ANDTHECORRELATIONCOEFFICIENTRWERE055953，058602，090170；THEIL6LEVELSINCASEOFBOVINEMASTITISWERESIGNIFICANTLYNEGATIVELYCORRELATEDP001WITHEPITHELIALCELLS，MACROPHAGES，LYMPHOCYTES，ANDNEUTROPHILAPOPTOSIS，ANDTHECORRELATIONCOEFFICIENTABSOLUTEVALUEISCLOSETO1ORUPTO1BETWEENIL6ANDNEUTROPHILS，CORRELATIONBETWEENTHEMWEREMOSTOBVIOUSTHISSTUDYSHOWSTHATTHELEVELSOFIL6，IL8，TNF一0【INCOWMILKANDTHENUMBEROFSOMATICCELLSSHOWASIGNIFICANTPOSITIVECORRELATION，IL一6CANINHIBITAPOPTOSISOFVARIOUSCELLSINMILK，TNFC【CANPROMOTEAPOPTOSISOFEPITHELIALCELLSINMILKKEYWORDSBOVINE；MASTIT西；PATHOGENICBACTERIA；SOMATICCELKDETECTION，CYTOKINES；APOPTOSISDIRECTEDBYPROFWANGFENGIONGAPPIICANTFORMASTERDEGREEZHIYUMASTEROFBASICVETSCICOLLEGEOFVETERINARYMEDICINE，INNERMONGOLIAAGRICULTURALUNIVERSITYHOHHOT010018，CHINA

簡介：分類號(hào)UDC論文題目密級(jí)編號(hào)奶山羊乳腺上皮細(xì)胞及耳尖成纖維細(xì)胞轉(zhuǎn)人凝血因子Ⅸ基因的研究EXPRESSIONOFHUMANCOAGULATIONFACTORIXGENEINGOATNN，蝴MARYEPITHELIALCELLSANDFIBROBLASTCELLSUSINGTARGETINGVETOR生盟業(yè)血盅型曲五一班擅童班堂目錄摘要?????????????????????????????????????．1縮略詞表?????????????????????????????????一3第一章實(shí)驗(yàn)研究????????????????????????????????41．1．乳腺特異表達(dá)HFIX基因打靶載體的構(gòu)建?????????????????51．1．1．實(shí)驗(yàn)材料???????????????????????????一51．1．2．實(shí)驗(yàn)方法???????????????????????????．．51．1．2．1．從質(zhì)粒PBCSN2HFIXPA_RC中擴(kuò)增人凝血因子XCDNA序列???．51．1．2．2．?dāng)U增BGHPOLYA序列???????????????????～61．1．2．3．奶山羊B一酪蛋白基因5’同源臂的擴(kuò)增???????????61．1．2．4．奶山羊B～酪蛋白基因3’同源臂的擴(kuò)增???????????71．1．2．5．PCR擴(kuò)增產(chǎn)物的連接、鑒定?????????????????81．1．3．實(shí)驗(yàn)結(jié)果???????????????????????????．．91．1．3．1．1．人凝血因子IX的PCR擴(kuò)增??????????????91．1．3．1．2．BGHPOIYA的PCR擴(kuò)增????????????????91．1．3．1．3．奶山羊13一酪蛋白基因5’同源臂的PCR擴(kuò)增?????．101．1．3．1．4．奶山羊B一酪蛋白基因3’同源臂的PCR擴(kuò)增?????．101．1．3．1．5．HFIX插入表達(dá)載體PILIPGKBGHPOFYANEO‘????111．1．3．1．6．5’同源臂的酶切鑒定???????????????．．111．1．3．1。7．3’同源臂的酶切鑒定???????????????一121．1．4．討論??????????????????????????????????????．．131．2．奶山羊乳腺上皮細(xì)胞及奶山羊耳尖成纖維細(xì)胞的制備???????????141．2．1．奶山羊乳腺上皮細(xì)胞的制備???????????????????151．2．1．1．實(shí)驗(yàn)材料????????????????????????151．2．1．2．實(shí)驗(yàn)方法????????????????????????151．2．1．2．1．奶山羊乳腺上皮細(xì)胞的鑒定?????????????161．2．T．3．實(shí)驗(yàn)結(jié)果????????????????????????191．2．1，3．1．奶山羊乳腺上皮細(xì)胞的形態(tài)觀察???????????19

簡介：奶牛乳腺炎應(yīng)激條件下乳中脂肪酸變化及其調(diào)控研究REGULATIONOFSYNTHESISANDMETABOLISMOFFATTYACIDSUNDERTHESTRESSOFMASTIFFSINDAIRYCOW研究生王小龍導(dǎo)師楊章平毛永江教授副教授國家自然科學(xué)基金31272407，31372286和江蘇省教育廳自然科學(xué)基金13KJB230001資助SUPPORTEDBYNATIONSCIENCEFOUNDATIONOFCHINANO31272407，31372286ANDTHENATURALSCIENCEFOUNDATIONOFEDUCATIONALCOMMISSIONOFJIANGSUPROVINCE13KJB230001揚(yáng)州大學(xué)動(dòng)物科學(xué)與技術(shù)學(xué)院2014年5月?lián)P州人學(xué)博士學(xué)位論文13試驗(yàn)方法1514統(tǒng)計(jì)方法162J吉果1621隱型乳腺炎的檢測結(jié)果1622原料乳脂肪酸的檢測1623不同乳腺炎程度乳中脂肪酸比較173討論22第三章中國荷斯坦牛SCDL外顯子5基因多態(tài)性及其對(duì)乳中脂肪酸組成的影響一241材料與方法2411試驗(yàn)材料2412SCDL基因多態(tài)性檢測2513脂肪酸測定2514統(tǒng)計(jì)分析一252結(jié)果與分析2621SCDL基因多態(tài)性檢測2622基因型頻率分布及連鎖不平衡分析一2723脂肪酸測定一2824SCDL基因?qū)θ橹兄舅犷愋图爸舅犸柡椭笖?shù)的影響293討論32第四章奶牛乳腺炎應(yīng)激相關(guān)基因的表達(dá)及其調(diào)控機(jī)制34第一節(jié)金黃色葡萄球菌感染后乳中脂肪酸組成及其變化341材料與方法34111實(shí)驗(yàn)動(dòng)物34112菌種選擇34113細(xì)菌感染34113感染后癥狀觀察及臨床診斷352結(jié)果與分析35第二節(jié)金黃色葡萄球菌感染后奶牛乳腺組織基因表達(dá)譜芯片檢測一50

簡介：關(guān)于學(xué)位論文原創(chuàng)性和使用授權(quán)的聲明本人所呈交的學(xué)位論文，是在導(dǎo)師指導(dǎo)下，獨(dú)立進(jìn)行科學(xué)研究所取得的成果。對(duì)在論文研究期問給予指導(dǎo)、幫助和做出重要貢獻(xiàn)的個(gè)人或集體，均在文中明確說明。本聲明的法律責(zé)任由本人承擔(dān)。本人完全了解山東農(nóng)業(yè)大學(xué)有關(guān)保留和使用學(xué)位論文的規(guī)定，同意學(xué)校保留和按要求向國家有關(guān)部門或機(jī)構(gòu)送交論文紙質(zhì)本和電子版，允許論文被查閱和借閱。本人授權(quán)山東農(nóng)業(yè)大學(xué)可以將本學(xué)位論文的全部或部分內(nèi)容編入有關(guān)數(shù)據(jù)庫進(jìn)行檢索，可以采用影印、縮印或其他復(fù)制手段保存論文和匯編本學(xué)位論文，同時(shí)授權(quán)中國科學(xué)技術(shù)信息研究所將本學(xué)位論文收錄到中國學(xué)位論文全文數(shù)據(jù)庫，并向社會(huì)公眾提供信息服務(wù)。保密論文在解密后應(yīng)遵守此規(guī)定。論文作者簽名導(dǎo)師簽名日期亟望＆魚J一盈璩一囂目錄中文摘要IABSTRACTIIIL前言111乳腺發(fā)育及泌乳的研究1111乳腺的組織結(jié)構(gòu)和細(xì)胞組成2112乳腺發(fā)育的過程一3113乳腺的泌乳功能一312乳腺上皮細(xì)胞的培養(yǎng)4121乳腺上皮細(xì)胞的分離一4122乳腺上皮細(xì)胞的純化51123乳腺上皮細(xì)胞系的建立一613MIR200C研究進(jìn)展7131MIR200C與腫瘤發(fā)生一8132MIR200E與脂肪酸代謝一814ACACA基因研究進(jìn)展9141ACACFL基因的結(jié)構(gòu)和功能9142ACACA基因多態(tài)性與脂肪酸合成915本研究的目的意義LO2材料與方法1121材料11211乳腺組織、菌株和載體11212主要試劑及儀器設(shè)備L1213常用試劑的配制1322方法一15221乳腺上皮細(xì)胞的分離與培養(yǎng)15222分泌上皮細(xì)胞的單克隆培養(yǎng)17

簡介：分類號(hào)S8165UDC636學(xué)校代碼10129學(xué)號(hào)2009301019不同日糧模式對(duì)泌乳奶牛乳腺乳蛋白合成影響的研究ASTUDYONEFFECTSOFDIFFERENTDIETSONMILKPROTEINSYNTHESISINTHEMAMMARYGLOFDAIRYCOWS申請(qǐng)人張興夫?qū)W科門類農(nóng)學(xué)學(xué)科專業(yè)動(dòng)物營養(yǎng)與飼料科學(xué)研究方向動(dòng)物營養(yǎng)與畜產(chǎn)品品質(zhì)指導(dǎo)教師敖長金論文提交日期二〇一三年六月摘要牛乳中乳蛋白含量較低是中國乳品行業(yè)所面臨的重要問題，立足于中國的飼料資源，通過日糧調(diào)控的途徑提高乳蛋白含量與產(chǎn)量將有現(xiàn)實(shí)意義。本研究比較了中國奶牛養(yǎng)殖模式中三種具有代表性的日糧模式對(duì)泌乳奶牛乳腺乳蛋白合成的影響，找出了可能影響乳蛋白合成的關(guān)鍵因素，為提高奶業(yè)生產(chǎn)水平，推動(dòng)奶業(yè)發(fā)展提供科學(xué)數(shù)據(jù)。試驗(yàn)1不同氨基酸模式對(duì)奶牛乳腺上皮細(xì)胞酪蛋白合成的影響及機(jī)理研究本論文首先在體外研究了不同氨基酸模式對(duì)奶牛乳腺上皮細(xì)胞酪蛋白合成的影響，目的是確定氨基酸模式是否會(huì)影響乳腺上皮細(xì)胞酪蛋白的分泌，并對(duì)其機(jī)理進(jìn)行初步研究。試驗(yàn)采用完全隨機(jī)試驗(yàn)設(shè)計(jì)，氨基酸模式分別為低蛋白日糧條件下血液氨基酸組成模式組LPBP、全乳蛋白氨基酸組成模式組MP、酪蛋白氨基酸組成模式組CP、80酪蛋白20乳清蛋白氨基酸組成模式組CLP，每個(gè)處理3個(gè)重復(fù)，試驗(yàn)重復(fù)3遍（N12）。用RTQPCR檢測CSN1S1、CSN3、GLUT1、PRLR、STAT5和MT基因表達(dá)量，用ELISA法檢測ΑS酪蛋白合成量，用CCK8檢測細(xì)胞增殖活性。試驗(yàn)結(jié)果顯示氨基酸模式的不同影響奶牛乳腺上皮細(xì)胞酪蛋白的合成，全乳蛋白模式可能是一種較為理想的氨基酸模式。氨基酸模式通過調(diào)節(jié)MT、STAT5、PRLR和GLUT1基因的表達(dá)影響酪蛋白的合成。此外，研究發(fā)現(xiàn)在體外培養(yǎng)條件下，乳腺上皮細(xì)胞增殖活性與乳蛋白基因表達(dá)的趨勢并不一致。試驗(yàn)2不同日糧模式對(duì)泌乳奶牛乳產(chǎn)量與乳成分的影響論文的第二部分通過動(dòng)物試驗(yàn)明確了不同日糧模式對(duì)泌乳奶牛乳產(chǎn)量與乳成分的影響程度，為進(jìn)一步闡述不同日糧模式對(duì)乳腺內(nèi)乳蛋白合成的影響提供數(shù)據(jù)。采用完全隨機(jī)區(qū)組試驗(yàn)設(shè)計(jì)，30頭牛分為3組，每組10頭。分別飼喂三種日糧1）代表規(guī)?；B(yǎng)殖場日糧模式的混合粗飼料組（MIXEDFAGEMF）；2）代表奶牛養(yǎng)殖小區(qū)養(yǎng)殖模式的高精料秸稈組（CNSTRAWA）；3）代表散戶養(yǎng)殖模式的低精料秸稈組（CNSTRAWB）。試驗(yàn)期12周，預(yù)飼期3周正式試驗(yàn)期9周，每3周為一個(gè)試驗(yàn)周期，在每個(gè)試驗(yàn)周期的15～18D采集飼料樣、乳樣，并記錄產(chǎn)奶量。試驗(yàn)結(jié)果顯示MF組日糧的整體生產(chǎn)水平最佳，CSA組雖然在乳蛋白含量與產(chǎn)量上與MF組沒有顯著性差異，但是泌乳效率顯著低于MF組，CSB組除乳脂率外，其他乳成分指標(biāo)均低于CSA組與MF組。以上結(jié)果提示營養(yǎng)水平滿足需要時(shí)，平衡日糧的營養(yǎng)素利用效率更高；CSB組日糧營養(yǎng)水平滿足不了泌乳需要。試驗(yàn)3不同日糧模式下泌乳奶牛動(dòng)靜脈血中乳蛋白合成相關(guān)代謝物分析在試驗(yàn)2的基礎(chǔ)上，對(duì)泌乳奶牛陰部外動(dòng)脈與乳靜脈血中乳蛋白合成相關(guān)代謝物含量進(jìn)行分析，以期找出影響乳蛋白合成的關(guān)鍵因素。試驗(yàn)結(jié)果顯示不同日糧模式對(duì)泌乳奶牛陰外動(dòng)脈血液中PRL、GH、INR、IGF1、和葡萄糖的含量沒有顯

簡介：內(nèi)蒙古農(nóng)業(yè)大學(xué)研究生學(xué)位論文獨(dú)創(chuàng)聲明本人申明所呈交的學(xué)位論文是我本人在導(dǎo)師指導(dǎo)下進(jìn)行的研究工作及取得的研究成果。據(jù)我所知，除了文中特別加以標(biāo)注和致謝的地方外，論文中不包括其他人已經(jīng)發(fā)表或撰寫過的研究成果，也不包括為獲得我?；蚱渌逃龣C(jī)構(gòu)的學(xué)位或證書而使用過的材料，與我一同工作的同志對(duì)本研究所做的任何貢獻(xiàn)均已在論文中作了明確的說明并表示謝意。申請(qǐng)學(xué)位論文與資料若有不實(shí)之處，本人承擔(dān)一切相關(guān)責(zé)任。論文作者簽名違盥盤日期竺生生絲內(nèi)蒙古農(nóng)業(yè)大學(xué)研究生學(xué)位論文版權(quán)使用授權(quán)書本人完全了解內(nèi)蒙古農(nóng)業(yè)大學(xué)有關(guān)保護(hù)知識(shí)產(chǎn)權(quán)的規(guī)定，即研究生在攻讀學(xué)位期間論文工作的知識(shí)產(chǎn)權(quán)單位屬內(nèi)蒙古農(nóng)業(yè)大學(xué)。本人保證畢業(yè)離校后，發(fā)表論文或使用論文工作成果時(shí)署名單位為內(nèi)蒙古農(nóng)業(yè)大學(xué)，且導(dǎo)師為通訊作者，通訊作者單位亦署名為內(nèi)蒙古農(nóng)業(yè)大學(xué)。學(xué)校有權(quán)保留并向國家有關(guān)部門或機(jī)構(gòu)送交論文的復(fù)印件和電子文檔，允許論文被查閱和借閱。學(xué)校可以公布學(xué)位論文的全部或部分內(nèi)容保密內(nèi)容除外，采用影印、縮印或其他手段保存論文。論文作者簽名鎏璺璺童指導(dǎo)教師簽名薹垂主妄萬日期直塑蘭／DEFFECTSOFGLYCINEONPROLIFERATION，APOPTOSISANDGENEEXPRESSIONOFIMMUNEFACTORSOFMAMMARYEPITHELIALCELLSINDAIRYCOWABSTRACTTHEMAMMARYEPITHELIALCELLSOFDAIRYCOWCCMECWEREUSEDFORTESTPURPOSETOEXPLOREEFFECTSOFGLYCINEGLYONPROLIFERATION，APOPTOSISANDIMMUNERESPONSEOFCCMECPROLIFERATIVEACTIVITYCYCLE，APOPTOSISRATEOFCELLSANDGENEEXPRESSIONOFFOURIMMUNEFACTORSIL一1P，IL一6，IL一8ANDTNF0【W(wǎng)EREDETECTEDAFTERCULTUREDWITHGLYINORDERTOILLUSTRATEGLYWHETHERTOPARTICIPATEINTHEPROCESSOFCELLGROWTHANDIMMUNEREGULATION，ASWELLASTHEEFFECTSONIMMUNERESPONSEOFCCMECTHECONTENTANDRESULTSOFTHISPAPERSHOWEDASFOLLOWS1CCMECWEREISOLATEDWITHCOLLAGENASEDIGESTIONANDCULTUREDINVITROAFTERCULTUREDWITH0，1，2，5，10AND20MMOL／LGLYFOR24，48AND72H，MTTASSAYWASUSEDTODETECTCELLPROLIFERATIVEACTIVITYTHERESULTSSHOWEDTHATLOWCONCENTRATION1MMOL／LOFGIYPROMOTEDCELLPROLIFERATION，WHILEHIGHCONCENTRATION1020MMOL／LOFGLYINHIBITEDCELLPROLIFERATIONSIGNIFICANTLYP0052FLOWCYTOMETRYWASUSEDTODETECTCELLCYCLEOFCCMECWITHANNEXINVFITC／PIDOUBLESTAINING，AFTERCCMECWERECULTUREDWITH0，1，2，5，10AND20MMOL／LOFGLYITWASFOUNDTHATGLYSIGNIFICANTLYPROMOTEDCELLCYCLEOFCCMECCONVENEDTOSANDG2／MPHASEP005，ASWELLASPROMOTEDCELLDIVISION3FLOWCYTOMETRYWASUSEDTODETECTAPOPTOSISRATEOFCCMECWITHANNEXINVFITC／PIDOUBLESTAINING，AFTERCCMECWERECULTUREDWITH0，1，2，5，10AND20MMOL／LOFGLYTHERESULTSSHOWEDTHATGLYSIGNIFICANTLYPROMOTEDAPOPTOSISOFCCMECP005INTHISTEST，APOPTOSISRATEOFCCMECSUPPLEMENTEDWITH20MMOL／LOFGLYWASTHEHIGHEST4TOTALRNAWASEXTRACTED，AFTERCCMECWERECULTUREDWITH0，1，2，5，10AND20MMOL／LOFGLYTOTALRNAWASTRANSCRIBEDINTOEDNATHEGENEEXPRESSIONOFIL1B，IL一6，IL一8ANDTNFAWASDETECTEDWITHREALTIMEPCRPCRPRODUCTSWEREUSEDFORAGAROSEGELELECTROPHORESISTHERESULTSINDICATEDCCMECCULTUREDINVITROHADTHEABILITYTOSECRETEIL1P，IL一6，IL一8ANDTNFGTGLYCOULDSIGNIFICANTLY

簡介：內(nèi)蒙古農(nóng)業(yè)大學(xué)研究生學(xué)位論文獨(dú)創(chuàng)聲明本人申明所呈交的學(xué)位論文是我本人在導(dǎo)師指導(dǎo)下進(jìn)行的研究工作及取得的研究成果。據(jù)我所知，除了文中特別加以標(biāo)注和致謝的地方外，論文中不包括其他人已經(jīng)發(fā)表或撰寫過的研究成果，也不包括為獲得我?；蚱渌逃龣C(jī)構(gòu)的學(xué)位或證書而使用過的材料，與我一同工作的同志對(duì)本研究所做的任何貢獻(xiàn)均已在論文中作了明確的說明并表示謝意。申請(qǐng)學(xué)位論文與資料若有不實(shí)之處，本人承擔(dān)一切相關(guān)責(zé)任。論文作者簽名叢壁魚日期級(jí)生笪F壘內(nèi)蒙古農(nóng)業(yè)大學(xué)研究生學(xué)位論文版權(quán)使用授權(quán)書本人完全了解內(nèi)蒙古農(nóng)業(yè)大學(xué)有關(guān)保護(hù)知識(shí)產(chǎn)權(quán)的規(guī)定，即研究生在攻讀學(xué)位期間論文工作的知識(shí)產(chǎn)權(quán)單位屬內(nèi)蒙古農(nóng)業(yè)大學(xué)。本人保證畢業(yè)離校后，發(fā)表論文或使用論文工作成果時(shí)署名單位為內(nèi)蒙古農(nóng)業(yè)大學(xué)，且導(dǎo)師為通訊作者，通訊作者單位亦署名為內(nèi)蒙古農(nóng)業(yè)大學(xué)。學(xué)校有權(quán)保留并向國家有關(guān)部門或機(jī)構(gòu)送交論文的復(fù)印件和電子文檔，允許論文被查閱和借閱。學(xué)?？梢怨紝W(xué)位論文的全部或部分內(nèi)容保密內(nèi)容除外，采用影印、縮印或其他手段保存論文。論文作者簽名壟硅＆指導(dǎo)教師簽名窆醯日PRELIMINARYISOLATIONANDIDENTIFICATIONOFSTEMCELLSFROMMAMMARYOFHOLSTEINABSTRACTHOLSTEINCOWISONEOFTHEWORLD’SMAJORDAIRYBREEDS，ALSOISTHEFEEDREQUIREDMINIMUMBREEDWHICHPRODUCESPERUNITOFMILKVARIETIESTHEREISCLOSECONTACTBETWEENMAMMARYSTEMCELLSANDMILKPRODUCTIONTHEMAMMARYSTEMCELLSAREALSOTHEIMPORTANTMATERIALSFORBIOLOGICALREACTORRESEARCHINORDERTOOBTAINTHEMAMMARYSTEMCELLS，COWMAMMARYWEREDIGESTEDWITH400UNITS／MLCOLLAGENASEAT37℃FOR20HOURSANDTHENTHEOBTAINEDPRIMARYMAMMARYCELLSWERESCREENEDANDPURIFIEDBYSUSPENSIONCULTUREANDADHERENTCULTURETHEACQUIREDSTEMCELLSHAVETHEFOLLOWINGCHARACTERISTICS1THEYWEREBEENINDUCEDANDDIFFERENTIATEDINTOOSTEOBLASTSANDTHEYCOULDBESTAINEDBYALIZARINRED，WHICHWASACHARACTERISTICOFOSTEOBLASTS2THEYHAVESELFRENEWALCAPACITYTHEYCOULDFORMMAMMOSPHERELIKECELLMASSBYSUSPENSIONCULTURETHEYALSOEXPRESSEDSTEMCELLMARKERSLIKENANOG，SOX2，OCT4ANDTHEMAMMARYSTEMCELLSREFERENCEMARKERSLIKECD24，CD29ANDCD49FINADDITION，THOSECELLSWEGAINEDHAVEGREATCELLACTIVITIESAFTERTHEPROCEDUREOFFROZENINLIQUIDNITROGENANDTHAWEDANDNORMALDIPLOIDAFTERIDENTIFIEDBYTHENUMBEROFCHROMOSOMEANALYSISSOTHESECELLSWERESHOWEDTOHAVEGOODGENETICSTABILITIESKEYWORDSADULTCOWJMAMMARYSTEMCELLS；SUSPENSIONCULTURESEPARATION；PRELIMINARYIDENTIFICATIONDIRECTEDBYAPROFLIUYINGCHUNAPPLICANTFORMASTERDEGREELISHUAIMINBIOLOGICALENGINEERINGCOLLEGEOFLIFESCIENCEINNERMONGOLIAAGRICULTURALUNIVERSITYHOHHOT010018CHINA