山定子遺傳轉化體系的建立.pdf_第1頁
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文檔簡介

1、本實驗以山定子葉片為實驗材料，采用農桿菌介導法，研究了抗生素及轉化過程中各因素對轉化的影響，成功獲得轉化Mxirt1基因的山定子轉基因植株，建立了山定子轉化體系，為山定子性狀的定向改良奠定基礎。具體實驗結果如下： 研究了羧芐青霉素(Carb)、頭孢霉素(Cef)、卡那霉素(Kan)、潮霉素(Hyg)對山定子葉片愈傷組織和不定芽誘導的影響。結果表明，羧芐青霉素對山定子葉片再生有明顯的抑制作用，濃度低于450mg/L，的頭孢霉素對山

2、定子葉片愈傷和不定芽誘導影響不大。極低濃度的潮霉素即可導致山定子葉片大面積褐化死亡，不適合做篩選抗性芽的抗生素。Kan濃度為40mg/L時，恰好可完全抑制不定芽再生而不使葉片死亡，可作為山定子葉片轉化過程中合適的篩選壓力濃度。 通過比較在卡那霉素篩選培養(yǎng)基上的抗性芽百分率，研究激素配比、乙酰丁香酮、脯氨酸、共培養(yǎng)時間、預培養(yǎng)時間、侵染時間、暗培養(yǎng)時間、培養(yǎng)基碳源及固化物對轉化的影響。結果表明：預培養(yǎng)不利于山定子葉片的轉化；菌液中

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