SELDI-TOF-MS技術對大腸癌裸鼠動物模型早期蛋白組學研究.pdf

1、 中圖分類號： 中圖分類號：R89；R36；R39 碩 士 學 位 論 文 SELDI SELDI-TOF TOF-MS MS 技術對大腸癌裸鼠動物模型 技術對大腸癌裸鼠動物模型 早期蛋白組學研究 早期蛋白組學研究 院（系） 、所 院（系） 、所 臨 床 醫(yī) 學 院 研究生姓名 研究生姓名 李 亞 峰 學科、專 學科、專業(yè) 內 科 學 導 師 姓 導 師 姓 名 陶

2、華林 陶華林 教 授 二Ο一Ο年四月 Ο年四月 SELDI-TOF-MS 技術對大腸癌裸鼠動物模型 技術對大腸癌裸鼠動物模型 早期蛋白組學研究 早期蛋白組學研究 中 文 摘 要 目的 目的：利用結腸癌細胞懸液皮下接種 balb/c 裸小鼠，構建 HCT-116 人結腸癌裸鼠動物模型，觀測時間與移植瘤大小變化，檢測分析接種后不同時期裸鼠體內微量蛋白譜的變化，尋找差異蛋白，探索大腸癌的病因和發(fā)病機制。 方法 方法：1 模型的構

3、建：復蘇培養(yǎng) HCT-116 大腸癌細胞，收集第 3-5 代對數(shù)生長期細胞， 將細胞懸液調至密度 1×107/ml， 皮下以 0.1ml 接種于 10只 3-4 周齡裸鼠背部皮下,每隔十天測量瘤體大小并記錄.對照組同時用0.1ml 1640 培養(yǎng)基液接種。實驗組和對照組裸鼠分別在接種后 20d、40d和 60d 取血， 前兩次采用斷尾法取血 0.1ml， 最后一次采用摘眼球取血 05ml后處死裸鼠并剝離瘤體， 測量瘤體體積,剝

4、離的瘤體立即送病理科進行病理切片檢查。所取血液標本立即 4℃ 3 000 rpm 離心 5 min，將分離的血清分裝 3 管，30 μL/管并進行編號，立即凍存于 -80℃ 冰箱中備用。2 蛋白組學檢測與分析：利用 SELDI-TOF-MS 技術對裸鼠血清進行微量蛋白分析，將獲得的微量蛋白質譜圖用 Ciphergen ProteinChip 3.0 軟件進行數(shù)據(jù)的校正和分析，采用 Ciphergen Biomaker Wizard 3.