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文檔簡介
1、中國林蛙,是我國特有的經濟兩棲動物,具有很高的食用價值和藥用價值。在我國很多地區(qū)有分布,但主要分布于我國東北山區(qū)。林蛙油是由中國林蛙輸卵管經干制而成,是我國傳統(tǒng)的中藥,具有提高免疫、抗氧化等功效。本文旨在利用林蛙油及蛙卵提取林蛙油多糖和蛙卵油,為大幅提高林蛙產品的附加值,實現其綜合利用開辟一條新的途徑。
林蛙油經發(fā)制,以中性蛋白酶并輔助60Co輻照提取林蛙油多糖,以乙醇沉淀法得林蛙油粗多糖,粗多糖經Sevage法和三氯乙酸
2、法去蛋白,對比研究發(fā)現Sevage法去蛋白效果優(yōu)于三氯乙酸法,且蛋白去除率為94.66%,多糖的得率為94.11%。對林蛙油多糖脫色研究發(fā)現,D-101型大孔樹脂靜態(tài)吸附法和活性碳吸附法脫色效果不如10%的H2O2效果明顯,H2O2脫色率為52.26%。脫色后的林蛙油粗多糖溶液經過DEAE-Cellulose52凝膠進行層析分離,得到3種組分的多糖(分別命名為ORP-Ⅰ、ORP-Ⅱ和ORP-Ⅲ)。林蛙油多糖組分ORP-Ⅲ的GC結構分析結
3、果顯示:林蛙油多糖主要含有6種單糖,分別為鼠李糖、巖藻糖、阿拉伯糖、木糖、果糖和半乳糖,其摩爾比為1:8.5:4.8:1.8:6.2:21.7。紅外光譜分析發(fā)現,多糖同時具有α-和β-端差向異構的碳氫變角振動。多糖的高碘酸氧化發(fā)現,氧化后有甲酸生成,說明多糖結構中存在1→6糖苷鍵。分析核磁共振的碳譜和氫譜可得,多糖中含有糖醛酸和巖藻糖,且異碳頭數與單糖種數一致。
通過對比不同劑量60Co輻照提取林蛙油的紅外圖譜發(fā)現,在6K
4、gy劑量以下輻照,對林蛙油結構影響不顯著,9Kgy劑量以上輻照后對林蛙油多糖結構影響較大。
林蛙油多糖抗腫瘤藥理學實驗說明,林蛙油多糖具有抗腫瘤活性。2mg / ml的OPR-Ⅲ對105/孔SP2/0細胞的抑制率為43.26%,并通過雙染試劑盒的染色發(fā)現,細胞處于凋亡的狀態(tài),證實了林蛙油多糖在誘導腫瘤細胞凋亡的作用。通過小鼠的林蛙油喂養(yǎng)實驗,1%的酶解和未酶解飼料喂養(yǎng)小鼠可以顯著提高小鼠中的SOD、GR活性,且1%酶解林蛙
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