整合素αVβ6與癌相關成纖維細胞的關系及惡性腫瘤細胞生物學行為研究.pdf

1、背景和意義:
　　整合素(Integrin)，又稱整聯(lián)蛋白，是在細胞膜上的介導細胞和細胞之間、細胞和外界微環(huán)境之間的受體蛋白。細胞表面的受體家族有很多，整合素是其中的一員并具有可以調(diào)節(jié)細胞粘附作用，細胞之間以及對細胞運動起到牽引、支持及固定作用。之前研究表明β6亞基作為整合素亞家族中的一員，具有重要作用，β6亞基只與αV亞基形成關鍵分子并參與腫瘤的生長進展。在正常生理組織結(jié)構中，整合素αVβ6被正式具有重要功能作用，例如在組織損傷

2、及炎癥過程等一些良性病變例中，整合素αVβ6可達到幫助組織重建作用。整合素αVβ6可以誘導其他因子表達從而促進損傷部位的上皮細胞增殖以及遷移，對損傷部位的上皮組織進行修補代替。在上皮性腫瘤以及其他腫瘤細胞系檢測中整合素αVβ6的表達呈現(xiàn)高表達水平。許多惡性腫瘤細胞都跟整合素家族中各種亞型的表達有密切聯(lián)系，整合素αVβ6的表達在結(jié)腸腫瘤細胞中已被證實跟腫瘤的侵襲、轉(zhuǎn)移等機制相關。許多整合素的亞單位結(jié)構跟惡性腫瘤密切相關，促進腫瘤進展。作為

3、一種細胞粘附分子的受體，在多種惡性腫瘤細胞在正常組織中的侵襲和轉(zhuǎn)移中整合素αVβ6起到一定重要作用。某些腫瘤細胞的發(fā)展和惡化跟其表達的整合素α或β亞單位及功能的部分變化有密切聯(lián)系，例如整合素的α2異常表達被大量發(fā)現(xiàn)于完全朱分化癌中，整合素α6的異常表達最近也被發(fā)現(xiàn)在一些惡性腫瘤當中。整合素β6，細胞粘附分子受體，在各種惡性腫瘤的侵襲轉(zhuǎn)移當中扮演著一個重要的角色。實驗證明上皮來源腫瘤和腫瘤細胞系也可檢測到高表達的整合素β6。整合素β6被認

4、為是激活腫瘤生長的一個重要中介因素。因此，本研究試圖證實其在腫瘤擴散，生存、入侵和轉(zhuǎn)移中扮演的角色。
　　癌相關成纖維細胞（Cancer-associated fibroblasts，CAFs）是目前在腫瘤細胞微環(huán)境中已知的活化成纖維細胞，它是構成腫瘤間質(zhì)細胞組成的重要部分，在腫瘤細胞微環(huán)境中癌相關成纖維細胞與腫瘤細胞相互作用促進腫瘤的生長和進展，起了重要作用。在腫瘤細胞多階段的侵襲和轉(zhuǎn)移過程中，細胞粘附被認為具有重要的作用，因此

5、跟細胞粘附相關的因子成為研究熱點。癌相關成纖維細胞可表達平滑肌細胞標記物α-平滑肌肌動蛋白(alpha-smooth muscle actin，α-SMA)，并通過分泌一定的生長因子和細胞因子來促進腫瘤細胞的生長和血管生成。有研究發(fā)現(xiàn)腫瘤細胞中高表達的整合素，其某些亞基可以通過α-SMA的相互作用來影響癌相關成纖維細胞的生長。在細胞實驗已經(jīng)證實，通過慢病毒阻斷腫瘤細胞中整合素α3的表達，可以下調(diào)癌相關成纖維細胞中α-平滑肌肌動蛋白的表達

6、。因此，整合素αVβ6亞基以及α-SMA的表達水平或許可以作為評估胃癌患者預后的一個高風險的發(fā)展轉(zhuǎn)移性疾病的重要指標。根據(jù)我們實驗實之前對整合素β6在結(jié)腸癌及其他癌癥中的研究發(fā)現(xiàn)，整合素β6是甲狀腺濾泡癌治療的候選目標。腫瘤細胞的增值、入侵和轉(zhuǎn)移多與金屬蛋白酶MMP-2和MMP-9相關。我們之前的研究發(fā)現(xiàn)，抑制整合素β6調(diào)控磷酸化和/或非磷酸化的ERK1/2，抑制腫瘤細胞在培養(yǎng)基中分泌uPA，pro-MMP-9和pro-MMP-2，更重

7、要的是通過纖溶酶原激活物抑制依賴MAPK標記的膠原Ⅳ退化。
　　第一部分整合素αVβ6在胃癌組織中的表達及與癌相關成纖維細胞的相互作用對患者預后的影響
　　目的:本研究檢測整合素αVβ6在胃癌組織中的表達，探討整合素αvβ6和癌相關成纖維細胞的關系，揭示整合素αvβ6高表達在胃癌發(fā)展和惡化中發(fā)揮重要作用。分析整合素αVβ6的表達水平與胃癌患者臨床病理的相關性以及特性，為人類胃腫瘤的預測提供依據(jù)。
　　方法:通過免疫組織

8、化學方法分析胃癌組織中整合素αVβ6的表達水平和由癌相關成纖維細胞分泌的α-SMA的表達水平。并結(jié)合所有胃癌患者的臨床病理相關性特性分析整合素αVβ6和癌相關成纖維細胞表達與胃癌患者存活時間的關系。
　　結(jié)果:整合素的αvβ6主要在胃癌組織中表達，α-SMA主要在胃癌組織中的間質(zhì)中表達。具有整合素β6和α-SMA陽性高表達胃癌患者的總體存活率要比具有整合素β6和α-SMA陰性表達胃癌患者顯著降低(P＜0.05)。多因素生存分析表明

9、胃癌患者陽性整合素β6和α-SMA表達和/或擴散類型胃癌的總體存活率較差(P＜0.05)。
　　結(jié)論:整合素β6與癌相關成纖維細胞的檢測可以成為評估胃癌患者預后的一個有價值指標。
　　第二部分整合素β6在甲狀腺濾泡癌中的表達及與腫瘤復發(fā)的臨床關系
　　目的:本研究檢測整合素β6在甲狀腺癌組織中的表達，以及探討其在惡性腫瘤侵襲和轉(zhuǎn)移中扮演的角色。
　　方法:免疫組織化學法檢測甲狀腺濾泡狀癌患者中整合素β6，金屬蛋白

10、酶2和金屬蛋白酶9的表達水平。然后分析其表達與患者臨床相關參數(shù)以及生存時間的關系。
　　結(jié)果:整合素β6主要在甲狀腺濾泡癌細胞細胞膜和細胞質(zhì)中表達。金屬蛋白酶2和金屬蛋白酶9的表達主要在甲狀腺濾泡癌細胞的細胞質(zhì)中表達。在60例患者的臨床病理特征中，不同大小的腫瘤中整合素β6，金屬蛋白酶2和金屬蛋白酶9的表達水平有顯著的統(tǒng)計學差異。腫瘤不同的T分期中，整合素β6和金屬蛋白酶9的表達有顯著的統(tǒng)計學差異。腫瘤不同的M分期中，金屬蛋白酶2