DNA定量分析技術預測OPMDs癌變風險的研究.pdf

1、研究背景:
　　口腔黏膜潛在惡性疾病(Oral potentially malignant disorders，OPMDs)是指相對于其它口腔黏膜，癌變風險明顯增加的一類病損，包括口腔白斑、口腔扁平苔蘚、口腔紅斑、口腔黏膜下纖維性變等等，是口腔鱗癌最重要的來源之一。目前，組織病理學仍然是評價OPMDs癌變風險的金標準，但活體組織檢查有創(chuàng)傷性、過程耗時、患者依從性差等缺陷。因此，尋找一種無創(chuàng)、簡便、快速、患者易于接受的方法來預測高危

2、OPMDs的癌變風險很有必要。DNA定量分析技術(DNA content analysis)是通過對細胞核內的DNA含量或染色體倍數的測定來判斷細胞的生理狀態(tài)和病理改變的一種方法，是病理學由傳統(tǒng)的形態(tài)學描述向定量分析發(fā)展的產物，通常應用DNA指數(DNA index，DI)表示DNA的含量，可以間接反映染色體數目。DNA含量異常（異倍體）往往是組織細胞癌變的特異性指征，因此可作為癌變的一項標記物。DNA定量分析技術是否可以應用于評價口腔

3、黏膜潛在惡性疾病患者的癌變風險？其臨床價值如何？這就是本研究的目的和意義所在。
　　研究方法:
　　1.檢測口腔黏膜潛在惡性疾病患者的DNA含量并采用受試者工作特征曲線（Receiver operating characteristic curve，ROC曲線）統(tǒng)計得出應用DNA定量分析技術診斷口腔黏膜高級別異常增生/原位癌病損的最適DI值。
　　2.應用DNA定量分析技術檢測不同OPMDs病種患者的DNA含量并分析其

4、與臨床病理特征、細胞學改變之間的關系。明確該技術應用于評價口腔黏膜潛在惡性疾病不同病種患者癌變風險的臨床價值。
　　3.選擇口腔白斑、口腔扁平苔蘚（網紋型）、口腔黏膜下纖維性變患者，分別應用DNA定量分析技術檢測患者的DNA含量并分析其與臨床病理特征、細胞學改變之間的關系。
　　研究結果:
　　1.采用受試者工作特征曲線（Receiver operating characteristic curve，ROC曲線）統(tǒng)計得

5、出應用DNA定量分析技術診斷口腔黏膜高級別異常增生/原位癌病損的最適DI值為DI≥2.3的細胞數目至少為2個，以此可以作為應用DNA定量分析技術評價口腔黏膜高級別異常增生/原位癌病損的診斷標準參考值，并可根據該診斷標準參考值評價癌變風險。
　　2.應用DNA定量分析技術檢測不同OPMDs病種患者的DNA含量并分析其與臨床病理特征、細胞學改變之間關系的結果如下:
　　2.1.關于口腔白斑的Logistic回歸分析顯示:舌部病損

6、和根據白斑的分期體系屬于Ⅲ、Ⅳ期的自斑患者是DNA含量異常的風險因素，細胞核DNA含量改變與病理細胞學改變呈正相關。此外，細胞核形態(tài)參數比較分析顯示:高級別異常增生組的白斑DNA指數值（DI值）、核面積、平均半徑較低級別組高，而球形度、平均強度、熵、分形維數值較低級別組低。
　　2.2.關于口腔扁平苔蘚（網紋型）的Logistic回歸分析顯示:性別、年齡、病損部位、飲食習慣、吸煙、飲酒、上皮異常增生程度等因素都不是口腔扁平苔蘚（網

7、紋型）患者DNA含量異常的風險因素，而細胞核DNA含量改變與病理細胞學改變呈正相關。
　　2.3.關于口腔黏膜下纖維性變的Logistic回歸分析顯示:性別、年齡、病損部位、飲食習慣、吸煙、飲酒、上皮異常增生程度等因素都不是口腔黏膜下纖維性變患者DNA含量異常的風險因素，而細胞核DNA含量改變與病理細胞學改變呈正相關。
　　3.應用DNA定量分析技術檢測不同病種OPMDs患者的DNA含量，預測口腔白斑的高級別異常增生病損的敏

8、感性為67.74％，特異性為66.67％，陽性預測值為61.76％，陰性預測值為72.22％，假陽性率為38.24％，假陰性率為27.78％;預測網紋型口腔扁平苔蘚的高級別異常增生病損的敏感性為33.3％，特異性86.3％，陽性預測值為4.3％，陰性預測值為98.6％，假陽性率為95.7％，假陰性率為1.4％;預測口腔黏膜下纖維性變的異常增生病損的敏感性為14.3％，特異性為90.5％，陽性預測值為33.3％，陰性預測值為76.0％，假

9、陽性率為66.7％，假陰性率為24.0％。
　　結論:
　　1.應用DNA定量分析技術預測口腔黏膜潛在惡性疾病患者的癌變風險，得出針對口腔黏膜高級別異常增生/原位癌病損的陽性診斷標準參考值為DI≥2.3的細胞數目至少2個，并可根據該陽性評價標準預測癌變風險。
　　2.DNA定量分析技術在不同的口腔黏膜潛在惡性疾病的DNA含量異常的危險影響因素分析中有所不同，提示在臨床檢查中應當注意口腔黏膜潛在惡性疾病的DNA含量異常的

10、危險影響因素在不同病種間的差別，從而采取不同的預防重點。
　　3.與病理結果比較，DNA定量分析預測上皮異常增生病損的敏感性、特異性、陽性預測值、陰性預測值等等在不同的口腔黏膜潛在惡性疾病中有差別:預測口腔白斑的敏感性(67.74％)和特異性(66.67％)適中，陽性預測值(61.76％)和陰性預測值(72.22％)較高，因而適合在臨床上作為篩選口腔白斑患者的輔助手段。采用該技術判別網紋型OLP和OSF癌變的敏感性較低（分別為33

11、.3％和14.3％），但特異性較高（分別為86.3％和90.5％），因而可作為發(fā)現網紋型OLP和OSF患者癌變傾向的重要警示。
　　4.無論在何種口腔黏膜潛在惡性疾?。谇话装?、口腔扁平苔蘚、口腔黏膜下纖維性變）中，無論是否與“高危或低?！毕嚓P，DNA定量分析技術反映的細胞核DNA含量改變都與病理細胞學改變呈高度正相關，因為DNA定量分析技術檢測到的改變往往比病理細胞學改變出現的時間早，提示DNA定量分析技術不僅可以作為傳統(tǒng)病理學