肉質性狀相關基因的表達及消化道菌群多樣性與動物生長發(fā)育的關系.pdf

1、汶上蘆花雞和魯西黃牛作為我省優(yōu)良的地方畜禽品種，肉用性能的潛力很大，充分利用和發(fā)展它們的優(yōu)良特性，培育具有獨特遺傳性狀和優(yōu)點的地方品種，是我國畜禽業(yè)應對國外畜禽產品挑戰(zhàn)的重要戰(zhàn)略目標。然而，單純通過傳統(tǒng)的遺傳改良和營養(yǎng)調控手段來提高畜禽的肉質已面臨瓶頸，故而利用傳統(tǒng)方法結合分子生物學手段對畜禽的生長發(fā)育進行研究和改善，對于畜禽品種的改良、大規(guī)模養(yǎng)殖和生產均有著重要的實際意義。
　　本研究運用現(xiàn)代分子生物學技術手段，通過對肉質性狀的

2、候選基因進行序列多態(tài)性分析，從而發(fā)掘優(yōu)勢基因，為基因新資源的創(chuàng)新奠定技術基礎;同時還能為肉質優(yōu)良性狀提供原材料并加快育種進程，因此經濟效益和社會效益都非?？捎^。論文選擇了與肌肉性狀相關的負向調控因子—肌肉生長抑制素(myostatin，MSTN)基因和與脂肪代謝相關的跨膜蛋白18(TMEM18)基因作為候選基因對汶上蘆花雞和育肥期的魯西黃牛進行肉質性狀研究，分析這兩個基因的SNPs位點在汶上蘆花雞和魯西黃牛中的遺傳多樣性。通過分析SNP

3、s位點與品質性狀間的相關性，評價其遺傳效應;通過真核表達載體構建、轉染及半定量RT-PCR和Real-timePCR等方式進行功能驗證，明確其遺傳機制，尋找與品質性狀相關的分子標記，進而建立起一種優(yōu)質畜禽分子標記輔助選擇方法。
　　研究結果表明，汶上蘆花雞MSTN基因上游序列共有13個E-box(基因轉錄調控元件)，其中E3-box和E4-box存在多態(tài)性位點。對MSTN基因的體內表達和體外表達研究表明，E-box在調節(jié)MSTN基

4、因轉錄的過程中起著重要作用，E-box多態(tài)性可以改變MSTN基因的表達水平，不同的E-box對于MSTN基因的轉錄調控能力不同。魯西黃牛MSTN基因起始密碼子上游861bp為SNP位點，通過體外表達實驗發(fā)現(xiàn)包含該位點的上游序列對啟動子具有一定的活化作用，進一步實驗結果表明該SNP位點可能參與調節(jié)啟動子活性，在調節(jié)MSTN基因的轉錄過程中起到重要作用。魯西黃牛TMEM18基因起始密碼子上游541bp為SNP位點，體外表達實驗結果表明該位點

5、對啟動子也有明顯的調節(jié)作用。
　　動物消化道是一個復雜多樣的生態(tài)環(huán)境，其中微生物種類繁多，數(shù)量巨大，這些微生物對宿主的各項生理生化反應、食物的消化和營養(yǎng)物質的吸收、機體免疫調節(jié)等方面作用重大，動物消化道與微生物群落之間存在發(fā)育共生關系，消化道菌群失調會引發(fā)機體胃腸道屏障功能減弱、對營養(yǎng)物質的利用率降低、機體免疫功能低下等問題，進而會影響到動物的正常生長和發(fā)育。
　　本文利用基于16SrDNA的PCR-DGGE技術研究了不同油

6、菜籽飼喂水平的魯西黃牛腸道微生物菌群結構及組成，以及對魯西黃牛生長發(fā)育狀況的影響。研究結果表明，消化道不同部位具有其特殊的微生物群落。直腸內微生物的多樣性最高，其次是大腸和小腸，瘤胃內的微生物種類和數(shù)量較少，主要是產甲烷菌。在菜籽水平高的大腸組份中發(fā)現(xiàn)了大量假單胞菌屬，這些個體表現(xiàn)出腹瀉癥狀，因此證實了飼喂高菜籽含量對機體的消化作用產生負面影響。這些結果將有助于我們對魯西黃牛消化道微生物群落的組成結構、功能、影響和調控措施等有更一步的了