小孢擬盤多毛孢PM-1菌株代謝產(chǎn)物中除草活性物質(zhì)的分離及研究.pdf

1、本實(shí)驗(yàn)室前期從發(fā)病毛竹葉片上分離純化得到的一株真菌，經(jīng)形態(tài)學(xué)和分子生物學(xué)鑒定，明確其為小孢擬盤多毛孢Pestalotiopsismicrospora，并定名為PM-1菌株。文獻(xiàn)報(bào)道，該屬的真菌代謝產(chǎn)物多具有很強(qiáng)的藥理活性和抑菌、除草作用，該菌株經(jīng)生物測(cè)定對(duì)多種田間常見的雜草有較強(qiáng)的抑制作用，具有作為生物除草劑的開發(fā)潛力。本試驗(yàn)對(duì)小孢擬盤多毛孢粗提物的分離純化方法進(jìn)行研究，以期得到具有除雜草活性的毒素組分，為進(jìn)一步鑒定其化學(xué)結(jié)構(gòu)，研究其性

2、質(zhì)和功能提供依據(jù)，也為雜草的生物防治奠定基礎(chǔ)。本試驗(yàn)取得的主要結(jié)果如下:
　　 1.對(duì)小孢擬盤多毛孢PM-1菌株進(jìn)行了液體培養(yǎng)，發(fā)酵液用等體積乙酸乙酯萃取，旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)得到粗提物;利用高速逆流色譜(highspeedcountercurrentchromatography，HSCCC)對(duì)小孢擬盤多毛孢PM-1菌株的粗提物進(jìn)行了初步的分離純化研究。參考Oka設(shè)計(jì)的方法，配制10種溶劑體系，利用莖葉處理法對(duì)馬唐生長(zhǎng)的抑制率進(jìn)行計(jì)算并得到

3、分配系數(shù)，從而選擇最佳粗提物的HSCCC溶劑體系。結(jié)果表明，第7號(hào)溶劑體系較適合作為粗提物的HSCCC分離條件，即正己烷∶乙酸乙酯∶甲醇∶水=4∶5∶4∶5，在此分離條件下粗提物可以初步分離為Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ4個(gè)餾分，其中餾分Ⅱ有較強(qiáng)除草活性。餾分Ⅱ經(jīng)高效液相色譜法（HighPerformanceLiquidChromatography，HPLC）以乙腈∶水=75∶25(V/V)為流動(dòng)相經(jīng)過(guò)C18柱進(jìn)一步分離得到保留時(shí)間為7.95min的