玉米自交系親本及其雜交種的體細胞克隆變異研究.pdf

1、本文選擇了3個優(yōu)良玉米自交系并配制了2個相互雜交組合，然后以這些材料的幼胚為外植體建立了一套玉米組織培養(yǎng)和再生體系，并利用AFLP和MSAP分子標記技術研究了自交系親本及其雜交種在體細胞克隆過程中的序列變異和DNA甲基化變異的情況，旨在從分子水平上探討玉米體細胞克隆變異的機制，進而為玉米遺傳改良探討新的途徑和方法。研究工作主要得到以下結果： 1．基因型對玉米幼胚愈傷組織的誘導影響很大。雜種誘導能力明顯強于自交系，而雜種中正反交對

2、愈傷組織的誘導則沒有明顯的影響。 2．玉米自交系親本及其雜交種在體細胞克隆過程中存在遺傳變異和基于DNA甲基化水平和模式改變的表觀遺傳變異。雜交種的正反交之間甲基化模式的變異沒有明顯差異。 3．在不同的雜交組合中，玉米體細胞克隆序列變異情況無明顯差別。與愈傷組織比較，再生苗表現出的變異較少。 4．通過MSAP分析，發(fā)現在幼胚誘導愈傷組織，愈傷組織分化成再生苗的過程中，多數材料CCGG位點內側C完全甲基化水平和外側

3、C半甲基化水平及總的甲基化水平有先降低后升高后降低的趨勢，但也有一些基因型的材料這個趨勢不明顯。甲基化變異模式以去甲基化為主(0.9％-9.2％)，超甲基化變異較少(0.6％-3.6％)。 5．兩個雜交組合的AFLP與MSAP之間均存在極顯著的相關性，表明組織培養(yǎng)過程中表觀遺傳變異和遺傳變異之間可能存在某種內在的密切聯系。 6．對AFLP和MSAP檢測到的變異的DNA片段經過測序和同源性分析，結果表明玉米體細胞克隆變異發(fā)