現(xiàn)代生物技術試題

1、2011現(xiàn)代生物技術期末試卷現(xiàn)代生物技術期末試卷一填空題填空題1在基因工程實踐中，常用的載體有（質(zhì)粒），（噬菌體）和（腺病毒載體）質(zhì)粒質(zhì)粒是細菌染色體外能夠自主復制的環(huán)形雙鏈的DNA分子。質(zhì)粒DNA不僅能在細菌中復制，并且在添加真核復制信號和啟動子后，可以構(gòu)建出能在原核和真核細胞中均可復制的穿梭質(zhì)粒，并在真核細胞中表達，載體的特點：載體的特點：1、至少有一個復制起點，因而至少可在一種生物體中自主復制。2、至少應有一個克隆位點，以供外源D

2、NA插入。3、至少應有一個遺傳標記基因，以指示載體或重組DNA分子是否進入宿主細胞。4、具有較小的分子量和較高的拷貝數(shù)。2（限制性內(nèi)切酶）酶和（DNA連接酶）酶的發(fā)現(xiàn)和應用，才真正使DNA分子的體外切割與連接成為可能。3根據(jù)質(zhì)粒復制控制類型，可將質(zhì)粒分為（嚴緊型質(zhì)粒）和（松弛型）質(zhì)粒。根據(jù)載體功能劃分：根據(jù)載體功能劃分：1）.普通型載體，普通型載體，2）、表達型載體、表達型載體.表達外源基因以產(chǎn)生大量外源基因產(chǎn)物表達外源基因以產(chǎn)生大量外

3、源基因產(chǎn)物用于構(gòu)建用于構(gòu)建cDNA文庫文庫41993年美國科學家（KaryMullis）因發(fā)明PCR技術而獲得諾貝爾獎。5一切生物生命活動的結(jié)構(gòu)和功能單位是（細胞），其可分為（）和（）兩大類細胞分裂的方式:無絲:最簡單的細胞分裂方式只出現(xiàn)在低等生物或動植物的器官和組織內(nèi)有絲:是細胞分裂的主要形式其實質(zhì)是染色體經(jīng)過復制變成雙份再平均分配到兩個子細胞中從而保持遺傳物質(zhì)的穩(wěn)定傳遞.有絲分裂過程包括間期前期中期后期和末期.細胞的分裂是通過細胞周

4、期來實現(xiàn)的。S期，DNA合成的時期.從S期到有絲分裂期(M期)為G2期從M期結(jié)束到S期開始之前稱為G1期.6人工種子由（種皮）、（胚乳）和（胚）三部分構(gòu)成。7動物細胞常用的培養(yǎng)方法有（貼壁培養(yǎng)）、（懸浮培養(yǎng)）和（固定化培養(yǎng)）三種。8酶的命名方法有（系統(tǒng)命名）和（習慣命名）兩種。酶是生物體活細胞產(chǎn)生的、具有催化反應功能的蛋白質(zhì)酶是生物體活細胞產(chǎn)生的、具有催化反應功能的蛋白質(zhì)生物體內(nèi)的各種物質(zhì)代謝、能量傳遞、信息轉(zhuǎn)錄、生物體內(nèi)的各種物質(zhì)代謝

5、、能量傳遞、信息轉(zhuǎn)錄、神經(jīng)傳導、免疫調(diào)節(jié)、細胞衰老及生長發(fā)育等等，都離不開酶的參與。神經(jīng)傳導、免疫調(diào)節(jié)、細胞衰老及生長發(fā)育等等，都離不開酶的參與。作用：作用：1、執(zhí)行某種具體的生理功能；、執(zhí)行某種具體的生理功能；2、擔負保衛(wèi)清除功能；、擔負保衛(wèi)清除功能；3、協(xié)同激素起生物信號放大作用；、協(xié)同激素起生物信號放大作用；4、催化和調(diào)、催化和調(diào)控代謝反應控代謝反應所有的酶都由生物體合成，幾乎所有生物都能合成產(chǎn)生酶，酶在生物體內(nèi)的合成總是受其相應

6、合成調(diào)節(jié)機制控制，以保證機體最有效、經(jīng)濟地將體內(nèi)合成原料與能量用于自身生命最需要的酶等物質(zhì)分布：它們或定位于某亞細胞結(jié)構(gòu)上處于它們或定位于某亞細胞結(jié)構(gòu)上處于“溶解溶解”狀態(tài)；狀態(tài)；不同生物體細胞內(nèi)酶的數(shù)量和種類不同；同一生物體內(nèi)的不同生物體細胞內(nèi)酶的數(shù)量和種類不同；同一生物體內(nèi)的不同部位或不同生長發(fā)育階段的細胞內(nèi)酶的數(shù)量、種類不同；不同部位或不同生長發(fā)育階段的細胞內(nèi)酶的數(shù)量、種類不同；微生物酶來說，合成后分泌有兩種情況：胞外酶（分泌型酶

7、）是指可以穿過質(zhì)膜的任何酶，大多數(shù)是水解酶，大微生物酶來說，合成后分泌有兩種情況：胞外酶（分泌型酶）是指可以穿過質(zhì)膜的任何酶，大多數(shù)是水解酶，大多數(shù)工業(yè)用酶是胞外酶。胞內(nèi)酶多數(shù)工業(yè)用酶是胞外酶。胞內(nèi)酶是指合成后仍然在細胞內(nèi)發(fā)揮作用的酶。是指合成后仍然在細胞內(nèi)發(fā)揮作用的酶。酶系統(tǒng)分類命名的基礎是酶的專一性：酶系統(tǒng)分類命名的基礎是酶的專一性：3１基因工程基因工程利用DNA體外重組或PCR擴增技術從某種生物基因組中分離感興趣的基因，或是用人工

8、合成的方法獲取基因，然后經(jīng)過一系列切割，加工修飾，連接反應形成重組DNA分子，再將其轉(zhuǎn)入適當?shù)氖荏w細胞，以期獲得基因表達的過程.目的是按人類的意愿生產(chǎn)生物產(chǎn)品或改變物種的性狀來為人類的可持續(xù)生存和發(fā)展服務。補基因基因是攜帶遺傳信息的線性DNA分子，其核苷酸序列就包含一定的遺傳信息，這也是生物信息學的基礎?；虻奶攸c是：基因自體復制，基因決定形狀，基因可以突變（這是生物進化的基礎）基因的起始密碼子是AUG，終止密碼子是UAA，UAG，UG

9、A。分離目的基因切割目的基因和載體接（連目的基因和載體）轉(zhuǎn)（化宿主細胞）轉(zhuǎn)化宿主細胞—表達目的基因目的基因的獲得手段目的基因的獲得手段化學合成目的基因從基因組文庫中提取目的基因(DNA探針：核酸雜交)利用PCR擴增目的基因目的基因與載體DNA連接的方式平端連接：難度大，需酶量多黏端連接：容易一些，常用。大腸桿菌DNA連接酶(能連接平末端連接效率低)受體細胞的類型微生物：大腸桿菌、枯草芽孢桿菌、酵母和霉菌等植物細胞動物細胞：昆蟲細胞、L細

10、胞、HeLa細胞導入方法:高壓電穿孔法粒子轟擊法顯微注射法重組體篩選的方法重組體篩選的方法大體可分為兩種：核酸水平和蛋白質(zhì)水平（利用抗生素抗性篩選、插入失活法、電泳檢測法菌落雜交篩選法、免疫化學檢測法、DNA序列檢測）核酸水平上主要是通過核酸雜交。蛋白質(zhì)水平上主要是檢測抗生素抗性、營養(yǎng)缺陷型、觀察噬菌斑的形成、檢測目標酶活性、目標蛋白的免疫特性和生物活性。目的基因表達產(chǎn)物的檢測蛋白質(zhì)的PAGE表達蛋白生物學功能檢測２重組體重組體不同來源

11、的DNA組合成的分子３細胞融合細胞融合用自然或人工的方法使兩個或幾個不同細胞融合為一個細胞的過程用自然或人工的方法使兩個或幾個不同細胞融合為一個細胞的過程。細胞與組織培養(yǎng)可分為三個層次：細胞培養(yǎng)、組織培養(yǎng)和器官培養(yǎng)。全能細胞能夠表達生物體基因組的任何一種基因，并能夠分化出該生物體內(nèi)任何一種類型的細胞，進而發(fā)育為一個完全相同的生物體。愈傷組織細胞是分化的，但還沒有形成組織上的結(jié)構(gòu)植物組織培養(yǎng)的基本步驟培養(yǎng)材料的采集（全能性）培養(yǎng)材料的消毒