常見細菌課件

1、第六章　病原性微生物 第一節(jié) 常見病原性細菌,葡萄球菌屬,,概 述,萄球菌屬廣泛分布于自然界，包括 30 多個種，其中金黃色葡萄球菌（ S. aureus ）是人類最重要的 化膿性細菌，近年來，由于廣泛應用抗生素，耐藥菌株迅速增加，尤其是耐甲氧西林金黃色葡萄球菌（ methicillin-resistant S.aureus ， MRSA ）， 已成為醫(yī)院感染的最重要的病原菌,生物學性狀,,形態(tài)與染色培養(yǎng)特性生化反應,抗

2、原結構分類抵抗力,,,生物學性狀,1.形態(tài)和染色,,球形或橢圓形，典型排列呈葡萄串狀，無鞭毛，無芽胞，體外培養(yǎng)時一般不形成莢膜，革蘭染色為陽性。,2.培養(yǎng)特性,,血平板,營養(yǎng)要求不高 形成脂溶性的金黃色、白色或檸檬色等色素 血瓊脂平板上，有的菌株菌落周圍出現(xiàn)溶血,普通平板,3.生化反應,(1)觸酶陽性。(2)多數(shù)能分解葡萄糖, 麥芽糖和 蔗糖，產酸不產氣。(3)致病菌株能分解甘露醇，非致 病菌株不分解。,,⑴葡萄

3、球菌A蛋白(SPA) 特點: ①存在于90%的金黃色葡萄球菌。 ②可與人類IgG(1.2.4)的Fc段發(fā)生非特 異結合，結合后有兩中不同結果： a:協(xié)同凝集 b:致病作用,4.抗原結構,,⑵多糖抗原,5、分類：（1）根據凝固酶的有無來分類，分為兩大類:,（2）根據色素、生化反應等不同，分為三種：,,三種葡萄球菌的主要性狀,6、抵抗力,（1）強于其它無芽胞細菌。 在干

4、燥膿汁、痰液中可存活2-3個月。（2）耐鹽性強 在含10%-15% NaCl培養(yǎng)基中仍能生長。（3）耐藥性嚴重 耐甲氧西林金黃色葡萄球菌。,,,㈠致病物質,Pathogenesis,,（二）所致疾病,Pathogenesis㈠致病物質1、凝固酶（coagulase) 能使含有枸櫞酸鈉或肝素等抗凝劑的人或兔血漿發(fā)生凝固的酶類物質鑒別葡萄球菌有無致病性的重要指標。,,凝固酶與葡萄球菌的毒力關系,①抗

5、吞噬細胞的吞噬。②保護細菌不受血清中殺菌物質的破壞。③易局限化。④形成血栓與此酶生成有關。,,2、葡萄球菌溶素 對人致病的主要是α溶素。 蛋白質，不耐熱，可溶解紅細胞，對多種細胞如血小板 、白細胞、皮膚細胞有損傷作用。,,3、殺白細胞素（PVL),只攻擊中性粒細胞和巨噬細胞，抵抗宿主吞噬細胞，增強病菌侵襲力。,,4.腸毒素(enterotoxin),分為A、B…H9個血清型均能引起食物 中毒。 蛋

6、白質，耐熱，100℃30min不被滅活，抵抗胃液中的蛋白酶的水解作用，引起食物中毒。,,5、表皮剝脫毒素,也稱表皮溶解毒素，引起燙傷樣皮膚綜合征（也稱剝脫性皮炎）。 開始皮膚有紅斑，1-2天后表皮起皺出現(xiàn)大疤，然后脫落。,,6、毒性休克綜合征毒素-1,(toxic shock syndrome toxin,TSST-1) 起機體發(fā)熱，增加對內毒素的敏感性。 亦可引起機體多個器官系統(tǒng)的功能紊亂或毒性休克綜合征。

7、,,７、其他酶類： 　 耐熱核酸酶（致病性鑒別）　　 透明質酸酶　　 纖維蛋白溶酶,,㈡所致疾病,1、化膿性疾病 ?。?)局部感染: 如皮膚軟組織感染如膿皰瘡、癤、癰、蜂窩組織炎等，及肺炎、膿胸等器官感染。 （2)全身感染:敗血癥、 膿毒血癥等,2、毒素性疾病,（1) 食物中毒（2) 燙傷樣皮膚綜合征（3) 毒性休克綜合征3、葡萄球菌性腸炎,,,免疫性,人類對葡萄球菌有一定天然免疫力，只有皮膚受傷或機體免疫力下降時，

8、才易感染。感染后免疫力不強，下次可以再次感染。,,Laboratory diagnosis,,,,診斷路線：　　　　　　　　　　 鏡檢　　采集標本　　 分離培養(yǎng)　　純培養(yǎng)　　　　　 鏡檢　　生化反應　　　　　結論　　動物試驗,,,,,,,(一)標本1、化膿感染2、敗血癥3、腦膜炎4、食物中毒,Laboratory diagnosis,——膿汁,——血液,——腦脊液,——剩余食物、嘔吐 物、糞便。,(二)

9、直接涂片染色鏡檢,根據形態(tài)、排列和染色性可作初步診斷。,(三)分離培養(yǎng)和鑒定,作為致病菌株的參考指標：產生凝固酶產生金黃色色素有溶血性發(fā)酵甘露醇。產生耐熱核酸酶,(四)葡萄球菌腸毒素檢查,將可疑菌以肉湯培養(yǎng)后，取濾液注射6-8周齡幼貓腹腔，注射后4小時內發(fā)生嘔吐、腹瀉、體溫升高或死亡等現(xiàn)象，提示有腸毒素。,防治原則,,,,,,,,1.致病性與非致病性葡萄球菌的鑒 別要點。2.血漿凝固酶定義，類型，使血漿 凝固的原

10、理。3.金黃色葡萄球菌所致疾病以及防 治原則。,腸道桿菌,概述,,大多為正常菌群，某些情況下可成為條件致病菌。 部分為致病菌。如：傷寒沙門菌，志賀菌、致病性大腸埃希菌。,一大群寄居于人、動物腸道內的生物學性狀相似的G－桿菌。,共同特性：,1、形態(tài)、結構： 中等大小、G－桿菌、無芽胞，多數(shù)有鞭毛（除志賀菌、EIEC） 、菌毛。2、培養(yǎng)特性： 兼性厭氧或需氧。營養(yǎng)要求不高。,3、生化反應：,乳糖發(fā)酵試驗：

11、 在初步鑒別腸道致病菌與非致病菌有重要意義。 　 致病菌： 非致病菌：,一般不分解乳糖,多數(shù)分解乳糖,4、Ag結構：,(1)菌體(O)Ag：存在于所有G－細胞壁脂多糖層，耐熱。(2)鞭毛(H)Ag：鞭毛蛋白，不耐熱。(3)莢膜或包膜Ag：Vi抗原，K抗原。(4)腸道桿菌共同抗原(5)菌毛抗原,5、變異：耐藥性變異6、傳播途徑專一性7、致病物質同一性,埃希菌屬,E. coli with fimbriae,一

12、、致病性,致病物質：黏附素：菌毛、定居因子抗原內毒素外毒素K抗原,一、致病性——所致疾病,(一)腸外感染：以化膿性感染和泌尿道感染 最常見，如敗血癥，新生兒腦膜炎，泌尿 道感染。(二)腸道感染:某些血清型引起，與食入污 染的食品和飲水有關，有六種類型,1、腸產毒型大腸埃希菌(enterotoxigenic E.coli, ETEC),(1)所致疾?。簨胗變?旅游者腹瀉(2)致病物質：腸毒素、定植

13、因子,(3)致病機理：,不耐熱腸毒素(heat labile enterotoxin,LT): （由1個A亞單位，5個B亞單位組成）,,B亞單位：與腸粘膜上皮細胞表面GM1 神經節(jié)苷脂結合。A亞單位：作用于腺苷環(huán)化酶→ATP轉 化為cAMP→液體、電解質過 度分泌，導致腹瀉。,耐熱腸毒素:(heat stable enterotoxin,ST) 激

14、活腸粘膜細胞上鳥苷環(huán)化酶→胞內cGMP↑，腹瀉。,2、腸侵襲型大腸埃希菌(enteroinvasive E.coli,EIEC),(1)疾?。阂疠^大兒童、成人膿血便、類似菌痢，有發(fā)熱，腹痛、腹瀉、里急后重。(2)致病機理：不產生腸毒素，侵襲結腸粘膜上皮細胞。,3、腸致病型大腸埃希菌(enteropathogenic E.coli,EPEC),主要引起嬰幼兒腹瀉。 不產生腸毒素，也無侵襲力，病菌黏附于微絨毛，導致刷狀緣被破壞

15、，微絨毛萎縮、上皮細胞排列及功能紊亂，造成水樣腹瀉。,4、腸出血型大腸埃希菌（enterohemorrhagic E.coli,EHEC),,引起出血性腸炎和溶血性尿毒綜合征機制：志賀毒素Ｓtx中斷蛋白質合成，引起上皮細胞微絨毛的破壞。,5、腸集聚型大腸桿菌（enteroaggregative E.coli,EAEC) 引起嬰兒持續(xù)性腹瀉，水樣便。 機理：菌毛黏附于腸上皮細胞表面并形成磚塊狀排列，產生毒性的物質并

16、干擾腸液吸收。,引起腹瀉的大腸埃希菌,(一)標本 腸道外感染取中段尿、血液、膿液、腦脊液，腸道內感染取糞便。(二)分離培養(yǎng)和鑒定 初步鑒定靠IMViC（++--），最后鑒定靠系列生化試驗。,二、微生物學檢查法,水、食品等衛(wèi)生細菌學檢查,我國衛(wèi)生標準： 每升飲水≤3個大腸菌群每100ml瓶裝汽水、果汁等≤5個,防治原則,疫苗母乳中sIgA可中和大腸埃希菌腸毒素，故母乳喂養(yǎng)嬰兒可減少嬰兒腹瀉的發(fā)生。治療選用磺胺、慶大

17、霉素、氟派酸等，但易產生耐藥性。,沙門菌屬 (Salmonella),寄生于人、動物腸道。對人致?。簜?、副傷寒的沙門菌。對動物和人致病的有鼠傷寒沙門菌、腸炎沙門菌、豬霍亂沙門菌等。,一、生物學性狀,1、形態(tài)結構： 有周鞭毛、菌毛、無莢膜。2、生化反應： 不發(fā)酵乳糖。,,3、Ag結構：,主要有O、H、Vi AgO Ag：至少58種,每個沙門菌的血清型含有 一種或多種抗原刺激機體產生IgM。H Ag：分

18、為第Ⅰ和第Ⅱ相兩種，刺激機體 產生IgG。Vi Ag：Ag性弱，不穩(wěn)定,可阻止O抗原與其 相應的抗體起凝集反應。,4、抵抗力,較差 水中能存活2-3W糞便中可活1-2個月 冰凍土壤中可過冬耐受膽鹽、煌綠及其他染料對熱耐力差,二、致病性：,(一)致病物質： 1、侵襲力：耐酸應答基因、菌毛、Vi抗原 菌毛：與M細胞結合，SPI-Ⅰ分泌侵襲蛋白通過M細胞輸入到巨噬細胞，引起宿主細胞內肌動纖維的重排，誘

19、導細胞膜內陷，導致細菌內吞，并且在吞噬小泡內生長繁殖導致宿主細胞死亡，并且可擴散進入鄰近的淋巴細胞組織。 耐酸應答基因：使在胃和吞噬體內得到保護。 Vi抗原：,(一)致病物質： 2 內毒素： 、 3、腸毒素：,宿主體溫↑，WBC↓，腸熱癥主要由內毒素引起。,引起腹瀉。,(二)所致疾病：,1、傷寒和副傷寒 　　病菌-→消化道-→穿過小腸粘膜-→淋巴結-→大量繁殖-→入血(第一次菌血癥)-→全身多個器官-→ 再次入血

20、(第二次菌血癥),1.腸熱癥,攝入的細菌,,腸系膜淋巴結,,,胸導管,全身疼痛、不適發(fā)熱（前驅期）,菌血癥,肝、脾、腎及膽囊等吞噬細胞吞噬,,膽囊,腎臟,,持續(xù)高熱、肝脾腫大、全身中毒、玫瑰疹、相對緩脈,菌血癥,,進入腸壁淋巴組織,糞便,尿,并發(fā)癥：腸穿孔、血栓性靜脈炎、膽囊炎,典型病例病程為3-4W,孤立和集合淋巴結壞死潰瘍,淋巴管,,(二)所致疾?。?典型癥狀前驅癥狀：發(fā)熱、不適、全身疼痛等第二次菌血癥：體溫階梯上升（３９-４０

21、℃），保持７-１０天；相對脈緩；肝脾腫大；玫瑰疹。并發(fā)癥：腸出血和腸穿孔。,傷寒瑪麗,2、食物中毒(腸炎型)：,一次攝入大量病菌。 癥狀:發(fā)熱、惡心、嘔吐、腹痛、水樣腹 瀉，偶有黏液或膿性腹瀉。,3、敗血癥： 多見于兒童或免疫力低下的成人。 癥狀：高熱、寒戰(zhàn)、厭食、貧血等，腸道 癥狀少，并發(fā)腦膜炎、骨髓炎、膽囊 炎、關節(jié)炎等。,４.無癥狀帶菌者　　與年齡、性別關系密切,三、免疫性：,

22、細胞免疫為主病后有較牢固免疫力,四、微生物學檢查,傷寒和付傷寒食物中毒 敗血癥第1周取靜脈血可疑食物 血第1-3周取骨髓液嘔吐物第2周起取糞、尿 糞,,肥達反應（Widal reaction）,用已知傷寒沙門菌O、H和甲型副沙寒沙門菌和肖氏沙門菌H抗原與病人血清做定量凝集試驗，用以輔助診斷腸熱癥,判定結果時，應著重考慮：,正常凝集價傷寒沙門菌O抗體的凝集價1：80以上，H抗體1：160以

23、上甲型副傷寒、肖氏沙門菌H抗體凝集價在1：80以上 動態(tài)觀察O與H抗體的診斷意義,H與O抗體的性質及其消長意義,防治原則,加強水源和食品衛(wèi)生管理疫苗傷寒、甲及乙型副傷寒3聯(lián)菌苗Ty2la傷寒沙門菌口服活菌苗傷寒Vi莢膜多糖疫苗治療以氯霉素效果較好,病史：任某，男，21歲，醫(yī)學院學生，于三周前進行細菌學實驗時，不慎將裝培養(yǎng)物的試管打破，菌液濺到手指和桌面，當即用肥皂洗手多次，下課后進食堂用餐?；厥疑岷蟀l(fā)現(xiàn)自己的指甲過長，

24、便修剪了指甲。于5天前無明顯誘因出現(xiàn)發(fā)冷發(fā)燒，全身不適，多汗，食欲不振等。體檢：患者呈急性面容、潮紅、神清但略有呆滯，前胸見散在的細小紅色丘疹。體溫39.4℃，脈緩52次/min，睥可觸及，白細胞3600/ mm3，余均正常。問題：該同學感染了什么細菌，診斷是什么疾病，如何檢查？,Laboratory diagnosis,,,,診斷路線：　　　　　　　　　　 鏡檢　　采集標本　　 分離培養(yǎng)　　純培養(yǎng)　　　　　 鏡檢　

25、　生化反應　　　　　結論　　血清學試驗,,,,,,,思考題,1.常見的痢疾是由哪些細菌引起？2.腸產毒型大腸桿菌的致病機制？3.肥達氏反應的原理以及結果判斷？,一、 生物學性狀形態(tài)染色G+細桿狀，周毛菌，無莢膜，芽胞正圓形，位于菌體頂端，大于菌體寬度，呈鼓槌狀。,破傷風梭菌,培養(yǎng)特性 專性厭氧，血平板上呈擴散生長，有β溶血，不發(fā)酵糖類，不分解蛋白質,肉渣培養(yǎng)基生長良好（混濁、變黑、有腐臭味）。抵抗力強，芽胞在干燥土壤中

26、可存活數(shù)十年，耐熱100℃1h，對青霉素敏感,致病性與免疫性,傳染途徑及傷口條件 破傷風為創(chuàng)口感染 能否發(fā)生感染的條件——傷口的厭氧微環(huán)境傷口窄而深，混有泥土及異物壞死組織多，局部缺血伴有需氧菌或兼性厭氧菌的混合感染,致病物質——破傷風痙攣毒素（外毒素） 為神經毒素，毒性強，僅次于肉毒毒素，與脊髓前角運動細胞及腦干細胞有高度的親和力。毒素與中樞神經組織結合非常牢固，一 旦結合即非抗毒素所能中和。,破傷風

27、痙攣毒素可與中樞神經抑制性突觸前膜的神經節(jié)苷脂結合，阻斷抑制性介質的釋放，導致神經持續(xù)興奮，骨骼肌強直性痙攣，肌張力↑ 特點為：不耐熱，65℃ 30min即被破壞；易被蛋白酶分解破壞,破傷風痙攣毒素,破傷風痙攣毒素的作用機制,所致疾病——破傷風潛伏期：幾天至幾周典型體征：牙關緊閉、吞咽困難、苦笑面容、角弓反張等，陣發(fā)性抽搐等，嚴重者因呼吸肌痙攣窒息死亡。,微生物學檢查：臨床診斷防治原則正確處理傷口——防止形成厭氧微

28、環(huán)境人工自動免疫——類毒素（百白破三聯(lián)疫苗） 人工被動免疫——破傷風抗毒素 緊急預防 特異性治療治療—抗毒素+抗生素+鎮(zhèn)靜解 痙藥物,微生物學檢查與防治,分枝桿菌屬 (Mycobacterium),分枝桿菌屬是一類細長略彎曲的桿菌，有時呈分枝生長趨勢，故得名?？顾崛旧栃?，又

29、呈抗酸桿菌主要包括：結核分枝桿菌、麻風分枝桿菌、非結核分枝桿菌,結核分枝桿菌（M.tuberculosis),結核病的病原菌世界上1/3人感染，70%在亞洲,形態(tài)與染色,細長略帶彎曲，呈分枝狀抗酸染色陽性L型Much顆粒,專性需氧生長緩慢營養(yǎng)要求高，在羅氏固體培養(yǎng)基中生長良好，呈菜花狀,培養(yǎng)特性,“懶、饞、變” 花菜樣菌落,生化反應,結核分枝桿菌大多數(shù)觸酶試驗陽性，而熱觸酶試驗陰性，非結核分枝桿菌則大多數(shù)兩種試驗均陽性

30、,抵抗力（四怕） （四不怕）,對乙醇敏感對濕熱敏感對紫外線敏感對抗結核藥物敏感,抗干燥抵酸堿抗堿性染料對青霉素等抗生素耐藥,強,變異性,可發(fā)生形態(tài)變異、菌落變異、毒力變異、耐藥性變異卡介苗（BCG）：是毒力變異株耐藥變異：多重耐藥結核?。∕DR TB）,（一）致病物質,無毒素與侵襲性酶類與菌體成分有關,1、脂質,索狀因子：為分枝菌酸和海藻糖結合的糖脂，與結核桿菌索狀生長現(xiàn)象有關；能破壞細胞線粒體膜，影響

31、細胞呼吸，抑制白細胞游走和引起慢性肉芽腫；分枝菌酸與細菌的抗酸性染色有關。磷脂：促使單核細胞增生，與結核結節(jié)的形成及干酪樣壞死有關。,,蠟質D：是肽糖脂和分枝菌酸的復合物，可激發(fā)機體產生遲發(fā)型超敏反應。硫酸腦苷脂：抑制吞噬細胞中吞噬體與溶酶體的結合，使細菌能在吞噬細胞中長期存活。,1、脂質,2、蛋白質,是結合菌素的主要成分，和蠟質D結合后能使機體發(fā)生超敏反應。在形成結核結節(jié)中發(fā)揮一定作用。,3、多糖與脂質成分結合存在于胞壁中，致

32、病作用尚不清楚,,,（二）所致疾病,感染方式呼吸道、消化道或皮膚損傷等多途徑侵入機體致病機制：細菌增殖引起的炎癥反應菌體成分的毒性作用機體產生超敏反應,1、肺部感染,原發(fā)感染多發(fā)生于兒童原發(fā)綜合征繼發(fā)感染多發(fā)生于成人病灶局限，不易擴散易發(fā)生干酪樣壞死和空洞,2、肺外感染,結核分枝桿菌可進入血液循環(huán)引起肺內、外播散，如腦、腎結核、脊柱結核等。結核分枝桿菌進入消化道可引起腸結核、結核性腹膜炎等。,（三）免疫性,結核的

33、免疫屬于感染免疫，又稱有菌免疫。即此種免疫力隨結核分枝桿菌或其成分在體內存在而存在。屬胞內感染菌，其免疫主要是以T細胞為主的細胞免疫。,（四）超敏反應,細胞免疫為主，遲發(fā)型超敏反應同時存在。郭霍現(xiàn)象表明：再感染時潰瘍淺、易愈合、不擴散，表明機體已有一定免疫力。但再感染時潰瘍發(fā)生快，說明在產生免疫的同時有超敏反應的參與。rRNA誘導機體產生特異性免疫，結核菌素和蠟質D誘導機體產生超敏反應。,郭霍現(xiàn)象,（五）結核菌素試驗,是應用

34、結核菌素來測定機體能否引起皮膚遲發(fā)性超敏反應的一種試驗，以判定機體對結核分枝桿菌有無免疫力。,定義：,結核菌素試劑,舊結核菌素（old tuberculin，OT)每0.1ml含5單位純蛋白衍化物(purified protein derivative，PPD)人結核分枝桿菌制成的PPD-C卡介苗制成的BCG-PPD每0.1ml含5單位,方法,2種PPD5個單位兩前臂皮內注射48～72h后紅腫硬結超過5mm者為陽性≥15mm

35、為強陽性，對臨床診斷有意義，兩側紅腫中，PPD-C大于BCG-PPD側為感染，反之，為卡介苗接種所致。,結果分析,陽性——感染過TB或接種卡介苗成功強陽性——活動性結核病陰性——未感染過TB未接種卡介苗細胞免疫力功能低下,應用,選擇卡介苗接種對象和測定卡介苗接種后的免疫效果。結核菌素試驗陰性者應接種或補種卡介苗在未接種卡介苗的人群中作結核桿菌感染的流行病學調查,了解人群自然感染率作為嬰幼兒(尚未接種過卡介苗者)結核病的輔助

36、診斷測定腫瘤患者的細胞免疫功能,標本取材,標本的選擇根據感染部位而定,直接涂片鏡檢,標本直接涂片或集菌后涂片，用抗酸染色若找到抗酸陽性菌即可初步診斷金胺“O”染色菌體 呈黃色熒光,集菌,提高檢出率痰液、尿液、糞便等需消化后濃縮,分離培養(yǎng),羅氏培養(yǎng)基結核分枝桿菌生長緩慢，一般需2～4周長成肉眼可見的落菌,動物試驗,細菌核酸檢測（PCR）,四、防治原則,預防,接種卡介苗DNA疫苗等,治療,抗結核藥物的治療原則：早期、聯(lián)合、適量、