《信號轉導與腫瘤》ppt課件

1、信號轉導與抗癌藥物研發(fā),朱孝峰中山大學腫瘤防治中心,,細胞信號轉導 是指細胞通過細胞表面（或胞內）受體接受外界信號，通過系統(tǒng)級聯(lián)傳遞機制，將胞外信號轉導為胞內信號，最終引起細胞生理反應或誘導特定基因的表達，引起細胞的應答反應，這種特定的反應系統(tǒng)稱之為細胞信號通路。,一、細胞外信號,信號分子：多肽類生長因子、糖蛋白、疏水的小分子物質。與什么受體結合：取決于其化學結構特征細胞外的多肽和蛋白類信號分子必須與細胞膜

2、上受體結合，然后經過蛋白質之間的相互作用，細胞骨架改變以及細胞內大分子運動等中間步驟將信號最終傳遞到細胞核。小分子脂溶性調節(jié)因子如甾類激素和視黃酸可以很容易地穿過細胞膜，與細胞內的受體結合，而這些受體一般都是基因轉錄調節(jié)因子。,二、受 體,,?膜受體通過細胞外部分識別生長因子或細胞因子等，并且將信號傳遞到胞內部分?結合配體能誘導跨膜受體蛋白構象改變，并進一步激活細胞內的尾部。?癌細胞可通過多種途徑影響受體的活性，如基因擴增，通

3、過基因突變產生組成型激活分子。?受體是一個分子，它與配體結合可以引起生物反應，同時也存在另一類配體結合蛋白，但它們不能直接引起生物學反應，因此不能稱作受體。,三、蛋白激酶,蛋白質的可逆磷酸化是信號轉導過程中一個重要的調節(jié)機制。蛋白質的磷酸化是指在蛋白激酶的催化作用下發(fā)生的，激酶的催化活性通常受磷酸化、與其它蛋白直接結合、第二信使水平的改變等多種機制調節(jié)。,激酶大多數(shù)屬于絲氨酸/蘇氨酸蛋白激酶，這類蛋白激酶使底物蛋白質的絲氨酸或蘇氨酸殘

4、基磷酸化，包括了cAMP依賴性蛋白激酶（PKA）、cGMP依賴性蛋白激酶（PKG）、蛋白激酶C（PKC）、Ca2+-CaM依賴的蛋白激酶，血紅素依賴性蛋白激酶等等；另一類為酪氨酸蛋白激酶，被磷酸化的是底物酪氨酸殘基。,四、聯(lián)結蛋白,連接蛋白（Adaptor）在信號轉導通路起著重要的橋梁作用，它們本身沒有催化活性，不能直接激活效應蛋白，而是能把信號轉導通路的蛋白連接成信號復合物，使各信號通路有機地整合成一個信號網絡，以整體形式對特定的信號

5、刺激做出反應。聯(lián)結蛋白與信號轉導密切相關的蛋白結合區(qū)域主要有：SH2區(qū)、SH3區(qū)、PTB區(qū)、PH區(qū)等。,五、G蛋白,細胞信號轉導中扮演重要角色的G蛋白主要有兩類：一類是與膜受體偶聯(lián)的異三聚體蛋白，一般稱之為經典G蛋白或大G蛋白，它們由α、β、γ三個亞單位組成，βγ二聚體通過共價結合錨于膜上起穩(wěn)定α亞基的作用，而α亞基本身具有GTP酶活性；另一類是存在于不同的細胞部位的小分子量G蛋白，也稱為“小G蛋白”。小G蛋白由一條肽鏈組成，分子量約為

6、20-26 kDa，即Ras、Rho、Rab、Arf、Ran和Rad等。,六、第二信使,第二信使（second messenger）是相對細胞外的第一信號而言，一般指一些受體與配體結合被激活后，導致細胞內濃度短暫升高（或降低）的一類小分子物質，它們包括cAMP、cGMP、DAG、IP3、Ca2+、NO氣體等。,七、核受體,盡管大部分生長因子和許多激素等刺激細胞生長的信號是通過膜受體來完成的，但有些激素是通過核受體傳導信號的。這類受體常位

7、于胞漿中，當配體與之結合后，形成二聚體，然后轉運至核內，可以作為轉錄因子，調控某些基因表達。,一、酪氨酸激酶信號轉導途徑二、死亡受體信號轉導途徑三、DNA損傷checkpoints（檢查點）途徑四、應激激活的信號轉導途徑五、JAK/STAT信號轉導途徑六、Wnt信號轉導途徑,腫瘤的信號轉導,酪氨酸激酶信號轉導途徑,,1. 1979　多瘤病毒中T抗原的酪氨酸磷酸化2. 1980 v-Src, c-Src

8、, v-Abl和EGF受體的蛋白酪氨酸激酶活性3. 1981 胰島素刺激的胰島素受體酪氨酸激酶活性4. 1982　V-Src與cAMP依賴性蛋白激酶催化亞單位的序列相似性　　　　 C-Abl基因在慢性粒細胞性白血病中重排5. 1983　多瘤病毒中T抗原與c-Src及其激活相關1984　v-Erb癌基因源于EGF受體1985 c-Src被酪氨酸磷酸化而負性調節(jié)1986 Neu癌基因作為EGF受體家族成

9、員帶有激活性點突變1987 果蠅Sevenless是受體酪氨酸激酶1988 乙酰膽堿受體被酪氨酸磷酸化調節(jié)1989 酪氨酸磷酸化負性調節(jié)細胞周期調節(jié)激酶1990 SH2結構域與磷酸化酪氨酸結合1992 單個受體酪氨酸磷酸化位點結合不同的SH2蛋白酪氨酸磷酸化激活STAT轉 錄因子14. 1998 首個用于治療HER2高表達的乳癌的單克隆抗體Herceptin被FDA批準15

10、. 2001 首個酪氨酸激酶抑制劑STI571被美國FDA批準治療慢性粒細胞性白血病,酪氨酸磷酸化研究的重要歷史事件,多數(shù)細胞生長因子受體都含有酪氨酸激酶的肽鏈序列。所以，這類受體通稱為酪氨酸激酶受體。這些受體具有極為相似的結構：細胞外的一段糖基化肽鏈，是與配體結合的部位；中間是單一的及疏水性的跨膜區(qū)；最后是具有酪氨酸激酶活性的膜內區(qū)，C末端的調節(jié)區(qū)。,受體酪氨酸激酶的基本結構,第一類以上皮生長因子受體（EGFR）為代表，包括EGF

11、R、HER2、HER3、HER4等，此類受體的高表達常見上皮細胞腫瘤；第二類為胰島素受體家族，包括胰島素受體、胰島素樣生長因子受體（IGF-R）、胰島素相關受體（IRR）等，在血液細胞腫瘤中常見此類受體的高表達；第三類為血小板衍生的生長因子受體（PDGFR）家族，包括PDGFRα、PDGFRβ、克隆刺激因子（CSF-1R）、c-KIT等，此類受體在腦腫瘤、血液細胞腫瘤等常見高表達；,第四類為纖維細胞生長因子受體（FGFR）家族，包括

12、有FGFR1、FGFR2、FGFR3、FGFR4和角化細胞生長因子等。此類細胞在血管生成方面起著重要的作用；第五類為血管內皮細胞生成因子受體（VEGFR），是血管生成的重要的正性調節(jié)因子；肝細胞生長因子受體（HGFR）類、FibronectinIII型受體類、神經細胞生長因子受體（NGFR）家族等。,酪氨酸激酶受體分別在不同類型腫瘤中過表達，至使其細胞內信號的激活，導致細胞轉化、不斷增殖，促進腫瘤的發(fā)生、發(fā)展，抵抗細胞凋亡，打亂細胞

13、的生長平衡。,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,EGFRHER2HER3HER4,INSRIGF1R,PDGFRPDGFRCSF1RKITFLK2,FLT1FLK1FLT4,FGFR1FGFR2FGFR3FGFR4,,EphA1EphA2EphA3.

14、..,RET,TRKATRKBTRKC,TIETEK,受體酪氨酸激酶,,,,,,,kinase,FNIII-like,Cysteinerich,Ig-like,Factor VIII-like,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,SRC,YES,FYN,LYN,LCK,BLK,HCK,FGR,YRK,FRK,BRK,SRM,SAD,BTK,ITK,TEC,MK

15、K2,TXK,CSK,CTK,ZAP70,SYK,ABL,ARG,JAK1,JAK2JAK3,TYK2,FAK,PYK2,FES/FPS,FER,ACK,ACK2,DBD BD,F-Actin,FAT,CDC2 BD,Proline-Rich,非受體酪氨酸激酶,SH3 SH2 kinase,PH,Kinase-like,,,,Tyrosine Kinase

16、 Mechanism of activation Cancer,ErbB1 Mutation, Truncation NSCLC, GliomaErbB2 Amplification Breast PDGFR

17、 Chromosome translocation LeukemiaKIT Mutation Leukemia，GISTMET Mutation, overexpression Multiple cancerFGF

18、R Mutation Multiple myelomaAbl Chromosome translocation CMLSrc Overexpression, activation

19、 Multiple cancer,酪氨酸激酶與腫瘤,酪氨酸激酶受體基因擴增?,PI3K,,PKC,,,,,,,酪氨酸磷酸酶的結構模式,?酪氨酸激酶受體激活與腫瘤形成,酪氨酸激酶受體與腫瘤的關系,?酪氨酸激酶受體與腫瘤轉移,?酪氨酸激酶受體與腫瘤血管生成,?酪氨酸激酶受體與腫瘤預后關系,?酪氨酸激酶受體與腫瘤化療敏感性,,ErbB受體　EGFR　ErbB2 ErbB3 ErBB4,,內源性配體　EGF 無　　

20、　NRG1 NRG1　　　　　　TGF　　　　　NRG2　　NRG2　　　　　　AR NRG3　　　　　　EP NRG4　　　　　　BTC Tomoregulin　　　　　HB-EGF

21、 HB-EGF BTC EP,,EGFR家族的天然配體,配體與受體胞外區(qū)的結合受體的過表達誘導

22、二聚體的形成反向激活：JAK2，Src, GPCRs激動劑，Wnt等,EGFR受體的激活,EGF受體與配體的突變與器官缺陷,EGFR 上皮，乳腺，肺，胰腺，小腸，中樞神經系統(tǒng)HER2 乳腺，心臟，中樞神經系統(tǒng)HER3 心臟，中樞神經系統(tǒng)HER4 乳腺，心臟，中樞和外周神經系統(tǒng)EGF

23、 前列腺，中樞和外周神經系統(tǒng)TGF 上皮，前列腺，眼HB-EGF 中樞神經系統(tǒng)AR/EGF/TGF 胃腸道,,,EGFR受體和配體轉基因研究,轉基因 靶組織 腫瘤類型EGFR 乳腺 乳腺癌Neu 乳腺 乳腺癌

24、ErbB3 乳腺 肺癌TGF 肝癌或乳腺癌HRG 乳腺 乳腺癌,,,,EGFR家族酪氨酸激酶受體與腫瘤的關系,非小細胞性肺癌EGFR激酶突變的頻率,腫瘤中EGFR家族的基因改變,EGFR家族與腫瘤發(fā)生發(fā)展關系,促進細胞增殖、轉化和腫瘤的形成促進血管生

25、成與腫瘤轉移與腫瘤差的預后相關使腫瘤化療敏感性下降,Src酪氨酸激酶功能與腫瘤的關系,v-Src對細胞周期調節(jié)的影響 v-Src作為生存因子 Src在PDGFR下游有絲分裂信號中作用 Src與EGF受體起協(xié)同作用 Src對粘附/細胞骨架網絡的調控和細胞轉移的影響 v-Src底物和肌動蛋白/粘附動力學 Src在細胞粘附和遷移中的作用 Src作為G蛋白信號的效應子 Src對腫瘤血管生成調控,Src的結構示意圖,Src

26、激活的信號途徑,,BCR/ABL的結構,Bcr/ABL激活的信號轉導途徑,Bcr/Abl的功能,Bcr/Abl改變造血細胞粘附特性 Bcr/Abl誘導細胞骨架功能異常 Bcr/Abl激活造血生長因子信號轉導途徑和信號轉導分子 Ras途徑 C-CBL癌蛋白 PI3K途徑接頭蛋白CRKL JAK/STAT途徑,JAK/STAT信號轉導途徑,一些細胞因子如IL3、6等與其相應的受體結合，通過激活JAK/STAT信號轉導途徑將

27、胞外信號傳遞至核內。,STAT和JAK的結構示意圖,,,,,gp130,STAT,STAT,PI3K,mTOR,AKT,,,,JAK,JAK,,,,,,,,,,,,TF,STAT,STAT,,,,,,,,,ISRE/GAS,Accessory TF Motif,,,,,,CIS, SOCS, APPs, TIMP1, Pim-1, c-myc, cytokiness, TFs, etc.,TF,,,PTPase,,,PTPase,

28、,,,CIS,SOCS,,,,FeedbackInhibition,,,,,,,ERK,,,ERK,ERK,MEK,Raf,,,,Ras,SHC,Grb2,SHP2,,C/EBPNFkBAP-1,,SHP2,,,JAK/STAT Signal Pathway,STAT蛋白與腫瘤的形成,致癌的酪氨酸激酶激活STAT蛋白 持續(xù)激活的STAT突變體 蛋白調控的靶基因,Bcl-XL Cyclin D1 p21WAF1 CIP1

29、c-Myc,酪氨酸激酶下游MAPK信號轉導途徑,發(fā)生、增殖與分化,發(fā)生、增殖、分化、炎癥、凋亡、應激反應,增殖、分化與凋亡,細胞增殖、細胞周期,細胞反應,哺乳動物MAPKs主要的級聯(lián)反應,ERK通路的激活,酪氨酸激酶受體對Ras的激活 Ca2＋對Ras的激活 Ras突變蛋白激酶C(PKC)對ERK通路的活化,? MAPKs與腫瘤發(fā)生 ? JNK信號轉導通路與腫瘤發(fā)生 ? p38信號轉導通路與腫瘤發(fā)生 ? MAPKs與腫

30、瘤轉移,MAPKs信號轉導與腫瘤,MAPK在腫瘤進展和侵襲中的作用MAPK誘導蛋白及基質降解 MAPK誘導細胞運動 腫瘤細胞在侵襲過程中如何存活,酪氨酸激酶下游PI3K/AKT信號轉導途徑,PI3K和AKT能磷酸化并調控許多跟細胞代謝、凋亡、增殖和分化有關的蛋白，進而能抑制細胞的凋亡并促進腫瘤的生長。,PI3K信號在人類惡性腫瘤中調節(jié)異常的證據,,PI3K的活化機制及PIP3磷酸酶,PTEN,,AKT蛋白家族的結構特征,,AKT蛋

31、白的激活機制,,PI3K－AKT途徑對細胞生存的調控機制,AKT,,PI3K－AKT途徑對細胞周期進程的調節(jié),AKT通路,AKT對細胞生存和抗凋亡的調控機制 AKT對細胞周期驅動的調控機制 端粒酶逆轉錄酶 雄激素受體 雌激素受體,AKT對凋亡基因和抗凋亡基因的調節(jié) AKT直接磷酸化前凋亡基因,Cyclin D的調節(jié)P27,PI3K－AKT通路失控與人體腫瘤,基因擴增 PI3K上游調節(jié)物的激活 PIP3

32、磷酸酶（PTEN）,PI3K基因的擴增 AKT基因的擴增PIK3CA突變,死亡受體信號轉導途徑,TNF、FasL、Apo3L等能激活死亡受體，通過一些信號轉導導致細胞凋亡。,FasL,,Daxx,,FADD,Ask1,JNK,MKK7,bcl2,,,Caspase8/10,Cyto C,caspase6,TRADD,,,,,,FADD,TRADD,,,,,tBid,Bid,RIP,,,,caspase3,Caspase9,Ap

33、af1,IAP,NFkB,NFkB,IkB,IKK,NIK,TRAF2,caspase2,Ask1,,TRADD,TRADD,,,,,RIP,TRAF2,FADD,,,LaminA,Actin,Fodrin,Gas2,ICAD,CAD,PARP,CAD,caspase7,,,,,,,,,,,,,,,,,,,Caspase8,10,,Cell shrinkageMembrane blebbing,DNA fragmentation,DN

34、A repair,,,,,,,TNF,,DR3APO,APO-3L,,FLIPs,IkB,,TNFR1,,,FLIPs,,,,APO-3L,,,,,,,,DR4/5,,,Mitochondria,,,DNA損傷后的信號轉導途徑,G1/S檢查點G2/M檢查點,Growth factor withdrawal,,GSK3β,CyclinD,SKP2,p16,p15,p27,DP-1,p21,p53,Cdc25A,E2F,Rb,abl

35、,CyclinE,CDK2,SCF?,SKP2,ATM/ATR,CDK4/6,E2F,DP-1,Rb,HDAC,Smad4,smad3,,,,,,,,,,,,,,,,,,ReplicativeSenescence,,TGFβ,DNA damage,,,,ReplicativeSenescence,,,Ubiquitination,,Ubiquitination,,,,,,OFF,,,,p,,,,ON,S phase genes:C

36、yclin E, E2F-1, Cdc2, cyclinA, DHFR, TK etc,,G1,,,R,S phase,,G1 checkpoint,DNA,,,,DNA-PK,Cdc25B/C,MDM2,p53,chk2,Wee1,14-3-3Q,CHK1/2,Cdc2,ATM/ATR,Myt1,BRCA1,PIK1,,MDM2,p19Art,p53,,,,GADD45,p21,,,P300/PCAF,,14-3-3Q,,,,,,

37、,,,,p90rsk,,,,,,,,,,,,,,,G2 Phase,cyclinB,M Phase,,G2 checkpoint,Wnt信號轉導途徑,Wnt信號轉導途徑激活導致Catenin的穩(wěn)定性增加，促進細胞增殖。APC的失活導致Wnt信號激活。,TGFB/BMP,,,,,,B-catenin,,,,Cadherin,,Wnt,,Frizzled,,APC,Axin,B-catenin,GSK3,TAK1,NLK,NLK,,

38、,,CamKII,PKC,JNK,GSK3,CK1,Dsh,B-catenin,B-catenin,HDAC,B-catenin,Targets,SOX,Groucho,CBP,,,,,,,,,,,,PP2A,,,,,,TCF,TCF,,,,,,,Genes ON,Genes ON,,,,,,,,,,B-TrCP,應激性因子刺激的信號轉導途徑,一些應激性刺激如UV、H2O2、熱等作用于細胞，細胞將通過應激性信號轉導途徑將這些信號傳遞

39、至核內，調節(jié)一些基因的表達，對這些細胞外信號作用反應。,The Mitogen-activated Protein Kinase Cascades,抗信號轉導治療策略,腫瘤生物學與抗癌藥物發(fā)展,上世紀50-60年代　　腫瘤由快速分裂的細胞構成；腫瘤細胞處在不斷的周期性分裂中；腫瘤細胞在一定程度上是免疫“異物”?。ㄍ榛瘎┥鲜兰o60-70年代　腫瘤中分裂細胞所占百分比高　（抗代謝、抗生素、抗微管藥物） 上世紀90年代以來新

40、靶點藥 　 癌基因、信號轉導、血管生成、永生化　（Herceptin, Glivec, Iressa, Avastin, C225, Sutent, Sorafenib,,,,,,,新靶點抗腫瘤藥物的成功經驗,Herceptin (抗體）Rituximab (抗體）Glivec?。ㄐ》肿樱㊣ressa　（小分子）ImC225　 (抗體）Tarceva（小分子）Avastin　 (抗體）Sutent (小分子)

41、Sorafenib (小分子),HER2高表達乳腺癌B細胞淋巴瘤慢性粒細胞白血病EGFR突變肺癌EGFR表達的結直腸癌EGFR表達腫瘤VEGF高表達結腸癌晚期腎癌BRaf晚期腎癌,,,,受體酪氨酸激酶信號途徑的抑制劑,Block,,1983　1984　1985　1987　1988　1989　1991　1992　1993　1994　1995　1996　1998　2002　2003　2004,EGFR抗體C225抗瘤作

42、用,EGFR cDNA的克隆,EGFR cDNA的克隆,,,人HER2序列發(fā)表,,乳腺癌中HER2擴增,,C225由Hybridtech公司Phase I,,HER2抗體4D5和2C4抗瘤作用發(fā)現(xiàn),,人鼠嵌合型C225的發(fā)展,,HER2抗體phase I,,HER2抗體phaseII,HER2抗體phase III,,,ImClone公司開發(fā)C225,,EGFR小分子抑制劑發(fā)現(xiàn),,C225抗體

43、phase I,,EGFR小分子抑制劑抗瘤作用,,FDA批準HER2抗體,,日本批準EGFR小分子抑制劑,,FDA批準EGFR的小分子抑制,瑞士批準C225,,,FDA批準C225,,Lilly公司并了hybridtech,停了C225的開發(fā),,1. 靶向生長因子,針對血管內皮生長因子的抗體Avastin,2. 靶向生長因子受體,針對HER2受體的抗體Herceptin, EGFR抗體C225, VEGF

44、R2的抗體DC101,3. 靶向生長因子受體酪氨酸激酶,針對EGFR激酶的Iressa, Tarceva, 針對VEGFR等多靶點的Sutent，Sorafenib等,IRESSA,IRESSA 口服EGFR酪氨酸激酶抑制劑IRESSA 第一個被批準的EGFR酪氨酸激酶抑制劑，治療進展期NSCLCIRESSA 的作用機制不同于細胞毒性化療,Tumour response and disease control rates,IDEA

45、L 1,IDEAL 2,18.4,,,,,,,,,,0,10,20,30,40,50,60,54.4,,,,42.2,11.8,,,,Objective response,Disease control,,Patients(%),Objective response, complete plus partial responseDisease control, objective response plus stable disea

46、se,Fukuoka et al 2003;Kris et al 2003,NSCLC的EGFR-TK 結構域 (exons 18-24) 30多個突變Lynch 等發(fā)現(xiàn)8/9 (89%)病例有很好的效果(>50% 腫瘤縮小)，而這些腫瘤都有EGFR-TK 突變Paez et al noted that:NSCLC的EGFR-TK突變的頻率相關于 女性，腺癌和日本族 5 病例IRESSA有效的病例中5例有EGFR-TK突

47、變,EGFR-TK mutations and response to IRESSA,抗EGFR受體的抗體C225（1）Erbitux (Cetuximab),針對EGFR受體胞外區(qū)的嵌合型的小鼠單克隆抗體。人鼠嵌合型抗體C225與EGF受體結合親和性高。能阻止配體與EGFR受體結合。阻斷配體誘導的酪氨酸激酶活性。刺激受體的內化。C225干擾細胞周期演進障礙即G1停止。G1期停止的誘導伴隨P27的上調。在

48、某些細胞中，IMC－C225能誘導細胞凋亡。,抗EGFR受體的抗體C225（2）,329例Erbitux單藥或聯(lián)合Irinotecan，治療結直腸癌，其中40%是草酸鉑治療失敗的。結果生存時間延長的中位時間是單藥4.2個月，聯(lián)合治療為5.7個月。138例的另一臨床研究結果為15%有效，Irinotecan治療失敗的12%有效。主要的副作用 皮膚紅疹，乏力，腹瀉，腹痛，嘔吐，發(fā)熱等,針對HER2受體的抗體Hercep

49、tinTM（1）,Herceptin是由Genentech公司開發(fā)的、針對HER2的重組的人源化單克隆抗體。Herceptin已經被批準在臨床應用臨床研究的結果表明，在治療轉移性HER2過表達的乳腺癌中，單藥的完全緩解率為5%，部分緩解率為18%。與化療藥物合用的有效率為57%~64%。,,,,Herceptin與化療藥物合用的臨床試驗結果 Enrolled TTP(mo)

50、 RR(%) AE(%)CT alone 234 5.5 36.2 56H+CT 235 8.8 62 89AC alone 145 6.5 42.1 71H+AC

51、 146 9.0 64.9 66Paclitaxel 89 4.2 25 59H+Paclitaxel 89 7.1 57.3 70,,,,針對HER2受體的抗體HerceptinT

52、M（2）,,Tarceva是一個新的抗腫瘤化合物，為EGFR受體酪氨酸激酶強力的抑制劑。研究表明Tarceva對EGFR受體酪氨酸激酶抑制的IC50值為2nM，為一可逆性的ATP競爭性抑制劑。研究其對Src、Abl、胰島素、胰島素樣的酪氨酸激酶的抑制作用發(fā)現(xiàn)，該抑制劑對EGFR受體酪氨酸激酶的選擇性超過1000倍。,EGFR酪氨酸激酶小分子抑制劑Tarceva （1）,Tarceva在體外對EGFR過表達的腫瘤細胞的受體自身磷酸化有

53、明顯抑制作用，其IC50值為20nM。同時，發(fā)現(xiàn)該抑制劑在體內外對EGFR過表達的上皮細胞腫瘤HN5和A431腫瘤具有明顯抑制作用，具對腫瘤生長的抑制與對EGFR磷酸化抑制相符。,EGFR酪氨酸激酶小分子抑制劑Tarceva （2）,II期和III期臨床試驗表明，Tarceva在150mg/天治療化療耐受的非小細胞肺癌、卵巢癌、頭頸癌的抗瘤活性中等。主要毒性是皮膚紅疹和腹瀉。Tarceva對57例化療耐藥的非小細胞肺癌患者的完全緩

54、解率為1.8%，部分緩解率為14%，病情穩(wěn)定達26%。中位生存期為37周，1年生存率為48%。Tarceva 處理124例化療耐藥的頭頸癌患者，部分緩解率6%，病情穩(wěn)定為40%。Tarceva對34例化療耐藥的卵巢癌，部分緩解為6%，病情穩(wěn)定為50%。,HER2和EGFR激酶口服小分子選擇性抑制劑臨床前研究表明其抑制EGFR和HER2高表達的腫瘤生長臨床I期研究表明其耐受性好，輕度腹瀉和皮疹是其常見的毒副作用臨床研究發(fā)現(xiàn)其對HE

55、R2陽性乳腺癌有效，尤其對Herceptin耐藥的腫瘤仍有效 與capecitabine合用治療HER2陽性轉移性乳腺癌(Herceptin+ADR+Tax失敗)的中位進展時間8.4月，單藥capecitabine為4.4月,Lapatinib,PHA-665752為Met激酶抑制劑ATP競爭性抑制劑抑制Met的自身磷酸化和c-Cbl結合點抑制肺癌細胞體內外生長抑制血管生長因子的產生與上調抑制因子。已進入臨床研究,Met激酶

56、抑制劑PHA-665752,Simplified overview of some key steps in tumour angiogenesis,作用靶點：多種酪氨酸激酶(VEGFR、Flt3、PDGFR、RET等)主要臨床應用： 胃腸道間質腫瘤： Sutent延長了腫瘤或新?lián)p傷在患者體內變成這種罕見型胃癌所歷的時間；使用Sutent治療的患者的腫瘤進展時間中位時間為23周，而未以Sutent治療的患者為6周。

57、 晚期腎細胞癌： Sutent能夠縮小患者的腫瘤大小。在接受細胞因子療法后腫瘤已惡化的轉移性腎癌患者中，發(fā)現(xiàn)Sutent的整體有效率為26-37%。副作用：腹瀉、皮膚變色、口腔發(fā)炎、虛弱和味覺改變,,VEGFR酪氨酸激酶小分子抑制劑Sutent,,PTK787/ZK222584 ZD6474,臨床試驗中VEGFR酪氨酸激酶抑制劑還有,,Inactive,Apoptosis,,VEGFR Tyrosine

58、Kinase Signal Pathway,VEGF,,VEGFR,,,,Akt/PKB,P I-3 K,Active,,P L Cg,,Nucleus,Proliferation,Survival,,,,,Raf,Avastin,,,,,STAT3,,,,STAT3,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,MigrationTube formation,,,Genentech公司開發(fā)了一種重組人抗

59、VEGF抗體（rhuMab-VEGF）研究表明其抑制VEGF誘導的內皮細胞增殖和腫瘤生長。I期臨床研究表明rhuMab-VEGF是安全的。已有二個II期臨床試驗結果報告。第一個臨床研究報告用了99例進展期轉移性非小細胞肺癌，隨機將其分為三組，分別給予卡鉑/紫杉醇，卡鉑/紫杉醇＋7.5mg/kg 　rhuMab-VEGF，卡鉑/紫杉醇＋15mg/kg　 rhuMab-VEGF，結果有效率分別為31.3%（12/32）、21.9

60、%（7/32）和40.0%（14/35）。,另一臨床試驗，用104例轉移性結直腸癌，同樣隨機分為三組，分別用5-Fu/葉酸、5-Fu/葉酸＋5mg/kg rhuMab-VEGF和5-Fu/葉酸＋10mg/kg rhuMab-VEGF治療，有效率分別為17%（6/36）、40%（14/35）和24%（8/33）。注意的副作用： 胃腸穿孔，出血,針對小鼠的VEGFR2受體的抗體DC101，拮抗VEGF與受體的結合，從而阻斷VEGF激活的

61、信號途徑，抑制內皮細胞的生長。DC101在裸鼠體內對多種移植瘤和轉移瘤有抗血管生成和抗腫瘤活性，誘導腫瘤細胞凋亡。在動物體內未見明顯的毒副作用。但DC101并不與人源性的VEGFR2（KDR）受體交叉反應，不能應用于人源性腫瘤的治療。ImClone公司據此研制出了一種鼠/人融合抗體IMC-1C11。該抗體能與人源性KDR受體結合，阻斷VEGF誘導的P42/44激活和VEGF刺激的內皮細胞的有絲分裂。目前，IMC-1C11正在

62、進行臨床I期試驗。,SU101 由SUGEN公司研究開發(fā)的針對PDGFR受體酪氨酸激酶抑制劑。 SU101能抑制PDGFR受體增殖性信號轉導。,PDGFR受體酪氨酸激酶抑制劑SU101,Block,,1,2,3,,,Ras的抑制劑（法尼基轉移酶抑制劑）,,,,,FTIGGTI,,,FtaseGGTase,1. Isoprenylation,,Ras,FPPGGPP,,Ras,,CAAX,,SH,,CAAX,,S-F,,AA

63、X,Ras,,C-S-F,,Ras,,C-S-F,,SAM,,,Me,,,,Ras,,C,Me,P,P,,,S,,F,2. Proteolysis,3. Methylation,4. Palmitoylation,法尼基轉移酶底物的結構,CAAX,法尼基轉移酶抑制劑的研究主要集中在以下4類化合物：?法尼基焦膦酸酯（FPP）類似物? CAAX四肽及其類似物?雙底物類似物?天然產物,,法尼基轉移酶抑制劑臨床試驗,,,,化合物

64、 臨床試驗階段 腫瘤 效果,R115777 I 期 實體瘤 有效 耐藥實體瘤 有效,L-778123 I 期 復發(fā)實體瘤 有效,SCH66336

65、 II 期 轉移性胰腺癌 有效,Raf的抑制劑Sorafenib,針對突變的BRaf，VEGFR，PDGFRSorafenib治療晚期腎癌臨床研究治療甲狀腺癌、晚期黑色素瘤副作用：腹瀉、皮疹、疲乏、手足綜合征、高血壓、脫發(fā)、惡心嘔吐和食欲不振,Block,,,Receptor Tyrosine Kinase InhibitorserbB-2 v.s. EGFR,Growt

66、hFactor,,Growth FactorReceptors,,,,Akt/PKB,P I-3 K,Active,Inactive,,P L Cg,,Nucleus,Apoptosis,Proliferation,Survival,,,,,,x,,Raf,,MEK抑制劑PD184352,PD184352是由Parke Davis藥物研究中心研究開發(fā)的一個針對MEK的選擇性抑制劑。在體外內均抑制MEK的活性，從而阻斷MAPK的

67、激活，抑制細胞 的生長。體內研究表明在48~200mg/kg每天給藥對結腸癌26的抑制率為53~79%。對HT29、SKOV3移植性腫瘤均有明顯的抑制作用。,Block,,,Receptor Tyrosine Kinase InhibitorserbB-2 v.s. EGFR,GrowthFactor,,Growth FactorReceptors,,,,Akt/PKB,P I-3 K,Active,Inactive,

68、,P L Cg,,,Nucleus,Apoptosis,Proliferation,Survival,,,,,,x,,Raf,,PI3K－AKT途徑的抑制劑,PI3K　AKT GSK690693mTOR的抑制劑CCI-779和RAD001,PI3K抑制劑,PI3K/AKT是酪氨酸激酶受體的下游信號轉導途徑中的分子。PI3K /AKT是一條生存通路，具有抗細胞凋亡作用。美國禮來公司開發(fā)針對PI3K的抑制劑，發(fā)現(xiàn)LY294002能抑