《生物化學實驗》理論考查復習思考題

1、《生物化學實驗》總復習思考題1. 請掌握下列生物化學實驗常用儀器的正確操作使用方法，并能回答以下問題：(1) 離心機使用時為什么要平衡？普通離心機與高速離心機在平衡時有什么不同要求？(2) 為什么用高速組織搗碎機進行動、植物組織搗碎時，需采用間歇式方式進行操作？(3) 用真空泵進行減壓抽濾時，為什么要連接緩沖瓶？2. 為什么肝糖元只能從剛宰殺的動物肝臟中獲??？在提取肝糖元過程中，三氯乙酸、95%乙醇各起什么作 用？在糖元水解產物中如果存

2、在殘留蛋白質時，當用班氏試劑檢測水解產物，有何影響？(要求詳細闡述)3. 以下是涉及分光光度儀結構、各部件功能的一些基礎問題，請依次解答：(1 )請闡述分光光度儀的主要部件及其功能，紫外與可見光光波的波長范圍？(2) 從光源發(fā)出的光是復合光，而測定物質吸光度大小的光是單色光，請問該單色光與物質結構和對光的 吸收有何內在聯(lián)系？什么叫物質的特征吸收波長？用分光光度法定制實測物質標準曲線時，如何確定被測物質的 特征吸收波長？(3) 產生紫外與

3、可見光光譜的光波是甶什么光源發(fā)出的？用石英與普通玻璃所制作的比色皿在材質上有何 差異？為什么在紫外波長范圍內測定物質吸光度大小必須采用石英材質的比色皿？(4) 光電管的功能是什么？為什么說光電管是分光光度儀最脆弱和最易損的部件？4. 以下是涉及分光光度儀工作原理一Beer-Lamber定律的一些基礎問題，請依次解答：(1 ) Beer-Lamber定律揭示在稀溶液中，物質的濃度與其對光的吸收值大小(吸光度)之間的什么關系？該 定律如

4、何用數(shù)學表達式表示？在該表達式中，各符號代表什么含義？(2 )由于分光光度儀不能直接測定溶液吸光度的大小，請問分光光度儀是如何間接測定溶液吸光度大小的？ 在間接測定溶液吸光度大小時,Beer-Lamber定律還有一種表達方式即溶液的吸光度大小與其透光率的關系表達 式，請寫出該表達式，在該表達式中，各符號代表什么含義？(3)由于分光光度儀是通過測定溶液透光率大小，間接測定其吸光度大小的，請依據(jù)溶液吸光度大小與其 透光率的關系表達式，詳細

5、闡述為什么在用分光光度儀定制標準曲線或測定樣品時，需將待測溶液的吸光度(0D 值)控制在一定的范圍內？你知道該測定范圍是多少嗎？17. 請闡述茚三酮反應的反應原理及其應用。18. 蛋白質的天然屬性是什么？請從蛋白質的分子結構，正確分析理解蛋白質分子為什么具備這樣的天然屬 性(請參照課堂重點講解內容回答)？19. 請闡述蛋白質“鹽析”與“中性有機溶劑沉淀蛋白質”反應原理；這兩類沉淀反應有何應用？20. 在蛋白質不可逆沉淀反應實驗中，多次涉

6、及到蛋白質遇到沉淀劑后，沉淀不增加反而消失的現(xiàn)象，這一 現(xiàn)象統(tǒng)稱為“假溶“現(xiàn)象，蛋白質的“假溶“與“復溶“兩者之間有什么本質上的不同？并請解釋以下“假溶“ 現(xiàn)象：(1 )在重金屬鹽沉淀蛋白質實驗中，加入過量的硫酸銅或過量的乙酸鉛后，沉淀消失現(xiàn)象？(2)在“海倫壓環(huán)”試驗中；請解釋用濃硫酸與濃鹽酸進行海倫壓環(huán)試驗振蕩后，沉淀消失現(xiàn)象？(3)如何快速準確鑒定一蛋白質沉淀后的溶解是鹽析透析后的復溶“還是受溶液pH影響出現(xiàn)旳假溶“？21. 請闡

7、述用透析試驗驗證蛋白質“可逆”與“不可逆沉淀反應”的實驗設計原理。22. 請闡述酸、堿、鹽的存在對加熱變性蛋白質沉淀反應有何影響。要求能對加熱變性沉淀蛋白質實驗中涉 及到的每個實驗現(xiàn)象作出正確的理論解釋。23. 請列表從檢測原理、樣品測定范圍、標準品使用濃度與消耗量、檢測結果準確性、操作難易程度、測定 方法的局限性與應用等方面，對雙縮脲法與Folin酚法測定蛋白含量含量的方法進行分析歸納總結。24. 請闡述考馬斯亮藍G250染色法定制蛋

8、白質標準曲線的原理對比Folin酚定制蛋白質標準曲線原理和方 法，列表從標準品的使用濃度，測定范圍，反應靈敏度，標準品的用量，線性關系的好壞比較兩種測定蛋白質方 法的優(yōu)、缺點。25請從檢測方法的原理與應用范圍著手分析，為什么分別采用Folin酚法和雙縮脲法測定“蛋白胨“這種 微生物培養(yǎng)基質中蛋白含量時，其測定出的蛋白含量檢測結果會大相徑庭，相差甚遠？26. 在考馬斯亮藍G250染色法定制蛋白質標準曲線實驗準備中，考馬斯亮藍G250試劑配