松茸多糖的提取、分離和純化及抗氧化活性的研究.pdf

1、松茸因其鮮美的味道、嫩滑的肉質(zhì)，很受人們喜歡，是一種珍稀名貴的純天然食藥用真菌。它含有多糖、氨基酸和蛋白質(zhì)等成分，且有抗腫瘤、治療心血管疾病和促進(jìn)腸胃功能等功效，被譽(yù)為“食用菌之王”。松茸多糖是其主要的活性成分之一，具有較高的營(yíng)養(yǎng)價(jià)值和藥用活性，松茸多糖在保健品和醫(yī)藥等領(lǐng)域具有廣闊的開(kāi)發(fā)價(jià)值和應(yīng)用前景。本文設(shè)計(jì)了5種培養(yǎng)基配方對(duì)松茸菌絲體進(jìn)行固體培養(yǎng)，篩選出最適于松茸生長(zhǎng)的固體培養(yǎng)基培養(yǎng)，為松茸菌的人工栽培提供理論依據(jù)。采取超聲輔助熱水

2、浸提法、傳統(tǒng)熱水浸提法、酶提取法和微波提取法4種提取方式進(jìn)行松茸多糖的提取，通過(guò)對(duì)照松茸多糖的得率和抗氧化活性，篩選出最優(yōu)的提取方式為超聲輔助熱水浸提法。通過(guò)單因素和正交試驗(yàn)設(shè)計(jì)篩選出超聲輔助熱水浸提法的最優(yōu)提取工藝，進(jìn)而采取乙醇分級(jí)的方法對(duì)松茸多糖進(jìn)行分離純化，并測(cè)定各組分的單糖成分和抗氧化活性，得到更有利于生物醫(yī)學(xué)發(fā)展的可能有效成份，為更深地研究松茸多糖提供科學(xué)依據(jù)。
　　本研究主要內(nèi)容包括：⑴研究和比較了5種培養(yǎng)基的生長(zhǎng)狀況

3、，根據(jù)菌絲體的長(zhǎng)勢(shì)（菌絲密度、菌絲形態(tài)，菌絲顏色、菌絲邊緣整齊度）和日生長(zhǎng)速率，篩選出適合松茸母種的最優(yōu)培養(yǎng)基，配方為：馬鈴薯葡萄糖瓊脂培養(yǎng)基（PDA）+蛋白胨+麥麩汁+松針汁（即：馬鈴薯20 g、葡萄糖2 g、瓊脂2 g、蒸餾水100 mL、蛋白胨0.3 g、麥麩汁3 g、松針汁3 g）。⑵對(duì)4種提取方式進(jìn)行了比較：熱水浸提法（H-TMP）、超聲輔助提取法（U-TMP）、微波提取法（U-TMP）和酶提取法（E-TMP），4種方法的提取

4、多糖提取得率和DPPH自由基的清除力高低順序均為：H-TMP>U-TMP>E-TMP>M-TMP，它們的還原力的高低順序?yàn)椋篣-TMP>H-TMP>M-TMP>E-TMP；羥自由基的清除力順序?yàn)椋篣-TMP>H-TMP>E-TMP>M-TMP。綜合考慮4種提取方法提取的多糖得率和抗氧化活性，可以看出超聲提取法的得率和活性相對(duì)較高，而且，與傳統(tǒng)的熱水浸提法相比較，可以節(jié)省時(shí)間，提高效率。⑶采用超聲輔助法制備松茸多糖，并采取單因素和正交試驗(yàn)

5、設(shè)計(jì)（(L9(3)3)對(duì)超聲輔助法的工藝條件進(jìn)行了優(yōu)化。結(jié)果顯示，超聲輔助法的最優(yōu)提取工藝為:超聲溫度40℃，超聲時(shí)間50 min，水料比例25 mL/g，超聲頻率45 kHz，超聲功率100 W，提取得率為8.06％。⑷通過(guò)乙醇分級(jí)法從松茸多糖中分離純化出3種新穎的多糖（TMP30、TMP60和TMP80），采用高效陰離子交換色譜法（HPAEC-PAD）和傅立葉變換紅外光譜法（FT-IR）進(jìn)行了結(jié)構(gòu)表征。抗氧化活性是研究其還原力、DP