光化學組織粘合技術結合腸衣在坐骨神經修復中的應用研究.pdf

1、背景及目的：
　　周圍神經損傷是臨床醫(yī)生比較棘手的疾病，最嚴重的類型是神經完全斷裂，導致其支配區(qū)域功能減退、喪失以及持續(xù)的病理性疼痛。受損神經再生的速度十分緩慢，并且受損區(qū)域與周圍組織易形成粘連，預后較差。目前，傳統的縫線縫合是治療神經損傷的主要方法，然而，縫合后神經后期功能恢復的效果仍不盡如人意。因為，縫合造成了二次損傷，縫線作為異物可引起慢性的炎癥，并導致疤痕的形成，影響治療效果。近年來一種新的免縫合組織粘合技術稱為光化學反應

2、組織粘合技術（Photochemical Tissue Bonding，PTB）已經在修復皮膚、血管、跟腱等組織中取得成功。有研究報道PTB技術可以與生物材料協同治療坐骨神經損傷，其神經再生的情況及后期功能恢復均有顯著提高，并且優(yōu)于單一的PTB技術及縫合法。腸衣（small intestinal submucosa，SIS）做為新型的生物材料，因其無免疫原性、促進組織增殖分化等諸多優(yōu)點而廣泛應用于組織修復的研究。本實驗通過腸衣協同PTB

3、以及單一的PTB技術治療大鼠離斷的坐骨神經，以傳統的外膜縫合法作為對照，觀察并比較三種方法的治療效果，探索一種新的免縫合技術可以用于修復損傷的坐骨神經。
　　方法：
　　1、離體實驗（選取合適的光照劑量）：取18條WISTAR大鼠坐骨神經，完全離斷后隨機分為三組，每組坐骨神經斷端用腸衣包裹，覆蓋光敏劑RB后分別以25J/cm2、50J/cm2、100J/cm2的532nm波長的激光照射；之后采用張力檢測器分別對各組處理后的坐

4、骨神經進行張力值檢測，從而比較各組腸衣與神經組織的黏附性。
　　2、在體實驗（光化學免縫合技術修復周圍神經的實驗研究）：應用8周齡雄性WISTAR大鼠54只，制備坐骨神經完全離斷的損傷模型后即刻以10-0縫線（縫合組，n=18）外膜縫合、PTB技術（n=18）、PTB技術+腸衣（PTB+腸衣組， n=18）處理離斷的坐骨神經。以縫合組作為對照組，術后比較三組動物損傷神經區(qū)域粘連、炎性反應和疤痕形成情況；比較S100蛋白的表達；稱重

5、腓腸肌并計算比率比較肌肉萎縮的程度；通過坐骨神經功能指數（SFI）評估神經功能的恢復。
　　結果：
　　1、離體實驗：100J/cm2實驗組張力值較50J/cm2、25J/cm2實驗組高，比較差異有顯著統計學意義（P＜0.01）；50J/cm2實驗組與25J/cm2實驗組張力值比較差異無統計學意義。
　　2、在體實驗：縫合組術后12周可見受損神經與周圍廣泛粘連，PTB組略輕，PTB+腸衣組未見粘連組織；縫合組術后3天H

6、e染色見明顯炎性細胞侵潤，12周可見明顯粘連組織形成；PTB組及PTB+腸衣組炎性反應較輕并且未見粘連組織形成；術后12周免疫組化結果可見三組S100表達均為陽性，但PTB及PTB+腸衣組S100陽性表達面積高于縫合組；術后12周PTB及PTB+腸衣組腓腸肌稱重比率高于縫合組，比較差異有統計學意義（P<0.05）；術后4周三組SFI比較差異無統計學意義，術后8周、12周PTB組SFI高于縫合組（P<0.05），PTB+腸衣組SFI高于縫