芯片篩分電泳中負壓進樣和富集技術(shù)的研究.pdf

1、芯片毛細管電泳具有多種分離模式并可與多種化學操作相結(jié)合，已作為主要的分離單元廣泛應用于微全分析系統(tǒng)中。近來，負壓進樣方法因其快速和無歧視的進樣已應用于區(qū)帶芯片毛細管電泳。本文首次提出了負壓進樣方法在芯片凝膠體系的應用，并進一步通過在線富集技術(shù)提高了測定的性能。
　　 第一章綜述了芯片毛細管電泳的壓力進樣方法和在線樣品富集技術(shù)，其中包括正壓力進樣、負壓力進樣及聚焦富集、電泳富集及靜態(tài)富集。
　　 在第二章中，我們提出了一種

2、負壓結(jié)合電動力在芯片篩分毛細管電泳內(nèi)的快速、可變體積的樣品引入方法。該方法進樣設(shè)備簡單，只需低成本的微型真空泵和單路電源。為了降低進樣通道的水動阻力，篩分介質(zhì)只充滿緩沖溶液槽到十字交叉點之間的分離通道。注入的樣品帶長度與進樣時間成比例，只需簡單的改變進樣時間就能自由選擇樣品帶體積，每次進樣1s的樣品消耗僅為1.7×102nL,只需0.024s就能無歧視的將被分析物輸送到進樣口，并能在分離通道中注入形狀良好的高質(zhì)量的樣品區(qū)帶。該體系在芯片

3、篩分電泳中具有巨大的應用潛力，能實現(xiàn)高的分析通量、重現(xiàn)性、靈敏度和分離性能。
　　 在第三章中，我們將負壓進樣技術(shù)應用于等速電泳富集并與凝膠電泳分離聯(lián)用(ITP-GE)。ITP-GE包括三個步驟：樣品引入、等速電泳富集和凝膠電泳分離。在小于1s的時間內(nèi)，即可形成前導電解質(zhì)、樣品、后導電解質(zhì)的三明治夾心結(jié)構(gòu)。所提出的方法用DNA片段做為模型分析物進行評估。與傳統(tǒng)的采用夾流進樣的十字芯片凝膠電泳相比，平均的信號增強為185倍。結(jié)果表

4、明ITP-GE方法具有靈敏度高、進樣速度快、重現(xiàn)性好和設(shè)備簡單等優(yōu)越性。
　　 第四章提出了可變體積負壓進樣技術(shù)在蛋白質(zhì)場增強堆積進樣-等速電泳-凝膠分離(FASI-ITP-GE)上的應用。前導電解質(zhì)、樣品、后導電解質(zhì)三明治區(qū)帶在進樣步驟中形成，且樣品帶的長度與進樣時間按成正比。與場增強樣品進樣連用，引入到等速電泳通道的為堆積后的樣品，因此不會占用等速電泳通道的長度。與十字芯片凝膠電泳相比，使用FASI-ITP-GE，實現(xiàn)了超過