學習經歷對川硬皮腫腿蜂氣味結合蛋白表達的影響.pdf

1、SichuanA嘶culturalUniVers時MasterDegreeDissertationLeammgexperienceinnuencetheexpressionoftheodorantbilldingproteinin&ZP加沈r，，2口臟辦甜口刀P刀s括XiaoByChenchunyanDirectedbyPro￡Y抽gWeiMajorofForestProtectionCollegeofFores蚵SichuanAgri

2、culturalUhiVersit)，Chengdu，61l130，Sichuan，PR。ChinaJune，2015摘要川硬皮腫腿蜂(&比m沈rm口5fc辦“口胛P淞括xiao)，屬腫腿蜂科(Bethylidae)天牛腫腿蜂屬(＆彪m如r肌口)，是一種能寄生多種鉆蛀性害蟲的天敵昆蟲，具有重要的生物防治價值。昆蟲通過感知空氣中的揮發(fā)性氣味物質指導其行為反應，這包括兩個重要方面：一是寄主植物揮發(fā)出的多種氣味物質組成的化學圖譜，二是昆蟲具有

3、與之相適應的結構和識別機制，只有對這兩方面都進行了深入研究，才能更好地應用到害蟲防治的實踐中。近年來，國內對昆蟲感受氣味物質的行為化學模式的研究較多，但是昆蟲氣昧結合蛋白及其與氣味識別的關系研究較少，對寄生蜂的相關研究則更少。因此，我們利用Y型行為儀測試不同日齡的川硬皮腫腿蜂經云斑天牛蟲糞木屑混合物處理后的行為反應，研究川硬皮腫腿蜂對云斑天牛蟲糞木屑揮發(fā)性氣味的學習效應；根據(jù)己報道的管氏腫腿蜂(＆膪，D如M螂倒口歷Xiaoetwu)氣味

4、結合蛋白的cDNA序列設計引物，利用R1’PCR法獲得編碼川硬皮腫腿蜂兩種氣味結合蛋白的cDNA片段，并對其進行基因克??；利用sYBRGreenI熒光染料法，采用Real—1hePCR比較Ct值的相對定量法獲得川硬皮腫腿蜂不同部位、不同日齡經歷及未經歷云斑天牛蟲糞木屑的氣味結合蛋白基因的轉錄表達譜，研究其基因表達規(guī)律，初步探索川硬皮腫腿蜂學習效應對氣味結合蛋白表達的影響，主要研究結果如下：1不同日齡川硬皮腫腿蜂對云斑天牛蟲糞木屑混合物的

5、學習效應經歷云斑天牛蟲糞木屑混合物氣味處理后的腫腿蜂與未經歷氣味處理的腫腿蜂相比，前者對該氣味的選擇率均得到提高。川硬皮腫腿蜂在羽化和成蟲初期(1、2日齡)對云斑天牛蟲糞木屑混合物氣味學習效應逐漸增強，在羽化后第2目學習效應最強，而在羽化后第4~10日學習效應減弱，在羽化后第12日學習效應又顯著增強。2川硬皮腫腿蜂OBP基因克隆及序列分析根據(jù)已經報道的管氏腫腿蜂SguaOBPl和SguaOBP2基因設計引物，克隆分析了編碼川硬皮腫腿峰氣

6、味結合蛋白Ssic0BPl和Ssic—OBP2的cDNA(GenBank序列號分別為：KM924438和KM924439)。根據(jù)測序結果和結構分析表明，川硬皮腫腿SsicOBPl基因包含1個長為401bp的開放閱讀框，編碼133個氨基酸殘基；ssicOBP2基因包含1個長為420bp的開放閱讀框，編碼139個氨基酸殘基。ssic一0BPl與SsicOBP2蛋白均成酸性，前者分子量約為14，4kD，后者分子量約為157kD，均含有6個保守