糖尿病患者外周血白細(xì)胞端粒長(zhǎng)度與端粒酶活性變換的研究.pdf

1、背景：糖尿病是一種以高血糖為病理特征的代謝性疾病，若體內(nèi)長(zhǎng)期維持高血糖狀態(tài)會(huì)引起一系列的并發(fā)癥，例如：腎臟、肝臟、心臟、血管、眼等的損傷，對(duì)人體健康產(chǎn)生非常嚴(yán)重的影響。糖尿病的發(fā)病率也呈逐年上升狀態(tài)，并且，全球沒(méi)有非常有效的醫(yī)療手段治愈此類(lèi)疾病。糖尿病患病初始沒(méi)有任何表征，當(dāng)病人到醫(yī)院就診時(shí)，大部分胰島細(xì)胞已經(jīng)失去功能，只能依靠藥物維持血糖平衡。糖尿病早期發(fā)現(xiàn)、早期治療成為當(dāng)今的一項(xiàng)研究熱點(diǎn)，通過(guò)分子生物學(xué)手段對(duì)外周血白細(xì)胞端粒長(zhǎng)度與端

2、粒酶活性進(jìn)行檢測(cè)以探討白細(xì)胞端粒長(zhǎng)度變化、端粒酶活性變化與糖尿病的相關(guān)性。
　　方法：提取30例1型糖尿病（T1DM）、60例2型糖尿?。═2DM）、40例2型伴動(dòng)脈硬化糖尿?。―AS）患者外周血白細(xì)胞基因組 DNA，利用實(shí)時(shí)熒光定量PCR的方法檢測(cè)基因組DNA的端粒長(zhǎng)度，以36B4基因作為對(duì)照，檢測(cè)不同分型糖尿病間以及糖尿病患者與正常健康人間的端粒長(zhǎng)度變化情況。從而探究糖尿病對(duì)人類(lèi)外周血白細(xì)胞端粒長(zhǎng)度的影響；利用多元線性回歸分析

3、探究影響端粒長(zhǎng)度的具體因素。分別提取40例T1DM患者、80例T2DM患者的外周血白細(xì)胞與血漿，利用TRAP-PCR的方法檢測(cè)白細(xì)胞與血漿中是否存在端粒酶活性；再利用熒光定量 PCR的方法檢測(cè)端粒酶的活性；從而探究糖尿病對(duì)外周血白細(xì)胞、血漿的端粒酶活性影響情況，利用多元線性回歸分析探究影響端粒酶活性的主要因素。
　　結(jié)果：建立了檢測(cè)端粒長(zhǎng)度與端粒酶活性的可靠辦法。T1DM、T2DM、DAS患者外周血白細(xì)胞端粒長(zhǎng)度均小于健康對(duì)照（N

4、C）組；在不同分型的糖尿病對(duì)比中T1DM組端粒長(zhǎng)度短于T2DM組與DAS組，DAS組比T2DM組更短。通過(guò)多元線性回歸分析得到：在 T1DM組中，年齡與白細(xì)胞端粒長(zhǎng)度呈負(fù)相關(guān)；T2DM組中，年齡、BMI與白細(xì)胞端粒長(zhǎng)度呈負(fù)相關(guān)；DAS組中，BMI、患病時(shí)間與端粒長(zhǎng)度呈負(fù)相關(guān)。在糖尿病患者外周血白細(xì)胞、血漿的端粒酶活性檢測(cè)試驗(yàn)中，根據(jù)TRAP-PCR與RT-qPCR的結(jié)果顯示，在T1DM組、T2DM組與NC組中的外周血血漿中并沒(méi)有發(fā)現(xiàn)端粒

5、酶活性。在外周血白細(xì)胞中均發(fā)現(xiàn)了端粒酶活性，T1DM患者的外周血白細(xì)胞端粒酶活性與T2DM患者均顯著高于NC組的；并且T1DM患者的端粒酶活性高于T2DM患者。多元線性回歸分析顯示：在T2DM組中，性別與吸煙狀況與白細(xì)胞端粒酶活性有顯著相關(guān)性，得到男性與吸煙患者的白細(xì)胞端粒酶活性強(qiáng)于女性與不吸煙者。
　　結(jié)論：糖尿病患者的外周血白細(xì)胞端粒長(zhǎng)度明顯短于正常人，并且 T1DM患者的端粒長(zhǎng)度顯著短于 T2DM；在2型糖尿病的對(duì)比中，DA

6、S患者的端粒長(zhǎng)度明顯短于 T2DM?；颊叩哪挲g、患病時(shí)間、BMI值與端粒長(zhǎng)度的縮短有密切的關(guān)系。在T1DM與T2DM患者的外周血血漿中都沒(méi)有發(fā)現(xiàn)端粒酶活性存在。T1DM與T2DM患者的外周血白細(xì)胞端粒酶活性顯著高于正常人；并且，T1DM患者的白細(xì)胞端粒酶活性高于T2DM患者。在T2DM組中發(fā)現(xiàn)性別與吸煙狀況與白細(xì)胞端粒酶活性有顯著相關(guān)性。糖尿病對(duì)于外周血白細(xì)胞的端粒長(zhǎng)度、端粒酶活性均有明顯影響；對(duì)于二者的相關(guān)檢查可能對(duì)于糖尿病的早發(fā)現(xiàn)、