MDR1-P-gp介導的類風濕關節(jié)炎患者甲氨蝶呤耐藥及與中醫(yī)證型相關性研究.pdf

1、目的:本研究通過檢測健康對照組、類風濕關節(jié)炎(rheumatoid arthritis，RA)甲氨蝶呤(methotrexate，MTX)敏感組及耐藥組患者血液中MTX及代謝產物甲氨蝶呤多聚谷氨酸鹽(methotrexate polyglutamate，MTXPG)的藥物濃度水平的測定，同時測定參與藥物轉運代謝的相關蛋白及基因的表達或功能，如還原性葉酸鹽載體（reduced folate carrier，RFC）、二氫葉酸還原酶(dih

2、ydrofolatereductase，DHFR)、P糖蛋白(P-glycoprotein，P-gp)、多藥耐藥相關蛋白(multidrugresistance protein，MRP)、mdr1(multidrug resistance1)，以探討耐藥相關基因與RA患者服用MTX產生耐藥性的可能機制及與中醫(yī)證型的相關性，從而為提高RA治療效果、克服MTX耐藥提供新的思路與靶點。
　　方法:將符合納入標準的患者，根據其病情活動度分

3、為MTX敏感組、MTX耐藥組，以流式細胞儀檢測外周血淋巴細胞P-gp蛋白的表達及功能;以酶聯免疫法吸附測定(enzyme linked immunosorbent assay，ELISA)法檢測紅細胞內MTX藥物濃度;以聚合酶鏈氏反應(PolymeraseChainReaction，PCR)法檢測外周血MRP、MDR1、RFC、DHFR基因mRNA的表達，中醫(yī)上將患者分為寒濕阻絡、濕熱阻絡、痰瘀痹阻、肝腎虧虛四型，比較各指標與中醫(yī)證型是

4、否具有相關性。并采用SPSS16.0軟件進行統(tǒng)計學處理數據以分析數據間相關性。
　　結果:1、外周血單個核細胞P-gp的表達及功能:與正常對照組相比，MTX敏感組及MTX耐藥組P-gp表達及功能增高，差異具有統(tǒng)計學意義(P＜0.05);與MTX敏感組相比，MTX耐藥組P-gp表達及功能升高，差異具有統(tǒng)計學意義(P＜0.05)。2、MTX敏感組平均藥物濃度明顯高于MTX耐藥組平均藥物濃度（t=9.71，P＜0.05雙側）。3、MTX

5、耐藥組患者MPR mRNA表達量高于MTX敏感組，兩者具有統(tǒng)計學差異（t=6.358，P＜0.05雙側）;MTX耐藥組患者MDR1 mRNA表達量高于MTX敏感組，兩者具有統(tǒng)計學差異（t=7.01，P＜0.05雙側);MTX耐藥組患者DHFR mRNA表達量均值稍高于MTX敏感組，但無統(tǒng)計學意義（t=0.28P=0.78＞0.05）;MTX耐藥組患者RFC mRNA表達量均值低于MTX敏感組，兩者間具有統(tǒng)計學意義（t=6.12，P＜0.