中藥感冒藥中非法添加物檢測方法的研究.pdf

1、目的：為保障臨床用藥安全，對感冒類中成藥及相關制劑進行非法添加物的檢測方法研究，建立一種集薄層色譜、高效液相色譜、高效液相色譜-質(zhì)譜聯(lián)用技術于一體的檢測方法，對感冒類中成藥及相關制劑進行快速準確篩查，以做到防患于未然，為人們用藥安全提供保障，為藥品監(jiān)督作好技術支撐。
　　方法：根據(jù)感冒的臨床表現(xiàn)，確定可能非法添加的化學成分，采用薄層色譜法初步篩選出可能非法添加的七種抗感冒類化學成分；采用甲醇：水梯度洗脫，流速1mL·min–1，高

2、效液相色譜法同時檢測中藥感冒藥中鹽酸嗎啉胍、對乙酰氨基酚、咖啡因、非那西丁、氨基比林等五種化學成分的非法添加；以甲醇：乙酸銨為流動相，采用 ESI源，多反應監(jiān)測(MRM),以保留時間及定性離子對之間的相對豐度比定性，以定量離子對峰面積定量，建立UPLC-MS法定性定量檢測中藥感冒藥中對乙酰氨基酚、咖啡因、馬來酸氯苯那敏、鹽酸偽麻黃堿、雙氯芬酸鈉、氨基比林、鹽酸嗎啉胍、醋酸潑尼松的非法添加。
　　結(jié)果：
　　1、共篩選了七種薄

3、層色譜條件，最終確定了以下三種薄層色譜條件鑒別鹽酸偽麻黃堿、非那西丁、氨基比林、對乙酰氨基酚、雙氯芬酸鈉、咖啡因、醋酸潑尼松等七種化學成分的薄層色譜方法：
　　鹽酸偽麻黃堿的鑒別：硅膠G板，三氯甲烷-甲醇-濃氨（20：5：0.5）為展開劑，茚三酮顯色，105℃加熱至斑點清晰；
　　非那西丁、氨基比林、對乙酰氨基酚、雙氯芬酸鈉的鑒別：硅膠GF254板，乙酸乙酯-二氯甲烷-冰乙酸（10：10：0.08）展開，紫外燈254nm下檢

4、視；
　　咖啡因、醋酸潑尼松的鑒別：硅膠GF254板，二氯甲烷-乙醚-甲醇-水（15.4：2.4：
　　0.6：0.08）展開，紫外燈254nm下檢視。
　　2、高效液相色譜法同時檢測感冒類中成藥及相關制劑中非法添加的鹽酸嗎啉胍、對乙酰氨基酚、咖啡因、非那西丁、氨基比林五種化學成分，甲醇：水梯度洗脫，分別在0.2136～1.602mg·L-1、0.2176～2.176 mg·L-1、0.2012～2.1020 mg·L

5、-1、0.4008～2.0040 mg·L-1、0.2040～2.0400 mg·L-1范圍內(nèi)呈良好的線性關系，Y＝5.7948X+1.1514，相關系數(shù)r=0.9999，加樣回收率為95.79％，RSD值為2.10%；Y＝8.464X-0.1752，相關系數(shù)r=0.9999，加樣回收率為95.74%，RSD值為0.64%；Y＝1.5347X+0.7281，相關系數(shù)r=0.9996，加樣回收率為97.60%，RSD值為1.49%；Y＝3

6、.6718X+0.2587，相關系數(shù)r=0.9999，加樣回收率為98.92%，RSD值為0.86%；Y＝7.5854X+0.4811，相關系數(shù)r=0.9999，加樣回收率為97.70%，RSD值為0.95%。
　　3、UPLC-MS同時檢測感冒類中成藥及相關制劑中非法添加的對乙酰氨基酚、咖啡因、馬來酸氯苯那敏、鹽酸偽麻黃堿、雙氯芬酸鈉、氨基比林、鹽酸嗎啉胍、醋酸潑尼松八種成分；采用MRM方式監(jiān)測待測成分，并結(jié)合保留時間和相對離子

7、豐度比來定性，八種成分分別在2.176～27.100μg·L-1、1.006～20.120μg·L-1、0.497～9.940μg·L-1、1.035～25.875μg·L-1、0.4915～9.830μg·L-1、0.510～8.160μg·L-1、2.136～10.600μg·L-1、0.492～9.840μg·L-1范圍內(nèi)線性關系良好，線性方程分別為Y=36997X+87979，r=0.9991，其加樣回收率為92.43%，RSD

8、值為2.44%；Y=60857X+99131，r=0.9997，其加樣回收率為97.75%，RSD值為1.69%；Y=355134X+9955.1，r=0.9998，其加樣回收率為89.77%，RSD值為5.14%；Y=317534X+619766，r=0.9997，其加樣回收率為87.87%，RSD值為4.57%；Y=5204.4X-31.960，r=0.9997，其加樣回收率為88.17%，RSD值為5.03%；Y=15911X+5

9、992.5，r=0.9994，其加樣回收率為87.70%，RSD值為4.56%；Y=7429.6X+30941，r=0.9995，其加樣回收率為89.31%，RSD值為4.84%；Y=7472.2X+1195.6，r=0.9998，其加樣回收率為90.67%，RSD值為2.84%。
　　結(jié)論：所建立的三種薄層色譜條件簡單、快速、專屬性好，可用于基層非法添加的快速篩查；高效液相色譜法同時檢測五種成分，可靠、穩(wěn)定，可用于非法添加的定量