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文檔簡介
1、目的:檢測炎癥反應調節(jié)因子NF-κB及去乙?;窼IRT1在正常胎盤組織及ICP胎盤組織的蛋白表達情況;探討牛磺膽酸(Taurocholic acid,TCA)誘導胎盤合體滋養(yǎng)細胞系HTR-8細胞的炎癥反應,及白藜蘆醇對HTR-8細胞炎癥反應的抑制作用及機制。
方法:收集臨床胎盤標本及肝功能指標(正常、ICP輕度和ICP重度),免疫組化及免疫印跡法檢測SIRT1以及NF-κB的定位以及蛋白表達情況。不同濃度TCA處理HTR-8
2、細胞24小時(組11:TCA=0μmol/L,組2:TCA=2μmol/L,組3:TCA=20μmol/L,組4:TCA=100μmol/L),免疫熒光及免疫印跡法檢測 SIRT1定位,SIRT1、NF-κB和TNF-α蛋白表達情況。SIRT1激動劑白藜蘆醇(resveratrol,Res)處理各組細胞24小時,SIRT1抑制劑Ex-527與白藜蘆醇同時處理各組細胞24小時,免疫印跡法檢測處理后SIRT1、NF-κB及TNF-α蛋白表達
3、的變化情況。
結果:SIRT1與NF-κB主要表達于胎盤合體滋養(yǎng)細胞的細胞質和細胞核。SIRT1蛋白在ICP胎盤組織的表達低于正常胎盤組織,NF-κB蛋白在ICP胎盤組織的表達高于正常胎盤組織;SIRT1蛋白在組3和組4中的表達低于組1和組2中的表達,NF-κB及TNF-α蛋白在組3和組4中的表達高于組1和組2中的表達。差異均具有統(tǒng)計學意義(P<0.05)。使用白藜蘆醇處理組3和組4后,SIRT1蛋白表達升高,NF-κB及TN
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