驅動蛋白KIF26B在結直腸癌中的表達、臨床意義和相關機制研究.pdf

1、研究目的：多種驅動蛋白與腫瘤的發(fā)生發(fā)展有著密切聯(lián)系，人們對于驅動蛋白KIF26B在腫瘤中的表達和相關機制知之甚少。本研究的目的在于探索驅動蛋白KIF26B在結直腸癌中的表達水平、臨床意義以及表達機制。
　　方法：1、我們在前期課題相關研究和生物信息學分析的基礎上，采用Real Time PCR和Western Blot實驗技術檢測KIF26B在40例結直腸癌手術標本及對應正常粘膜中的表達水平。2、在含88例結直腸癌標本的組織芯片上

2、，通過免疫組化染色檢測 KIF26B的表達情況。探索 KIF26B的表達與臨床病理參數(shù)的關系，Kaplan-Meier法分析KIF26B的表達與患者生存概率的關系，COX比例風險回歸模型分析KIF26B表達與患者預后的關系。3、構建KIF26B ShRNA慢病毒載體工具，獲得KIF26B穩(wěn)轉敲減的結直腸癌細胞系，采用Real Time PCR、 Western Blot、CCK-8、平板克隆形成、裸鼠成瘤等多種體外體內實驗方法檢測 KI

3、F26B敲減對結直腸癌細胞生物學行為的影響。
　　結果：1、在40例結直腸癌組織樣本中有30例（75%）KIF26B mRNA的表達水平較正常組織明顯升高，Western Blot實驗結果顯示結直腸癌組織中 KIF26B蛋白表達水平較正常粘膜組織明顯升高（2.33±0.07 vs0.91±0.04，P<0.05）。2、免疫組化染色顯示KIF26B在結直腸癌組織中表達升高，與腫瘤大?。≒=0.020）、AJCC分期（P=0.018）

4、、T分期（P=0.026）、N分期（P=0.014）相關；生存分析顯示KIF26B表達高組總體生存率低于KIF26B低表達組；多因素回歸分析顯示KIF26B是結直腸癌患者不利預后的獨立影響因子。3、成功構建了 KIF26B ShRNA表達質粒，體內外實驗中，敲減 KIF26B的表達能夠明顯抑制結直腸癌細胞的細胞增殖能力、克隆形成能力、裸鼠成瘤能力。
　　結論:結直腸癌組織中驅動蛋白KIF26B表達水平增高，與多種病理參數(shù)相關，KI