雷帕霉素通過抑制Th17細胞分化減輕LPS誘導(dǎo)的小鼠急性肺損傷.pdf

1、研究背景和目的：
　　ALI/ARDS是各種肺內(nèi)外致病因素導(dǎo)致的肺泡上皮細胞和血管內(nèi)皮細胞損傷進而引起的急性、進行性缺氧性呼吸衰竭綜合征。是呼吸科的危急重癥，死亡率長期居高不下。大量炎癥介質(zhì)釋放和中性粒細胞激活介導(dǎo)的肺組織不同程度損傷被認為是發(fā)病的中心環(huán)節(jié)。然而，以抗炎治療為出發(fā)點的多項臨床實驗并未收到預(yù)期中改善 ALI/ARDS患者預(yù)后的結(jié)果。生理情況下，中性粒細胞主要存在于骨髓中，且半衰期短。ALI/ARDS時肺組織內(nèi)中性粒細

2、胞的募集和活化需要趨化因子和促炎因子的持續(xù)驅(qū)動。免疫應(yīng)答作為機體抵御損傷的第一道防線，啟動時間更早，認為是觸發(fā)炎癥反應(yīng)的扳機。Th17細胞作為適應(yīng)性免疫應(yīng)答的效應(yīng)細胞，可通過分泌IL-17等細胞因子募集和活化中性粒細胞，其介導(dǎo)的抗炎免疫應(yīng)答可能是 ALI/ARDS等炎性疾病發(fā)生發(fā)展的的初始動力和關(guān)鍵環(huán)節(jié)。據(jù)此，本研究擬探討Th17細胞在ALI/ARDS中的活化特點和可能的調(diào)控方式，為 ALI/ARDS的治療尋找新的切入點。
　　方

3、法：
　　1.收集 ARDS患者外周血標本和臨床資料，測定各組患者血漿Th17系細胞因子IL-17和IL-22的水平。
　　2.分別用野生型小鼠和 IL-17-/-鼠構(gòu)建 ALI動物模型，明確 Th17細胞的活化特點，并比較兩種小鼠肺組織病理學(xué)改變和 BALF炎癥因子表達等指標。
　　3.雷帕霉素干預(yù)野生型小鼠構(gòu)建的ALI動物模型，通過檢測核轉(zhuǎn)錄因子和相關(guān)蛋白的表達，探討Th17細胞的調(diào)控機制。
　　結(jié)果：

4、>　　1. ARDS患者早期即有外周血IL-17和IL-22顯著增高，且死亡者一直保持著高水平的Th17細胞系因子分泌。
　　2. IL-17-/-鼠BALF內(nèi)中性粒細胞數(shù)量減少，MPO水平降低，肺組織炎癥程度減輕。
　　3. ALI模型鼠中，Th17細胞的誘導(dǎo)性增殖主要發(fā)生在建模后第二天。IL-17在建模后6小時即有顯著升高，且后期持續(xù)高表達。IL-22的表達高于IL-17數(shù)倍，與STAT3形成正反饋環(huán)路。
　　4.

5、雷帕霉素對急性肺損傷小鼠具有保護作用。體內(nèi)外實驗表明，這一保護作用并非通過增強抑炎力量—促進Treg細胞增殖實現(xiàn)的。
　　5.遏止 Th17細胞的分化，抑制 Th17細胞介導(dǎo)的免疫應(yīng)答是雷帕霉素發(fā)揮對ALI小鼠保護作用的可能機制。
　　6.雷帕霉素抑制 Th17細胞分化的機制可能為：通過mTORC1-S6K1通路上調(diào) SOCS3抑制 STAT3分子磷酸化和促進 Gfi1表達阻止RORγt核轉(zhuǎn)位。
　　結(jié)論：
　　

6、1.Th17系因子在ARDS患者表達上調(diào)；Th17細胞在ALI動物模型分化增殖增加；完全剔除IL-17的作用可削弱中性粒細胞性炎癥。上述結(jié)果揭示Th17細胞介導(dǎo)的免疫應(yīng)答參與ALI/ARDS的發(fā)病，是募集中性粒細胞的動力。
　　2.雷帕霉素對ALI小鼠的保護作用是通過削弱 Th17細胞介導(dǎo)的促炎反應(yīng)，而非增強Treg細胞介導(dǎo)的抑炎反應(yīng)。
　　3.雷帕霉素調(diào)控 Th17細胞分化的機制涉及 mTORC1-S6K1通路介導(dǎo)的核轉(zhuǎn)錄