丹皮酚對MPTP誘導的帕金森小鼠模型的神經(jīng)保護作用.pdf

1、目的：
　　腹腔注射MPTP誘導C57BL/6小鼠帕金森病模型，初步探討丹皮酚(paeonol, Pae)對MPTP誘導的帕金森病小鼠的神經(jīng)保護作用及其可能的保護機制。
　　方法：
　　將40只C57BL/6小鼠隨機均分為空白對照組(Control)，模型組(MPTP)，治療組(MPTP+Pae)和藥物對照組(Pae)。模型組和治療組小鼠予以MPTP(25 mg/kg，溶于生理鹽水)聯(lián)合丙磺舒(250 mg/kg，溶于

2、磷酸鹽緩沖液)腹腔注射建立PD小鼠模型，每日1次，連續(xù)5日，空白對照組和藥物對照組予以等體積的生理鹽水和磷酸鹽緩沖液腹腔注射；治療組在造模的第一天予以丹皮酚(20 mg/kg，溶于0.5％羧甲基纖維素鈉溶液)灌胃治療，每天1次，連續(xù)21天，空白對照組予以等體積的0.5%羧甲基纖維素鈉溶液灌胃，藥物對照組予以丹皮酚(20 mg/kg)進行灌胃(具體同治療組)。在實驗的第4日和第20日進行轉(zhuǎn)棒實驗檢測，第5日和第21日進行曠場實驗的行為學檢

3、測。第22日麻醉小鼠，進行心臟灌流內(nèi)固定，完整取出小鼠腦組織。免疫組化法檢測中腦黑質(zhì)部位TH，IBA-1， IL-1β和腦源性神經(jīng)營養(yǎng)因子的表達，并對陽性細胞分別進行量化。比色法檢測中腦 SOD, CAT和Glu的活性水平。
　　結(jié)果：
　　1.丹皮酚可緩解帕金森病小鼠的行為學障礙：與對照組相比，模型組小鼠在第4日和20日的轉(zhuǎn)棒運動時間明顯下降，與模型組相比，治療組在轉(zhuǎn)棒的運動時間第20日才出現(xiàn)明顯的增加(P<0.01)；與

4、對照組相比，模型組小鼠的曠場自主活動能力在第5日和21日均明顯下降，與模型組相比，治療組小鼠的曠場自主活動能力第21日才出現(xiàn)明顯的改善(P<0.01)；與對照組相比，Pae藥物對照組小鼠的運動能力未發(fā)現(xiàn)明顯的區(qū)別(P>0.05)。
　　2.丹皮酚可緩解帕金森病小鼠黑質(zhì)多巴胺能神經(jīng)元的損傷：與對照組相比，模型組中腦黑質(zhì)多巴胺能神經(jīng)元的表達下降，陽性細胞計數(shù)也出現(xiàn)了明顯的下降(P<0.01)；相對于模型組而言，治療組黑質(zhì)多巴胺能神經(jīng)元

5、的表達增強，陽性細胞計數(shù)也出現(xiàn)了明顯的增加(P<0.01)；與空白對照組相比，Pae藥物對照組黑質(zhì)TH的表達未發(fā)現(xiàn)明顯不同(P>0.05)。
　　3.丹皮酚可緩解帕金森病小鼠中腦的氧化應(yīng)激損傷：與對照組相比，模型組小鼠中腦的氧化應(yīng)激指標的活性水平均出現(xiàn)了明顯下降(P<0.01)；與模型組相比，治療組小鼠氧化應(yīng)激的活性水平均出現(xiàn)了明顯的升高(P<0.01)；與對照組相比， Pae藥物對照組小鼠中腦氧化應(yīng)激的活性水平未發(fā)現(xiàn)明顯的不同(

6、P>0.05)。
　　4.丹皮酚可緩解帕金森病小鼠黑質(zhì)的神經(jīng)炎癥反應(yīng)：與對照組相比，模型組小鼠黑質(zhì)IBA-1和IL-1β的表達增強，陽性細胞數(shù)明顯增強(P<0.01)；與模型組相比，治療組小鼠黑質(zhì) IBA-1和 IL-1β的表達下降，陽性細胞數(shù)也出現(xiàn)了的明顯下降(P<0.01)；Pae藥物對照組與空白對照組小鼠中腦黑質(zhì)炎癥因子的表達未發(fā)現(xiàn)明顯的區(qū)別(P>0.05)。
　　5.丹皮酚可緩解帕金森病小鼠模型腦源性神經(jīng)營養(yǎng)因子的丟

7、失：與對照組相比，模型組小鼠黑質(zhì)BDNF的表達下降，陽性細胞數(shù)也明顯下降（P<0.01）；與模型組相比，治療組小鼠黑質(zhì) BDNF的表達增強，陽性細胞數(shù)也明顯的增加(P<0.01)；Pae藥物對照組與空白對照組小鼠黑質(zhì) BDNF的表達未發(fā)現(xiàn)明顯的區(qū)別(P>0.05)。
　　結(jié)論：
　　1. MPTP腹腔注射可成功誘導出PD小鼠模型，氧化應(yīng)激和炎癥反應(yīng)均參與 PD的發(fā)病。
　　2.丹皮酚對帕金森病小鼠模型具有多巴胺能神經(jīng)元