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1、目的:通過(guò)課題實(shí)驗(yàn)研究蒙藥額爾敦-烏日勒(珍寶丸)對(duì)局灶性腦缺血再灌注損傷大鼠模型各部位腦組織神經(jīng)營(yíng)養(yǎng)因子(NT)的影響,明確其治療缺血性腦中風(fēng)的藥理作用與獨(dú)特優(yōu)勢(shì)。討論其作用機(jī)制,為進(jìn)一步研究額爾敦-烏日勒提供實(shí)驗(yàn)依據(jù)。
方法:準(zhǔn)備60只健康雄性SD大鼠。采用改良的Zea-Longa線栓法制備大腦中動(dòng)脈閉塞再灌注損傷(MCAO/R)大鼠模型。造模成功后,將其隨機(jī)分為模型組、額爾敦-烏日勒低、中、高劑量組、吡拉西坦組5組,同時(shí)
2、設(shè)立假手術(shù)組,共6組。額爾敦-烏日勒低、中、高劑量組、吡拉西坦組分別以0.3g/kg、0.6g/kg、1.2g/kg、0.5g/kg計(jì)量灌胃給藥,每天1次。模型組與假手術(shù)組灌胃蒸餾水10ml/kg,每天1次。2周后取各組大鼠腦干與下丘腦。采用ELISA及RT-FQPCR實(shí)驗(yàn)檢測(cè)并對(duì)比其轉(zhuǎn)化生長(zhǎng)因子β(TGF-β)與血小板源性生長(zhǎng)因子(PDGF)的含量與基因表達(dá)。采用SPSS13.0統(tǒng)計(jì)軟件對(duì)檢測(cè)結(jié)果進(jìn)行數(shù)據(jù)分析。
結(jié)果:①造模
3、情況:灌胃兩周后共有45只大鼠完成最終實(shí)驗(yàn)。額爾敦-烏日勒低、中、高劑量組與假手術(shù)組各有8只大鼠,吡拉西坦組7只大鼠,模型組6只大鼠。②采用雙抗夾心ELISA實(shí)驗(yàn)檢測(cè)大鼠腦干與下丘腦TGF-β與PDGF含量的結(jié)果:各組大鼠腦干TGF-β、PDGF含量均高于下丘腦(P<0.05)。假手術(shù)組大鼠TGF-β、PDGF含量相對(duì)較低。與模型組相比,給藥組大鼠TGF-β含量較高,PDGF含量較低。其中額爾敦-烏日勒低劑量組TGF-β含量最高,額爾敦
4、-烏日勒中劑量組PDGF含量最低,與吡拉西坦組以及模型組相比差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。但是,腦干部位TGF-β額爾敦-烏日勒低劑量組與高劑量組的差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05);下丘腦部位TGF-β、腦干及下丘腦部位PDGF,額爾敦-烏日勒低、中、高劑量組的差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)。③采用實(shí)時(shí)熒光定量PCR實(shí)驗(yàn)檢測(cè)大鼠腦干TGF-β與PDGF基因表達(dá)的結(jié)果:假手術(shù)組大鼠TGF-βmRNA、PDGF mRNA相對(duì)表達(dá)量較
5、低。與模型組相比,給藥組大鼠TGF-βmRNA相對(duì)表達(dá)量較高,PDGF mRNA相對(duì)表達(dá)量較低。其中,額爾敦-烏日勒低劑量組TGF-βmRNA相對(duì)表達(dá)量最高,與其他各組相比差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05);額爾敦-烏日勒中劑量組PDGF mRNA相對(duì)表達(dá)量最低,與吡拉西坦組以及模型組相比差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05),但其與額爾敦-烏日勒低劑量組、高劑量組相比差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)。
結(jié)論:額爾敦-烏日勒治療腦中
6、風(fēng)的療效優(yōu)于吡拉西坦。對(duì)比額爾敦-烏日勒低、中、高劑量組的差異,綜合考慮,其中額爾敦-烏日勒低劑量組對(duì)神經(jīng)營(yíng)養(yǎng)因子的影響較強(qiáng),對(duì)腦中風(fēng)患者的恢復(fù)最為有利。額爾敦-烏日勒對(duì)神經(jīng)營(yíng)養(yǎng)因子有著較大的影響。其可通過(guò)上調(diào)TGF-βmRNA相對(duì)表達(dá)量、增加TGF-β含量,下調(diào)PDGF mRNA相對(duì)表達(dá)量、減少PDGF含量等途徑發(fā)揮其靶源性營(yíng)養(yǎng)作用和神經(jīng)保護(hù)作用,進(jìn)而達(dá)到保護(hù)并修復(fù)受損神經(jīng)元、減輕腦缺血再灌注損傷。實(shí)驗(yàn)解釋了額爾敦-烏日勒治療腦中風(fēng)(
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