鴉膽子化學(xué)成分及藥理活性研究.pdf

1、鴉膽子為苦木科(Simaroubaceae)植物鴉膽子Brucea javanica(L.)Merr.的成熟種子，又名老鴉膽、苦榛子、苦參子等。主要分布在亞洲、印尼、澳洲的熱帶和亞熱帶，在中國(guó)主要分布在廣東、廣西。其主要化學(xué)成分有苦木內(nèi)酯、黃酮、三萜及生物堿等多種類(lèi)型，且這些成分具有抗腫瘤、抗瘧、抗炎、抗病毒等多種活性。特別是苦木內(nèi)酯類(lèi)的抗腫瘤作用，是眾多學(xué)者主要的研究對(duì)象。本課題以鴉膽子為研究對(duì)象，對(duì)其二氯甲烷部分、乙酸乙酯部分進(jìn)行化

2、學(xué)成分研究，并對(duì)其化學(xué)成分進(jìn)行活性測(cè)定。
　　目的:本課題以鴉膽子為研究對(duì)象，對(duì)其所含化學(xué)成分進(jìn)行全面研究，通過(guò)熱提取法對(duì)其進(jìn)行提取，柱分離色譜、制備薄層色譜、葡聚糖凝膠柱色譜等對(duì)其進(jìn)行分離純化來(lái)得到單體化合物。應(yīng)用UV、1D及2D NMR、MS等波譜技術(shù)對(duì)單體化合物進(jìn)行結(jié)構(gòu)鑒定，并采用MTT法對(duì)化合物進(jìn)行體外抗腫瘤活性測(cè)定。通過(guò)系統(tǒng)的提取、分離、結(jié)構(gòu)鑒定及活性測(cè)定，來(lái)完成對(duì)鴉膽子所含成分及其活性的研究。
　　方法:鴉膽子原

3、藥材12Kg通過(guò)95％工業(yè)乙醇熱回流提取后，經(jīng)石油醚、二氯甲烷及乙酸乙酯依次萃取，共得到三部分。其中二氯甲烷部分和乙酸乙酯部分采用硅膠柱色譜法、制備薄層色譜法、葡聚糖凝膠柱色譜法及反相硅膠柱色譜法進(jìn)行反復(fù)分離純化。得到的化合物經(jīng)過(guò)UV、1D及2D NMR(1H-NMR、13C-NMR、1H-1H COSY、HMBC、HMQC、NOESY、ROESY)、MS等波譜學(xué)方法進(jìn)行結(jié)構(gòu)鑒定。最后采用MTT法測(cè)定化合物3、4、15對(duì)三種人肝癌細(xì)胞B

4、el-7402、SMMC-7721和Hep G2的抗腫瘤活性，用阿霉素、順鉑、紫杉醇、甲氨蝶呤作對(duì)照。
　　結(jié)果:通過(guò)對(duì)鴉膽子進(jìn)行的系統(tǒng)提取分離，共得到27個(gè)化合物，鑒定了其中23個(gè)化合物的結(jié)構(gòu)，包括9個(gè)苦木內(nèi)酯類(lèi)化合物:bruceine A（化合物3），bruceine B（化合物4），(+)-dehydrobruceantinol(化合物10)，bruceantinol(化合物11)，bruceaketolic acid(化合

5、物12)，bruceine C(化合物15)，bruceine D(化合物16)，yadanzioside G(化合物17)，dehydrobruceine B(化合物22);5個(gè)甾醇類(lèi)化合物:豆甾醇-3-O-β-D-葡萄糖苷(β-stigmasteryl3-O-β-D-glucopyranoside)（化合物1），β-谷甾醇-β-D-葡萄糖苷(β-sitosterylβ-D-glucoside)（化合物2），β-谷甾醇(β-sitos

6、terol)（化合物5），豆甾-4，22-二烯-3β，6β-二醇(stigmasta-4，22-diene-3β，6β-diol)（化合物8），7-羥基-豆甾醇(7-hydroxy-stigmasterol)（化合物9）;3個(gè)黃酮類(lèi)化合物:木犀草素(luteolin)（化合物18），金圣草黃素(chrysoeriol)(化合物19)，芹菜素(apigenin)(化合物20);3個(gè)苯甲酸酯類(lèi)化合物:香草酸(vanillic acid)(化

7、合物14)，紫丁香酸(syringic acid)(化合物21)，沒(méi)食子酸甲酯(gallincin)(化合物24);2個(gè)含氮化合物:吲哚-3-甲醛(1H-indole-3-carboxaldehyde)（化合物7），2，4-嘧啶二酮(2，4-dihydroxy pyrimidine)(化合物26)及一個(gè)含苯化合物:dehydrochebulic acid trimethyl ester(化合物23)。
　　MTT體外抗腫瘤活性實(shí)驗(yàn)

8、結(jié)果顯示化合物3、4、15對(duì)三種腫瘤細(xì)胞株(Bel-7402，SMMC-7721和Hep G2細(xì)胞株)均有抑制作用。結(jié)果顯示，在被含化合物3(濃度為100μmol/L)的培養(yǎng)基培養(yǎng)后，Bel-7402細(xì)胞株存活率約為25％，SMMC-7721細(xì)胞株存活率低于5％，Hep G2細(xì)胞株存活率均為50％。在被含化合物4(濃度為100μmol/L)的培養(yǎng)基培養(yǎng)后，三種細(xì)胞的存活率分別約為15％，5％，50％。在被含化合物15(濃度為100μmo

9、l/L)的培養(yǎng)基培養(yǎng)后，三種細(xì)胞的存活率分別約為20％，5％，50％。
　　結(jié)論:通過(guò)對(duì)鴉膽子的系統(tǒng)分離，最終從中分離得到27個(gè)化合物，其中已鑒定23個(gè)結(jié)構(gòu)，化合物1、2、7、8、9、20、24、26為首次從鴉膽子中分離得到。通過(guò)MTT體外抗腫瘤活性實(shí)驗(yàn)表明化合物3、4、15對(duì)三種腫瘤細(xì)胞(Bel-7402，SMMC-7721和Hep G2)均有抑制作用。特別是對(duì)SMMC-7721細(xì)胞株，分別在三種化合物作用下，細(xì)胞的存活率均低于