Th22細(xì)胞在慢性乙型肝炎及肝硬化中作用機(jī)制的探討.pdf

1、目的:Th22細(xì)胞參與HBV相關(guān)性肝損傷的發(fā)病，然而，關(guān)于其在HBV相關(guān)性肝纖維化中的免疫病理作用卻研究得很少，因此，本研究旨在揭示Th22細(xì)胞在慢性乙型肝炎及肝硬化發(fā)病過(guò)程中的表達(dá)情況及作用機(jī)制。
　　方法:收集慢性乙型肝炎患者21例（CHB組）、乙型肝炎病毒相關(guān)性肝硬化患者36例(LC組)及正常對(duì)照者20名（HC組）。應(yīng)用流式細(xì)胞技術(shù)檢測(cè)外周血Th22細(xì)胞比例，ELISA法檢測(cè)血漿IL-22的濃度。qRT-PCR檢測(cè)肝組織中I

2、L-22 mRNA、IL-22R1 mRNA、AHR mRNA、TNF-α mRNA、RORCmRNA、IL-6 mRNA的相對(duì)表達(dá)量。HE和Masson染色觀察肝組織病理改變，根據(jù)Scheuer評(píng)分標(biāo)準(zhǔn)對(duì)肝組織炎癥和纖維化程度進(jìn)行評(píng)分;免疫組織化學(xué)染色檢測(cè)肝組織IL-22的表達(dá)情況。全自動(dòng)生化儀檢測(cè)相關(guān)血清學(xué)和病毒學(xué)指標(biāo)。
　　結(jié)果:1.LC組外周血PBMC中Th22細(xì)胞比例明顯高于CHB組和HC組，各組間比較差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義

3、(P＜0.001)。2.LC組血漿IL-22的濃度明顯高于CHB組和HC組，且各組間比較差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.001)。3.相關(guān)性分析顯示血漿IL-22的濃度與外周血Th22細(xì)胞比例呈明顯的正相關(guān)關(guān)系，在LC組為(r=0.603，P=0.000)，CHB組為(r=0.486，P=0.025)。4.LC組肝組織中IL-22 mRNA、IL-22R1 mRNA、AHR mRNA、RORC mRNA、IL-6 mRNA的表達(dá)均明顯高于HC

4、組，各組間比較均提示差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.05);TNF-α mRNA表達(dá)低于HC組，但結(jié)果未提示差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＞0.05)。5.肝組織病理切片HE染色顯示:LC組肝組織正常肝小葉結(jié)構(gòu)破壞，被假小葉所取代，纖維間隔可見(jiàn)大量炎性細(xì)胞及成纖維細(xì)胞浸潤(rùn)。Masson染色鏡下觀察可見(jiàn)LC組肝組織匯管區(qū)、中央靜脈周?chē)罅磕z原纖維沉積，纖維組織分割正常肝小葉形成假小葉。HC組肝組織HE染色及Masson染色均示肝小葉結(jié)構(gòu)正常，無(wú)纖維組織分

5、割。6.肝組織IL-22的免疫組織化學(xué)染色示在HC組肝組織中，IL-22+細(xì)胞很少甚至沒(méi)有，而在LC組中則有大量IL-22+細(xì)胞浸潤(rùn)，在匯管區(qū)及肝竇中均可見(jiàn)，以匯管區(qū)更明顯;LC組肝組織IL-22+細(xì)胞明顯高于HC組，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.001);LC組肝組織中IL-22+細(xì)胞與肝臟炎癥活動(dòng)度及纖維化程度呈明顯的正相關(guān)關(guān)系。
　　結(jié)論:1.Th22細(xì)胞、相關(guān)轉(zhuǎn)錄因子、細(xì)胞因子的高表達(dá)，與肝臟炎癥和纖維化程度呈正相關(guān)，是重要的