抑郁模型大鼠海馬糖皮質(zhì)激素受體及海馬形態(tài)的動態(tài)研究.pdf

1、目的：采用慢性不可預見性應激（CUMS）方式和社會挫敗應激(SDS)方式建立大鼠抑郁模型，動態(tài)觀察分析并比較在兩種應激模式下的抑郁大鼠的行為學變化，以此對兩種模型的可行性及價值性進行分析和對照。在此基礎(chǔ)上，研究CUMS方式所致抑郁癥模型大鼠海馬形態(tài)和神經(jīng)元糖皮質(zhì)激素受體（GR）表達變化，并進一步研究并比較CUMS和SDS方式誘導的抑郁癥模型大鼠海馬糖皮質(zhì)激素受體（GR）表達變化以及效應腦區(qū)海馬形態(tài)的變化，為抑郁疾病的相關(guān)機制研究提供依據(jù)

2、及參照。
　　方法：1.將30只SD雄性大鼠按照行為學評分隨機分為3組，即對照組、慢性不可預見性應激組和社會挫敗應激組，每組10只。對照組按標準飼養(yǎng)方式喂養(yǎng)，不給予任何處理，兩模型組分別按照CUMS方式以及SDS方式給予相應刺激建立大鼠抑郁模型，兩種應激方式均應激4周。三組大鼠在實驗前及實驗開始后的每周末分別對每組大鼠依次行體重測量、糖水偏好百分比試驗及Morris水迷宮試驗，直到第4周末實驗結(jié)束。
　　2.利用CUMS方法

3、刺激大鼠建立抑郁模型。取 CUMS后2周，4周，6周大鼠海馬組織，以非刺激的大鼠海馬組織為對照組，利用免疫熒光技術(shù)以及RT-PCR技術(shù)分別對各組海馬神經(jīng)元 GR表達的分布情況和蛋白表達進行檢測；MRI和HE染色對海馬形態(tài)結(jié)構(gòu)的變化進行觀察。
　　3.分別用CUMS方法和SDS方法刺激大鼠建立抑郁模型。分別取 CUMS組及SDS組應激前及應激后第2周末、第4周末大鼠海馬組織，利用免疫熒光技術(shù)以及RT-PCR技術(shù)分別對兩組海馬神經(jīng)元G

4、R表達的情況和蛋白表達進行檢測；MRI和HE染色對兩組海馬形態(tài)結(jié)構(gòu)的變化進行觀察。
　　結(jié)果：1. CUMS和SDS抑郁大鼠模型行為學檢測結(jié)果：相比對照組，應激第2周末，兩應激組大鼠體重、糖水偏好百分比及 Morris水迷宮平均潛伏時間均發(fā)生明顯變化，且CUMS組的行為學變化比SDS組行為學變化明顯（p<0.05）。應激第4周末時，SDS組的行為學變化比CUMS組行為學變化顯著（p<0.05）
　　2. CUMS抑郁癥模型大

5、鼠海馬形態(tài)和神經(jīng)元糖皮質(zhì)激素受體（GR）表達變化結(jié)果：(1)激光共聚焦顯微鏡（CLSM）下觀察，GR-DyLight488呈綠光，對照組可見海馬CA1區(qū)、CA3區(qū)及DG區(qū)細胞GR表達豐富，熒光強度較高，GR陽性表達細胞形態(tài)飽滿，胞質(zhì)胞核顯示清楚，細胞排列整齊緊密。與對照組相比，隨著應激周齡的增加，處理組海馬各區(qū)GR的熒光表達強度依次減弱，表達細胞數(shù)量減少，形態(tài)趨向紊亂。GR免疫反應細胞計數(shù)顯示處理組海馬GR陽性細胞數(shù)量明顯低于對照組(P

6、<0．01)。RT-PCR結(jié)果顯示與對照組相比，應激組海馬區(qū) GRmRNA表達量明顯降低(P<0．01)（2）與對照組相比，應激組海馬形態(tài)發(fā)生顯著變化，隨應激時間增加增加，應激第2周，4周及6周處理組大鼠海馬細胞排列逐漸紊亂，細胞數(shù)量逐漸減少，形態(tài)趨向不規(guī)則。
　　3. CUMS和SDS抑郁癥模型大鼠海馬神經(jīng)元糖皮質(zhì)激素受體（GR）表達變化及效應腦區(qū)海馬區(qū)形態(tài)改變結(jié)果：(1)激光共聚焦顯微鏡（CLSM）下觀察，應激前可見海馬DG區(qū)

7、細胞GR表達豐富，熒光強度較高，GR表達細胞排列緊密有序，形態(tài)飽滿。隨著應激周齡的增加，應激第2周末時CUMS組及SDS組海馬DG區(qū)GR的熒光表達強度均表現(xiàn)減弱，表達細胞數(shù)量減少，形態(tài)趨向紊亂，且CUMS組相比SDS組變化更為明顯；應激第4周末時CUMS組及SDS組海馬DG區(qū)GR的熒光表達強度進一步減弱，表達細胞數(shù)量明顯減少，形態(tài)更加紊亂，但 SDS組較CUMS組變化程度更為顯著。GR免疫反應細胞計數(shù)與RT-PCR檢測海馬組織GRmRN

8、A變化均呈現(xiàn)一致的表達變化趨勢（(P<0．05）。（2）MRI及海馬解剖實體圖及海馬HE染色圖片顯示CUMS組和SDS組海馬形態(tài)均發(fā)生明顯變化，隨著受試大鼠周齡增加，應激第2周末及第4周末兩組均表現(xiàn)出大鼠海馬細胞排列逐漸紊亂，細胞數(shù)量逐漸減少，形態(tài)的不規(guī)則，且相比 CUMS組，SDS組變化進展亦表現(xiàn)先慢后快的趨勢。
　　結(jié)論：1.SDS和 CUMS方法均能有效地模擬抑郁癥的核心癥狀，且兩種抑郁模型行為學的改變具有持續(xù)性，相比CUM

9、S模型SDS模型更能使動物抑郁行為達到一種持久而穩(wěn)定的理想效果，為動態(tài)觀察抑郁癥大鼠生理生化的改變提供了更可靠更客觀的選擇對象。
　　2. CUMS模型誘導抑郁模型大鼠海馬神經(jīng)元內(nèi) GR表達減少，從而引起大鼠海馬神經(jīng)元受損。
　　3. CUMS和SDS方式誘導的抑郁模型大鼠表現(xiàn)不同變化節(jié)奏的海馬DG區(qū)GR表達減低以及海馬形態(tài)變化，SDS模型相比 CUMS模型更能使動物抑郁行為達到一種持久而穩(wěn)定的理想效果，故結(jié)合不同類型應激方