參梅養(yǎng)胃顆粒的質(zhì)量標準研究.pdf

1、參梅養(yǎng)胃顆粒由蒲公英、甘草、土木香、丹參、白芍等十一味藥組成，經(jīng)水煎煮（二次，第一次至少10倍量水、第二次至少5倍量水，煎煮時間同原標準為3小時）、濃縮(清膏的相對密度同原標準為1.30(90～95℃))、干燥工藝而成，具有養(yǎng)陰和胃的作用，用于淺表性胃炎，胃陰不足型慢性胃炎及各種胃部不適癥等癥，規(guī)格為每袋裝(1)16g(2)5g（無蔗糖型）。由于該品種現(xiàn)行質(zhì)量標準控制項目過于簡單，多家企業(yè)生產(chǎn)的產(chǎn)品在市面上質(zhì)量存在較大差異，因此有必要進

2、行對其質(zhì)量標準進行提高。
　　本文對參梅養(yǎng)胃顆粒的質(zhì)量標準提高進行了研究。分別從規(guī)范及統(tǒng)一處方和制法、薄層鑒別、含量測定、指紋圖譜四方面進行，并從中提煉出重現(xiàn)性好的成果建立了質(zhì)量標準。
　　處方、制法在征求各企業(yè)意見后，最終明確為:北沙參處方量70g，二次煎煮的加水量為10倍量和5倍量，每次煎煮時間同原標準為3小時，清膏的相對密度同原標準為1.30(90～95℃)，輔料同原標準為糊精和蔗糖，但加入量改為“適量”，制成總量為1

3、000g。
　　薄層色譜鑒別分別對該制劑中原料藥材當歸、蒲公英、甘草等藥味進行定性鑒別，分別采用對照藥材和對照品進行隨行對照。結(jié)果蒲公英、甘草重復性和重現(xiàn)性較好，分別有29、28批樣品檢出蒲公英、甘草，因此兩個薄層鑒別列入標準草案;當歸藥味、土木香藥味和紅花藥味由于陰性有干擾而未列入標準草案。采用HPLC法對該制劑的原藥材土木香中的土木香內(nèi)酯、異土木香內(nèi)酯進行定性鑒別，以土木香內(nèi)酯、異土木香內(nèi)酯2個對照品同時對照，C18柱分離，以

4、乙腈-0.1％磷酸水溶液(50∶50)為流動相，檢測波長225nm，結(jié)果:30批樣品檢出土木香內(nèi)酯、異土木香內(nèi)酯，列入標準草案。
　　含量測定采用HPLC法同時測定參梅養(yǎng)胃顆粒中的原藥材丹參中的丹參素鈉、原藥材白芍中的芍藥苷的含量。以十八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑的色譜柱;以甲醇∶乙腈(2∶1)為流動相A，以0.1％磷酸水溶液為流動相B，梯度洗脫，0～16 min(9％ A)，16～40 min(21％ A)。柱溫30℃;檢測波長為

5、230nm;流速1mL/min;理論板數(shù)按丹參素鈉峰計算應不低于5000。結(jié)果:專屬性試驗陰性無干擾。丹參素鈉和芍藥苷分別在40.5-506.25μg、50.19-627.38μg范圍內(nèi)呈良好線性關(guān)系（r分別為1.000、0.9995，n=8），重復性RSD分別為0.4％、1.7％(n=12)，回收率分別為97.16％、99.83％，RSD分別為1.51％、0.62％(n=6)。理論板數(shù)按丹參素鈉峰計算應不低于5000。根據(jù)統(tǒng)一處方量和

6、加水量后的四家廠家的12批樣品中丹參素鈉含量在3.2652～5.9741 mg/袋之間，平均含量為4.560mg/袋(RSD=24.7％，n=4)，芍藥苷含量在9.5742～14.9648mg/袋之間，平均含量為12.191 mg/袋（RSD=18.8％，n=4）。實驗方法在不同品牌色譜柱不同儀器上重現(xiàn)性良好。因此列入標準草案，其含量下限定為每袋含丹參以丹參素鈉(C9HgNaO5)計不得少于3.5mg，含白芍以芍藥苷（C23H28O11

7、）計不得少于9.4mg。
　　采用HPLC法建立了參梅養(yǎng)胃顆粒的指紋圖譜，以制法規(guī)范和統(tǒng)一后的10批樣品生成標準指紋圖譜并一次評價了所有樣品質(zhì)量的均一性。采用色譜柱:Waters SymmetryC18(250mm×4.6mm,5μm);以乙腈-0.1％甲酸水溶液為流動相，進行梯度洗脫;流速為1.0mL/min;進樣體積10μL;檢測波長為245nm;柱溫30℃。對5個廠家27批參梅養(yǎng)胃顆粒的相似度進行了分析，結(jié)果相似度在0.81

8、4～0.986之間。此外，應用高效液相色譜-離子阱-飛行時間質(zhì)譜法(LCMS-IT-TOF)對參梅養(yǎng)胃顆粒指紋圖譜中各色譜峰進行了定性分析。質(zhì)譜的離子源為電噴霧離子源，同時采用正負離子檢測模式，獲得各組分多級質(zhì)譜數(shù)據(jù)。利用質(zhì)譜裂解規(guī)律和文獻數(shù)據(jù)，確定了9個色譜峰的身份，分別為1（沒食子酸），5（丹參素），9(S)（芍藥內(nèi)酯苷），10（芍藥苷），11（甘草苷），12（沒食子酰芍藥苷/沒食子酰芍藥內(nèi)酯苷或者其同分異構(gòu)體），13（迷迭香酸），