阿魏酸對腦微血管內皮細胞氧化損傷的保護作用.pdf

1、目的:
　　本實驗主要在細胞水平上，運用體外構建模擬血管性癡呆的糖氧剝奪(oxygen-glucose deprivation，OGD)的腦微血管內皮細胞(brain mierovascularendothelial cells，BMECs)模型，并在在不同時間點（2，4，6小時）研究阿魏酸(Ferulic acid，F(xiàn)A)對這個模型所致的細胞氧化損傷的保護作用。
　　方法:
　　通過在細胞水平上，運用（95％氮氣+5

2、％二氧化碳）混合氣體的方法，模型缺氧缺糖的細胞環(huán)境，建立體外OGD模型。按照實驗目的建立分組，正常組，模型組，阿魏酸組（FA組）。首先運用MTT法檢測細胞活性，待模型組的細胞活性對比正常組有顯著性差異，提示細胞造模成功后，在不同時間段造模的細胞模型給予阿魏酸進行預保護，探究阿魏酸的保護氧化損傷的細胞的作用。運用流式細胞術檢測技術，研究和檢測活性氧(reactive oxygen species，ROS)產生量，ROS的過度累計會損傷細胞

3、的提示細胞的氧化損傷的程度，檢測ROS的產量直接反應了細胞上的氧化損傷的水平。運用硫代巴比妥酸顯色法，研究和檢測細胞丙二醛(methane dicarboxylicaldehyde，MDA)水平，MDA是膜脂氧化的重要產物之一，MDA的水平也提示著細胞氧化損傷的水平。運用氮藍四唑顯色法，研究和檢測細胞總超氧化物歧化酶(superoxidedismutase，SOD)活性。SOD是廣泛存在于動植物中的一種重要的抗氧化酶，SOD的活性提示著

4、細胞的抗氧化能力。
　　結果:
　　體外糖氧剝奪模型對腦微血管內皮細胞造成的氧化損傷嚴重性呈時間依賴性，并在一定時間內(2，4，6h)損傷程度隨時間遞增。模型組隨著OGD的時間的增加(2，4，6h)細胞活性不斷降低，提示造模的成功，阿魏酸能顯著增強被損傷的細胞存活性。在流式細胞術檢測的模型組的ROS的產量隨著時間的增加而增加，而給藥阿魏酸后可以顯著減少ROS的產量，提示阿魏酸的抗氧化作用。同時，給藥阿魏酸后明顯削減細胞內MD