菝葜抗炎有效部位群的活性成分及其作用機制研究.pdf

1、中藥菝葜，又名金剛藤，為百合科植物菝葜 Smilax china L.的干燥根莖。菝葜作為常用中藥，收載于2015版《中國藥典》，具有祛風利濕、解毒散瘀的功效，用于筋骨酸痛，小便淋漓，帶下量多等癥。湖北福人藥業(yè)有限公司以菝葜為原料生產的“金剛藤膠囊”，用于治療盆腔炎、附件炎、包塊及婦科其他疾患，療效顯著，受到廣大患者歡迎。
　　項目組前期的研究結果表明，皂苷和黃酮類成分是菝葜主要的抗炎有效物質部位，但發(fā)揮藥效作用的活性成分并不清楚

2、?；谡n題組對菝葜抗炎有效部位群指紋圖譜和血清藥化的研究結果，本論文對菝葜抗炎有效部位群的主要入血成分進行了抗炎、抗氧化及免疫調節(jié)活性研究，并對主要活性成分抗炎作用機制進行探討，為詮釋菝葜抗炎作用的藥效物質基礎及遴選活性先導化合物提供了科學依據(jù)。本論文主要完成了以下研究工作：
　　1.采用DPPH自由基、羥自由基反應體系、FRAP法分別測定菝葜有效部位群及落新婦苷、花旗松素、槲皮素、蘆丁、白藜蘆醇、黃杞苷等6個單體成分的自由基清除

3、能力和鐵離子還原能力；建立H2O2誘導大鼠紅細胞膜損傷模型，孵育后檢測藥物對紅細胞溶血抑制率和紅細胞懸液中丙二醛（ MDA）含量、超氧化物歧化酶（ SOD）及谷胱甘肽過氧化物酶（GSH-Px）活力的影響。結果顯示，菝葜抗炎有效部位群及其6個單體均具有體外抗氧化作用，并對紅細胞膜具有保護作用，推測菝葜抗炎效應與其抗氧化特性有關。
　　2.采用小鼠脾淋巴細胞免疫活性篩選模型，探討菝葜有效部位群及其含有的花旗松素、白藜蘆醇、甲基原薯蕷皂

4、苷等12個單體成分的免疫調節(jié)作用。采用 CCK-8法測定細胞的增殖率，Elisa法測定細胞中 IL-2、TNF-α、IFN-γ三種細胞因子的分泌量。結果表明，這些藥物均具有免疫活性，其中菝葜有效部位群作用最強，體現(xiàn)了中藥多成分的協(xié)同作用。
　　3.構建以COX-1和COX-2分子靶標為主的基于THP-1細胞的體外抗炎篩選模型，將菝葜有效部位群及其12個單體成分作用于THP-1細胞后，探討藥物對COX-2的選擇性抑制作用。結果表明，

5、這些藥物對COX-2的抑制作用均有一定的選擇性，而菝葜有效部位群、花旗松素和落新婦苷對COX-2抑制作用最顯著。
　　4.采用LPS誘導THP-1細胞模型，探討菝葜有效部位群、花旗松素及落新婦苷對相關促炎細胞因子生成及基因表達的影響。結果表明，三種物質均能顯著的抑制IL-1β、IL-6和TNF-α的生成并能有效降低其mRNA的表達。由此推測，菝葜活性成分發(fā)揮抗炎作用的一條途徑是抑制細胞產生IL-1β、IL-6和TNF-α等促炎因子