三紫創(chuàng)愈海綿敷料的藥效學及質量評價研究.pdf

1、由于人口老齡化加劇，交通運輸業(yè)迅速發(fā)展，車禍等創(chuàng)傷事故發(fā)生率不斷增加，使得皮膚傷口這一問題越來越成為世界范圍內非常嚴重的健康問題與負擔。近年來，國內外在傷口愈合方面也提出了很多新的治療理論、方法和技術。1974年誕生了全球第一塊密閉性敷料安舒妥，提出濕性愈合的理論，并逐漸被廣泛接受。近50年來，國內大量關于創(chuàng)面的基礎研究和臨床治療證實了濕潤環(huán)境有利于傷口的愈合，新型保濕敷料也不斷進入醫(yī)療市場。但新型敷料存在功能單一、缺乏復合治療功能、制

2、備工藝復雜、價格昂貴、市場普及慢等缺點，且國內市場上的新型敷料主要來自歐美行業(yè)巨頭，本土企業(yè)的產品很少。中藥敷料在治療傷口修復方面獨具特色，能主動促進創(chuàng)面愈合，防止瘢痕增生，適合于各類急慢性傷口的治療護理，且來源簡單、安全、副作用小，費用不高，能提高傷口護理水平，降低醫(yī)療服務成本，提高醫(yī)院工作效率。然而，中藥敷料也存在不能維持密閉、微濕潤的環(huán)境、使用不便等不足，其安全性問題也一直備受關注。
　　醫(yī)用敷料質量的好壞直接關系到患者的生

3、命安全，發(fā)達國家從20世紀60年代就開始對醫(yī)用敷料進行安全性監(jiān)測。1976年，美國食品藥物管理局(FDA)開始管理醫(yī)用敷料，并實行售前審批制度，建立了一系列生物和質量評價標準。我國從70年代后期開始研究醫(yī)用敷料的生物學評價，中國醫(yī)療器械注冊的相關規(guī)定要求醫(yī)用敷料正式進入市場前，在完成加工性能、外形設計等程序后，必須對其進行物理和化學性能評價，生物學評價、制定產品質量標準等，但是與發(fā)達國家相比還是有一定差距。如由于中藥敷料成分復雜，且制劑

4、形式多樣，國家尚未建立統(tǒng)一化的中藥敷料評價標準，制約著其產業(yè)化發(fā)展。
　　因此，中藥敷料的研究存在一些不足，研發(fā)體系存在著缺陷，需要進一步完善。本課題組在總結中草藥和民間廣為流傳使用的傷科驗方基礎上，依據中藥組方原則，選取功效不同的中草藥創(chuàng)制出傷科驗方“三七復方”。全驗方由三七、紫珠草、白芨、兒茶、雞矢藤、兩面針、虎杖等9味中草藥組成，具有良好的止血、抗菌、消腫、鎮(zhèn)痛等作用，但原劑型存在使用不便、容易污染傷口等不足。本課題組已對該

5、傷科驗方進行改革，將該中藥傷科驗方的特色與新型保濕敷料的優(yōu)勢結合起來，研制開發(fā)出一種能夠提供一個濕性愈合的環(huán)境，快速吸收滲出液，促進肉芽生長，減少感染，主動促進創(chuàng)面愈合的中藥復合海綿敷料，即三紫創(chuàng)愈海綿敷料，適用于各類機械性或創(chuàng)傷性傷口、慢性感染傷口、糖尿病足潰瘍等急慢性傷口。然而，其安全性和藥效有待證實，質量有待評價。為此，我們對三紫創(chuàng)愈海綿敷料進行藥效學和質量分析研究，確保海綿敷料安全有效、穩(wěn)定可控，為醫(yī)用敷料的注冊審批提供重要科研

6、資料，為進一步擴大生產提供科學的依據。
　　目的:
　　1.驗證三紫創(chuàng)愈海綿敷料對大鼠創(chuàng)面修復的影響，探討其治療機理。
　　2.評價三紫創(chuàng)愈海綿敷料的物理性能。
　　3.鑒別三紫創(chuàng)愈海綿敷料中藥材三七、虎杖。
　　方法:
　　1.三紫創(chuàng)愈海綿敷料的藥效學研究
　　本研究采用大鼠背部小面積皮膚切除傷模型，將大鼠隨機分為3組，陰性對照組10只，陽性對照組10只，實驗組10只。大鼠取俯臥位，脫去大鼠背

7、部毛發(fā)，用3％的戊巴比妥鈉腹腔注射麻醉，碘伏及70％乙醇常規(guī)消毒皮膚后，用利刀于大鼠背部左右對稱制作2個直徑為2cm的圓形全層缺損創(chuàng)面，醋酸洗必泰溶液充分清洗消毒創(chuàng)面。實驗組用自制的三紫創(chuàng)愈海綿敷料覆蓋創(chuàng)面，陽性對照組用空白海綿基質覆蓋創(chuàng)面，陰性對照組用凡士林紗布覆蓋創(chuàng)面，三組外層均用無菌紗布敷料包扎。前三天每日換藥一次，三天后隔一天換藥，一周后隔兩天換藥。每次換藥時，觀察三組大鼠性情和行為等生活情況以及創(chuàng)面大體情況，包括精神狀況、攝食

8、及飲水情況、活動情況、創(chuàng)面滲出、出血、感染跡象、肉芽組織生長情況，并選定創(chuàng)面面積、炎癥積分、病理學情況作為修復指標。治療后第3d、7d、14d，數(shù)碼相機拍照，利用Image J軟件測定刻度尺像素比例，測出創(chuàng)面面積，計算創(chuàng)面愈合率;治療后第3d、7d測創(chuàng)面炎癥積分，計算炎癥積分值并進行統(tǒng)計學分析;于治療后第3d、7d、14d隨機抽取6只大鼠（每組2只）過量麻醉處死，立即切取創(chuàng)面皮膚，4％的多聚甲酵固定，用H.E染色，觀察炎細胞浸潤及壞死、

9、纖維細胞及毛細血管增生、膠原纖維等情況，進行形態(tài)學描述。
　　2.三紫創(chuàng)愈海綿敷料的質量研究
　　本研究應用文獻回顧的方法，參照《中國藥典》2010版的相關要求及中國醫(yī)療器械注冊的相關規(guī)定標準，咨詢中藥制劑學、護理學的臨床及教學一線專家，采用薄層色譜法對三紫創(chuàng)愈海綿敷料進行定性鑒別，鑒別海綿敷料中人參皂苷Rb1、人參皂苷Rg1、虎杖苷。將對照品溶液、供試品溶液、陰性溶液點于同一薄層板上，在展開容器內用展開劑展開，使試樣溶液所

10、含成分分離，所得色譜圖進行對比，進行制劑的鑒別。同時選取透氣率、吸水率、保濕性、抗撕強度、重量差異、耐熱性、耐寒性等7個指標作為海綿敷料的評價指標。為了驗證工藝條件合理性，進行了三批三紫創(chuàng)愈海綿敷料的研究。
　　結果:
　　1.大鼠飲食和活動情況
　　麻醉清醒后，各組大鼠均精神不佳，無任何主動活動及飲食;治療后第3d，實驗組和陽性對照組大鼠精神狀態(tài)、主動活動、飲食均接近正常，陰性對照組有少量活動及飲食，精神狀態(tài)好轉;治

11、療后第7d、14d組各大鼠精神狀態(tài)、主動活動、飲食均正常，組間無明顯差別。各組均未見實驗性的大鼠死亡。
　　2.大鼠傷口愈合情況
　　創(chuàng)面愈合率比較，治療后第3天，實驗組創(chuàng)面愈合率為(40.22±0.05)％，陽性對照組創(chuàng)面愈合率為(38.33±0.1)％，高于陰性對照組創(chuàng)面愈合率(22.02±0.03)％，比較有顯著性差異(P＜0.05);治療后第7天，實驗組創(chuàng)面愈合率為(71.32±0.08)％，高于陽性對照組創(chuàng)面愈合率

12、(60.66±0.09)％和陰性對照組創(chuàng)面愈合率(50.01±0.10)％，比較有顯著性差異(P＜0.05);治療后第14天，實驗組創(chuàng)面愈合率為(90.44±0.07)％，高于陽性對照組創(chuàng)面愈合率(81.03±0.04)％和陰性對照組創(chuàng)面愈合率(71.65±0.10)％，比較有顯著性差異（P＜0.05）。三紫創(chuàng)愈海綿敷料能縮小創(chuàng)面面積，縮短創(chuàng)面的愈合時間，提高創(chuàng)面愈合率。
　　病理學觀察，與對照組相比，治療后第3d，實驗組較早出現(xiàn)

13、毛細血管，成纖維細胞開始增殖。治療后第7d，實驗照組創(chuàng)面纖維增生明顯，膠原纖維明顯多于對照組。治療后第14d，與對照組相比實驗組膠原纖維增生明顯，與術后第7d相比沒有明顯改變，傷口未見異物組織，沒有組織破壞和壞死現(xiàn)象。三紫創(chuàng)愈海綿敷料能促進毛細血管和膠原纖維的生長。
　　炎癥積分比較，治療后第3天，實驗組創(chuàng)面炎癥積分為(3.20±0.42)分，低于陽性對照組創(chuàng)面炎癥積分(4.18±0.60)分和陰性對照組創(chuàng)面炎癥積分(5.67±0

14、.50)分，比較有顯著性差異(P＜0.05);治療后第7天，實驗組創(chuàng)面炎癥積分為(1.70±0.48)分，低于陽性對照組創(chuàng)面炎癥積分(2.55±0.52)分和陰性對照組創(chuàng)面炎癥積分(3.89±0.33)分，比較有顯著性差異（P＜0.05）。三紫創(chuàng)愈海綿敷料能減少創(chuàng)面滲液的過多分泌。
　　3.三紫創(chuàng)愈海綿敷料的質量評價
　　實驗結果顯示三紫創(chuàng)愈海綿敷料的平均透氣率為80.86％，故本品透氣率暫定為不低于78％;平均保濕率為38

15、.11％，保濕率暫定為不低于35％;平均吸水率為11.15倍，吸水率暫定為不低于10倍;平均抗撕強度為131.59g/cm3，抗撕強度標準暫定為不小于130g/cm3;最大片重差異為3.5％，最小片重差異為3.4％，重量差異限度在平均重量的±5％以內，符合藥典評價標準。于冰箱中貯存后，敷料未見明顯分層現(xiàn)象;放置烘箱后，敷料表面無滲油現(xiàn)象，有光澤。三紫創(chuàng)愈海綿敷料具有良好的透氣率、吸水率和保濕性，耐熱、耐寒、賦形性良好，抗撕強度高，重量差

16、異差別小。薄層色譜鑒別三紫創(chuàng)愈海綿敷料中三七及虎杖的分離度好，樣品色譜中，在與對照品色譜相應的位置上有相同顏色的斑點，且陰性無干擾。
　　結論:
　　1.通過對三紫創(chuàng)愈海綿敷料主要藥效學的研究表明，三紫創(chuàng)愈海綿敷料具有快速止血、抗炎抑菌、活血化瘀等作用，能吸收傷口過多的滲出物，防止感染，為創(chuàng)面愈合創(chuàng)造良好的微環(huán)境，促進創(chuàng)面血管新生，促進肉芽組織生長，加速創(chuàng)面的愈合，并能減少瘢痕的產生，減少后遺癥，降低死亡率。三紫創(chuàng)愈海綿敷料