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文檔簡(jiǎn)介
1、第一部分:抑郁癥模型大鼠海馬CA1區(qū)、齒狀回毛細(xì)血管改變的體視學(xué)研究
目的:研究慢性不可預(yù)見(jiàn)性刺激(Chronically unpredicted stress,CUS)所致抑郁癥模型大鼠海馬CA1區(qū)和齒狀回(Dentate gyrus,DG)體積及其內(nèi)毛細(xì)血管的改變。
方法:清潔級(jí)Sprague-Dawley(SD)雄性大鼠,經(jīng)篩選后隨機(jī)分為對(duì)照組(10只)和模型組(10只)。對(duì)照組大鼠每只每天抓取一次,不給予其他
2、處理。模型組采取CUS建立抑郁癥模型,共給予應(yīng)激35天。利用糖水偏好實(shí)驗(yàn)、開(kāi)場(chǎng)實(shí)驗(yàn)對(duì)大鼠進(jìn)行行為學(xué)測(cè)試,檢測(cè)模型是否建立成功。建模成功后,從對(duì)照組與模型組各隨機(jī)挑選5只大鼠,每只大鼠隨機(jī)選取一側(cè)半腦,行1mm厚連續(xù)腦組織切片,利用卡瓦列里原理計(jì)算海馬總體積及CA1區(qū)、齒狀回體積。根據(jù)隨機(jī)等距原則抽取包含海馬結(jié)構(gòu)的腦組織切片,在抽取的腦片的海馬CA1區(qū)、齒狀回部位上取1mm3大小的組織塊。利用Isector對(duì)組織進(jìn)行冰凍包埋,切取4μm厚
3、的切片,進(jìn)行免疫組織化學(xué)染色。每張切片放大100倍后,隨機(jī)選取10個(gè)視野拍照。采取免疫組化染色與體視學(xué)相結(jié)合的方法對(duì)大鼠海馬CA1區(qū)、齒狀回毛細(xì)血管長(zhǎng)度、體積、表面積以及平均直徑進(jìn)行定量研究。
結(jié)果:1.與對(duì)照組相比,模型組大鼠體質(zhì)量減輕,糖水偏好百分比和開(kāi)場(chǎng)實(shí)驗(yàn)得分下降(P<0.05,P<0.05,P<0.05)。2.模型組較對(duì)照組大鼠海馬總體積、海馬CA1區(qū)和DG體積明顯減少,結(jié)果具有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(P<0.05,P<0.01
4、,P<0.05)。3.模型組較對(duì)照組大鼠海馬CA1區(qū)毛細(xì)血管總長(zhǎng)度、總體積、總表面積、平均直徑下降,結(jié)果具有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(P<0.05,P<0.01,P<0.05,P<0.05)。4.模型組較對(duì)照組大鼠海馬DG毛細(xì)血管的總體積、總表面積、平均直徑下降(P<0.05, P<0.05,P<0.05),總長(zhǎng)度無(wú)明顯差異(P<0.05)。
第二部分:跑步鍛煉對(duì)抑郁癥模型大鼠海馬CA1區(qū)、齒狀回毛細(xì)血管的影響
目的:探討跑步鍛煉
5、對(duì)CUS所致抑郁癥模型大鼠海馬CA1區(qū)和齒狀回及其毛細(xì)血管的作用。
方法:清潔級(jí)SD雄性大鼠,經(jīng)篩選后隨機(jī)分為對(duì)照組(10只),模型組(10只)和模型跑步組(10只)。對(duì)照組大鼠每只每天抓取一次,不給予其他處理。模型組和模型跑步組采取慢性不可預(yù)見(jiàn)刺激(CUS)建立抑郁癥模型。建模4周后,利用糖水偏好實(shí)驗(yàn)、開(kāi)場(chǎng)實(shí)驗(yàn)和強(qiáng)迫游泳實(shí)驗(yàn)對(duì)三組大鼠進(jìn)行行為學(xué)測(cè)試,檢測(cè)抑郁癥模型是否建立成功。建模成功后,模型跑步組進(jìn)行跑步鍛煉。跑步鍛煉4周
6、后,再次利用糖水偏好實(shí)驗(yàn)、開(kāi)場(chǎng)實(shí)驗(yàn)和強(qiáng)迫游泳實(shí)驗(yàn)對(duì)三組大鼠進(jìn)行行為學(xué)檢測(cè)。行為學(xué)測(cè)試結(jié)束后,從對(duì)照組、模型組、模型跑步組三組大鼠中每組各隨機(jī)挑選5只大鼠,每只大鼠隨機(jī)選取一側(cè)半腦,行1mm厚連續(xù)腦組織切片,利用卡瓦列里原理計(jì)算海馬總體積及CA1區(qū)、齒狀回體積。根據(jù)隨機(jī)等距原則抽取包含海馬結(jié)構(gòu)的腦組織切片,在抽取的腦片的海馬CA1區(qū)、齒狀回部位上取1mm3大小組織。利用Isector對(duì)組織冰凍包埋,切取4μm厚的切片,進(jìn)行免疫組織化學(xué)染色
7、。每張切片放大100倍隨機(jī)選取10個(gè)視野拍照。采取免疫組化染色與體視學(xué)相結(jié)合的方法對(duì)大鼠海馬CA1區(qū)、齒狀回毛細(xì)血管長(zhǎng)度、體積、表面積以及平均直徑進(jìn)行定量研究。
結(jié)果:1.四周應(yīng)激結(jié)束時(shí),與對(duì)照組相比,模型組與模型跑步組大鼠體質(zhì)量減輕(P<0.01, P<0.01),糖水偏好百分比下降(P<0.01,P<0.01),開(kāi)場(chǎng)實(shí)驗(yàn)得分降低(P<0.01,P<0.01),強(qiáng)迫游泳不動(dòng)時(shí)間增加( P<0.05,P<0.05),但兩組之間
8、無(wú)差異(P>0.05,P>0.05,P>0.05,P>0.05)。經(jīng)過(guò)四周的跑步鍛煉后,較對(duì)照組相比,模型跑步組大鼠體質(zhì)量減輕(P<0.05),糖水偏好百分比,開(kāi)場(chǎng)實(shí)驗(yàn)得分和強(qiáng)迫游泳不動(dòng)時(shí)間無(wú)差異(P>0.05,P>0.05,P>0.05),模型組大鼠體質(zhì)量減輕(P<0.05),糖水偏好百分比和開(kāi)場(chǎng)實(shí)驗(yàn)得分降低(P<0.05,P>0.05),強(qiáng)迫游泳不動(dòng)時(shí)間增加(P<0.05)。模型跑步組較模型組糖水偏好百分比升高(P<0.05),但兩
9、組在體質(zhì)量、開(kāi)場(chǎng)實(shí)驗(yàn)得分、強(qiáng)迫游泳不動(dòng)時(shí)間無(wú)差異(P>0.05,P>0.05,P>0.05)。2.與對(duì)照組比較,模型組大鼠海馬總體積、海馬CA1區(qū)體積、海馬 DG體積減少(P<0.01,P<0.01,P<0.01),模型跑步組大鼠海馬總體積、CA1區(qū)體積、DG體積不具有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(P>0.05,P>0.05,P>0.05)。模型跑步組較模型組海馬總體積、海馬CA1區(qū)體積、DG體積增加(P<0.01,P<0.05,P<0.05)。3.模型
10、組較對(duì)照組大鼠海馬CA1區(qū)毛細(xì)血管總長(zhǎng)度、總體積、總表面積下降(P<0.01,P<0.01, P<0.01),平均直徑無(wú)差異(P>0.05)。模型跑步組海馬CA1區(qū)毛細(xì)血管的總長(zhǎng)度、總體積、總表面積較模型組增加(P<0.05,P<0.01,P<0.01),平均直徑兩組無(wú)差異(P>0.05)。模型跑步組與對(duì)照組海馬CA1區(qū)毛細(xì)血管的總長(zhǎng)度、總體積、總表面積和平均直徑不具有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(P>0.05,P>0.05,P>0.05,P>0.05)
11、。4.模型組較對(duì)照組大鼠海馬DG毛細(xì)血管總長(zhǎng)度、總體積、總表面積下降(P<0.01,P<0.01,P<0.01),平均直徑無(wú)差異(P>0.05)。模型跑步組海馬DG毛細(xì)血管的總長(zhǎng)度、總體積、總表面積較模型組增加(P<0.05,P<0.01,P<0.05),平均直徑兩組無(wú)差異(P>0.05),模型跑步組與對(duì)照組海馬DG毛細(xì)血管的總長(zhǎng)度、總體積、總表面積和平均直徑不具有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(P>0.05,P>0.05,P>0.05,P>0.05)。<
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