布美他尼通過抑制NKCC1下調(diào)AQP4的表達(dá)減輕缺血性腦水腫.pdf

1、目的：
　　研究大鼠腦缺血再灌注損傷后早期AQP4及NKCC1的表達(dá)變化與腦水腫的關(guān)系，探討AQP4及NKCC1在缺血性腦水腫中的內(nèi)在聯(lián)系。
　　方法：
　　選取健康的雄性SD大鼠104只，體重在300～350g之間,將其隨機(jī)的分為以下的3組：布美他尼組（48只）、模型組（48只），假手術(shù)組（8只）。布美他尼組和模型組采用大腦中動(dòng)脈栓塞2小時(shí)后拔線再灌注制備局灶性缺血再灌注模型，布美他尼組于插線成功后尾靜脈注射布美他尼

2、（bumetanide溶于DMSO配成25mg/ml溶液，按30mg/kg濃度給藥），假手術(shù)組尼龍線不進(jìn)入大腦中動(dòng)脈，按Zea longa5分法進(jìn)行神經(jīng)功能評分判定造模是否成功，在造模后0h、3h、6h、24h、3d、7d處死，每個(gè)時(shí)間點(diǎn)4只大鼠采用干濕重法測腦組織含水量，計(jì)算出腦組織水腫程度，4只被用做取腦組織切片，采用HE染色的方法對腦組織造模后的組織形態(tài)學(xué)改變進(jìn)行觀察，利用免疫組織化學(xué)技術(shù)對AQP4、NKCC1的表達(dá)水平進(jìn)行檢測。

3、
　　結(jié)果：
　　HE染色后發(fā)現(xiàn)，假手術(shù)組大鼠腦組織無異常改變，布美他尼組各時(shí)間點(diǎn)均較模型組的細(xì)胞腫脹、間隙增寬、神經(jīng)元壞死均有所改善。干濕重法測腦組織含水量發(fā)現(xiàn)，模型組第0h、3h與假手術(shù)組差異無顯著性，第6h、24h、3d、7d與假手術(shù)組相比差異均有顯著性（P﹤0.05），布美他尼組第0h、3h與假手術(shù)組差異無顯著性，第6h、24h、3d、7d與假手術(shù)組之間進(jìn)行比較，腦含水量有明顯增多，差異均有顯著性（P﹤0.05），模

4、型組與布美他尼組相比，第0h組腦含水量無明顯減少，差異無顯著性（P>0.05），第3h、6h、24h、3d、7d組比較，腦含水量有下降，差異有顯著性（P﹤0.05），且模型組與布美他尼組腦水腫高峰均于第3d出現(xiàn)，第7d稍有所下降。免疫組化檢測NKCC1及AQP4表達(dá)，布美他尼組及模型組表達(dá)高峰均于第3d出現(xiàn)，模型組0h、3h與假手術(shù)組比較，差異無顯著性（P>0.05），第6h、24h、3d與7d與第0h比較差異有顯著性（P﹤0.05），

5、布美他尼組與假手術(shù)組比較，第0h、3h組差異無顯著性（P>0.05），第6h、24h、3d與7d與第0h比較差異有顯著性（P﹤0.05），模型組與布美他尼組比較，第0h組相比差異無顯著性，第3h、6h、24h、3d、7d組比較治療組AQP4、NKCC1明顯下降，差異有顯著性（P﹤0.05）。缺血再灌注后腦水腫與AQP4的表達(dá)具有相關(guān)性r=0.912（P﹤0.01），與NKCC1的表達(dá)也具有相關(guān)性r=0.892（P﹤0.01）。