揚子鱷輸卵管蛋白分泌物及性激素受體定位兼論B超對卵泡發(fā)育的檢測.pdf

1、揚子鱷是國家一級重點保護(hù)的珍稀爬行動物，已被IUCN確認(rèn)為世界上最瀕危的鱷類之一。無論對于揚子鱷的野生種群還是圈養(yǎng)種群而言，積極開展相關(guān)的繁殖生物學(xué)研究都具有著極其重要的意義。輸卵管、性激素以及卵巢發(fā)育均在雌性爬行動物的生殖過程中扮演著重要的角色。但當(dāng)前針對揚子鱷輸卵管蛋白分泌及其性激素受體定位的研究尚處于空白。
　　本研究以雌性揚子鱷的輸卵管為研究對象，利用組織化學(xué)、免疫化學(xué)、超微結(jié)構(gòu)技術(shù)，研究了揚子鱷輸卵管的蛋白分泌情況以及性

2、激素受體的分布等，研究成果為揚子鱷輸卵管內(nèi)環(huán)境的變化及其與性激素受體作用關(guān)系等研究提供了參考。研究表明：揚子鱷輸卵管劃分為漏斗部、蛋白分泌部、峽部、子宮部、陰道部5個分區(qū)，通過組織化學(xué)方法，運用schiff試劑（PAS），阿利新藍(lán)（AB），汞–溴酚藍(lán)（BB）三種不同的染色劑分別對各個區(qū)域中性黏蛋白，酸性黏蛋白和蛋白質(zhì)分布進(jìn)行統(tǒng)計，并在透射電鏡下觀察各部分細(xì)胞的分泌情況。結(jié)果發(fā)現(xiàn)輸卵管分泌部，子宮部，陰道部上皮細(xì)胞的三種陽性物質(zhì)在各時期分

3、布較多，分泌部和子宮部全年以中性和酸性粘蛋白為主，陰道部上皮三種陽性染色均較多。分泌部腺體PAS，BB陽性物質(zhì)分泌較多，子宮部腺體以AB，BB陽性為主，陰道部腺體各種物質(zhì)分泌相對較少。電鏡下上皮細(xì)胞由纖毛細(xì)胞及分泌細(xì)胞排列而成。分泌部，子宮部，陰道部分泌泡的電子密度排卵前大于產(chǎn)蛋后。這些數(shù)據(jù)都支持揚子鱷輸卵管不同的部位分泌的不同蛋白可能用于形成卵清蛋白，蛋殼纖維和鈣化外殼等。免疫化學(xué)染色定位不同時期輸卵管雌激素受體（ER）、雄激素受體（

4、AR）、孕激素受體（PR）的分布情況，結(jié)果表明，三種性激素受體在整條輸卵管都有分布，三種受體總體分布1月份較多，5月份最少，到7月再次增加到峰值，8月維持較高水平。對17條分別處于冬眠期及活動期的成年雌性揚子鱷的卵泡發(fā)育進(jìn)行了B型超聲波檢測，并對冬眠期的卵巢卵泡發(fā)育情況進(jìn)行了回歸分析。結(jié)果表明揚子鱷心、肝、腸等內(nèi)臟器官形態(tài)在B超視野下清晰可見。冬眠期兩側(cè)卵巢中的卵泡共41枚，繁殖期共42枚。冬眠期卵泡處于低回聲暗區(qū)或無回聲暗區(qū)的未成熟狀