痛瀉要方對腹瀉型腸易激綜合征模型大鼠血清5-HT及VIP含量的影響.pdf

1、目的：
　　腹瀉型腸易激綜合征（IBS-D）是臨床上常見的胃腸功能紊亂性疾病，中醫(yī)在其辨證論治上獨具優(yōu)勢。肝郁脾虛證是常見中醫(yī)證型，采用痛瀉要方治療本病在臨床上應(yīng)用廣泛。目前實驗研究缺乏公認的中醫(yī)證型動物模型，成功建立中醫(yī)肝郁脾虛證型IBS-D模型是治療該疾病的首要前提；大量的臨床研究已經(jīng)證實痛瀉要方治療IBS-D有效，但缺乏深入的中醫(yī)理論實驗研究。本研究為中醫(yī)證候模型的制備及痛瀉要方治療IBS-D提供實驗支持，并進一步完善腸易激

2、綜合征的理論研究，為臨床治療選藥提供理論和實驗支持。
　　方法：
　　選用健康SPF級SD大鼠120只，雌雄各半，8周齡，體重190?10g。適應(yīng)性飼養(yǎng)一周后，隨機抽取12只（雌雄各半）作為正常組（N）；余下大鼠開始造模。
　　結(jié)合呂紅等、譚潔等描述的造模方法，采用慢性多因素不可預(yù)見性應(yīng)激聯(lián)合高脂高糖高熱飲食、高溫高濕環(huán)境建立起接近臨床患者病癥的中醫(yī)肝郁脾虛IBS-D大鼠模型。選用大鼠一般狀態(tài)及體重變化情況、糞便性狀評

3、分、痛閾值和腸道敏感性、敞箱行為評分以及糖水偏嗜度作為鑒定模型成功的標準。按照以上四項綜合積分排序，選用符合標準的大鼠隨機分為模型組（M）、痛瀉要方7天治療組（T7)、雙歧桿菌7天治療組(B7)、痛瀉要方14天治療組(T14)、雙歧桿菌14天治療組(B14)，每組12只（雌雄各半）。
　　藥物干預(yù)：N組、M組，每日均給予同等容量生理鹽水灌胃，連續(xù)14天；T7組給予痛瀉要方水煎液(7.5g/kg.d-1)灌胃,連續(xù)7天；B7組每日給

4、予雙歧桿菌混懸液(2×107 CFU/ml.d-1)灌胃，連續(xù)7天；T14組給予痛瀉要方水煎液(7.5g/kg.d-1)灌胃,連續(xù)14天；B14組每日給予雙歧桿菌混懸液(2×107 CFU/ml.d-1)灌胃，連續(xù)14天。
　　樣本取材及處理：治療結(jié)束后，水合氯醛麻醉大鼠，心臟取血，3000r/10min離心取上清液，采用酶聯(lián)免疫法測試血清5-HT和VIP的含量變化。實驗過程中所得數(shù)據(jù)均采用SPSS17.0進行統(tǒng)計學(xué)分析，計量資料

5、滿足正態(tài)性分布，所得數(shù)據(jù)采用均數(shù)?標準差（x?s）表示；多組間比較運用單因素方差分析，方差齊性組間比較用LSD法,方差不齊時組間比較用DunnettT3法。
　　結(jié)果：
　　1、大鼠一般狀態(tài)：
　　大鼠造模前，其毛色光滑，反應(yīng)迅速敏捷，精神佳，大便正常。造模結(jié)束后，與正常組比較，模型組大鼠毛色欠光澤，甚至有豎毛、活動量減少、食欲減退、喜蜷縮、扎堆、反應(yīng)遲緩，大便變軟或不成形，肛門部或有糞便污物附著等。治療結(jié)束后，與模型

6、組比較，痛瀉藥方組及雙歧桿菌組大鼠一般狀態(tài)均有較大的改善，食欲增強、活動力增加、反應(yīng)相對靈敏，稀便減少或有成型。
　　2、體重變化情況：
　?。?）造模結(jié)束后,與正常組比較，模型組大鼠體重增長緩慢，體重增長有統(tǒng)計學(xué)差異(p=0.00，p<0.05)。
　　（2）7天治療結(jié)束后，與正常組比較，模型組有顯著統(tǒng)計學(xué)差異(p=0.00，p<0.01)，痛瀉要方組及雙歧桿菌組有統(tǒng)計學(xué)差異(p=0.04，0.02，p<0.05)；

7、與模型組比較，痛瀉要方組及雙歧桿菌組無統(tǒng)計學(xué)差異(p>0.05)；與痛瀉要方組比較，雙歧桿菌組無統(tǒng)計學(xué)差異(p>0.05)。
　?。?）14天治療結(jié)束后，與正常組比較，模型組有顯著統(tǒng)計學(xué)差異(p=0.00，p<0.01)，痛瀉要方組及雙歧桿菌組無統(tǒng)計學(xué)差異(p=0.06，0.07，p>0.05)；與模型組比較，痛瀉要方組和雙歧桿菌組體重增長較快，差異有統(tǒng)計學(xué)意義(p<0.05)；與痛瀉要方組比較，雙歧桿菌組無統(tǒng)計學(xué)差異(p>0.0

8、5)。
　　3、大鼠模型鑒定結(jié)果：
　?。?）造模期間大鼠體重變化：造模14天以后，模型組體重增長緩慢。與正常組比較，模型組體重開有統(tǒng)計學(xué)差異(p=0.02，p<0.05)；造模第28天，與正常組比較，各模型組大鼠體重均有顯著統(tǒng)計學(xué)差異（p=0.00，p<0.01)。
　?。?）大鼠糞便性狀評分的變化：造模結(jié)束后，各模型組大鼠糞便性狀積分值顯著高于正常對照組（p=0.00)；與正常對照組比較，各模型對照組差異有顯著性統(tǒng)

9、計學(xué)意義(p<0.01)。
　?。?）大鼠痛閾值及腸道敏感性變化：造模結(jié)束后，各模型對照組大鼠痛閾值降低，腸道敏感性增高（p=0.00)；與正常對照組比較，差異有顯著性統(tǒng)計學(xué)意義（p<0.01)。（4）敞箱實驗評分結(jié)果：造模結(jié)束后，各模型組大鼠敞箱運動分值降低（p=0.00)；與正常組比較，差異有顯著性統(tǒng)計學(xué)意義（p<0.01)。
　?。?）糖水偏嗜度變化：造模結(jié)束后，各模型組大鼠糖水攝取量降低（p=0.00)；與正常組比較

10、，糖水偏嗜度有顯著性統(tǒng)計學(xué)差異（p<0.01)。
　　4、大鼠血清5-HT及VIP含量的變化：
　?。?）7天治療結(jié)束后，各組大鼠血清5-HT、VIP的含量變化：正常組最低，模型組最高。與正常組比較，模型組、痛瀉要方組及雙歧桿菌組5-HT、VIP含量有顯著統(tǒng)計學(xué)差異（p<0.01)；與模型組比較，痛瀉要方組及雙歧桿菌組無統(tǒng)計學(xué)差異（p>0.05)；與痛瀉要方組比較，雙歧桿菌組無統(tǒng)計學(xué)差異（p>0.05)。
　　（2）治

11、療14天結(jié)束后，各組大鼠血清5-HT、VIP含量變化：模型組最高，痛瀉要方組和雙歧桿菌組接近正常組。與正常組比較，模型組5-HT、VIP含量有顯著統(tǒng)計學(xué)差異（p<0.01)；與模型組比較，雙歧桿菌組和痛瀉要方組血清5-HT、VIP含量降低，差異有統(tǒng)計學(xué)意義（p<0.05)；與痛瀉要方組比較，雙歧桿菌組無統(tǒng)計學(xué)差異（p>0.05)。
　　結(jié)論：
　　1、慢性輕度不可預(yù)見性應(yīng)激聯(lián)合高脂高糖高熱飲食、高溫高濕環(huán)境同步造?？梢越?/p>