膳食鈣對(duì)飲水型氟暴露致子代肝臟損傷的干預(yù)作用.pdf

1、氟是機(jī)體必需微量元素之一，但長期高氟攝入會(huì)產(chǎn)生過量的自由基，引起機(jī)體全身慢性氟中毒（簡(jiǎn)稱地氟?。５胤∈鞘澜绶秶鷥?nèi)的公共衛(wèi)生問題之一。很多研究表明，氟中毒致機(jī)體損傷機(jī)理可能涉及氧化應(yīng)激，而細(xì)胞凋亡的增強(qiáng)可能是其中的一個(gè)重要環(huán)節(jié)。氟暴露可以透過胎盤屏障，過量的氟蓄積在子代體內(nèi)，會(huì)造成子代機(jī)體損傷。肝臟是機(jī)體重要的解毒器官，也是氟中毒致機(jī)體損傷的重要靶器官之一。
　　鈣對(duì)機(jī)體健康非常重要，構(gòu)成牙齒和骨骼的鈣占機(jī)體鈣含量的絕大部分，形

2、成基本骨架，支撐著整個(gè)軀體。鈣離子是一種重要的細(xì)胞信使分子，參與調(diào)節(jié)機(jī)體的多項(xiàng)生物學(xué)效應(yīng)。膳食低鈣可能與氟暴露具有協(xié)同作用，而攝入膳食高鈣可以改善氟中毒導(dǎo)致的機(jī)體損傷。目前，膳食鈣與氟中毒的關(guān)系已有相關(guān)報(bào)道，但膳食鈣對(duì)氟暴露致子代一些生理功能的影響及作用機(jī)制尚未明了，特別是膳食鈣對(duì)氟暴露的靶器官——肝臟的影響鮮見報(bào)道。因此，在前期研究的基礎(chǔ)上，本研究以肝臟為觀測(cè)點(diǎn)，率先從器官水平、亞細(xì)胞水平和分子水平系統(tǒng)研究膳食鈣對(duì)氟中毒的影響，旨在探

3、討適量膳食鈣對(duì)氟暴露致子代肝臟損傷的干預(yù)作用及其分子機(jī)理，為地氟病的防治提供基礎(chǔ)資料。
　　方法:健康清潔級(jí)初斷乳SD大鼠雌鼠100只（先后分兩批），雄鼠50只。適應(yīng)一周后，每一批雌鼠隨機(jī)平均分成5組，每組10只。對(duì)照組自來水（含氟量＜0.2 mg/L）+常食飼料（鈣含量0.79％）;染氟組氟化鈉溶液（100 mg/L）+常食飼料;低鈣組自來水+低鈣飼料（鈣含量0.063％）;低鈣染氟組氟化鈉溶液+低鈣飼料;高鈣染氟組自來水+高鈣

4、飼料（鈣含量7％）。雄鼠自來水+標(biāo)準(zhǔn)飼料（氟含量＜0.2 mg/kg，鈣含量為7～10 g/kg）;以上溶液的溶劑均是自來水。飼養(yǎng)期為3個(gè)月，期間均采取自由飲水、自由進(jìn)食的方式飼養(yǎng)。之后按雄性:雌性比1∶1合籠交配，取日齡14天和28天的仔鼠進(jìn)行相關(guān)實(shí)驗(yàn)。實(shí)驗(yàn)期間，保持飼養(yǎng)室通風(fēng)，室溫在25℃左右;濕度保持在50％～70％之問;以滅菌干凈的刨花為墊料，每3天更換1次，并清洗鼠籠。各組均以仔鼠肝臟臟器系數(shù)、肝細(xì)胞超微結(jié)構(gòu)、氧化水平、凋亡情

5、況及凋亡相關(guān)蛋白Caspase12表達(dá)水平作為觀察指標(biāo)。
　　結(jié)果:
　　1.血液中肝功能相關(guān)指標(biāo)檢測(cè)
　　14天雌性仔鼠:與對(duì)照組相比，低鈣組和低鈣染氟組ALT活性明顯降低，高鈣染氟組ALT活性明顯升高;各實(shí)驗(yàn)組ALP活性無顯著變化;低鈣染氟組AST活性明顯降低，高鈣染氟組AST活性明顯升高。與染氟組相比，高鈣染氟組ALT活性明顯升高;各實(shí)驗(yàn)組ALP活性無顯著變化;低鈣染氟組AST活性明顯降低，高鈣染氟組AST活性明

6、顯升高。14天雄性仔鼠:與對(duì)照組相比，低鈣染氟組ALT活性明顯降低;低鈣染氟組ALP活性顯著升高(p＜0.05);各實(shí)驗(yàn)組AST活性無顯著變化。與染氟組相比，低鈣染氟組和高鈣染氟組ALT活性明顯降低;各實(shí)驗(yàn)組ALP活性無顯著變化;各實(shí)驗(yàn)組AST活性無顯著變化。28天雌性仔鼠:與對(duì)照組相比，低鈣組和染氟組ALT活性增強(qiáng)，高鈣染氟組和低鈣染氟組ALT活性降低;高鈣染氟組、低鈣染氟組和低鈣組ALP活性顯著性升高(p＜0.05);高鈣染氟組和低

7、鈣染氟組AST活性增強(qiáng)，染氟組和低鈣組AST活性均顯著性升高(p＜0.05)。與染氟組相比，低鈣染氟組和高鈣染氟組ALT活性顯著下降(p＜0.05);低鈣組、低鈣染氟組和高鈣染氟組ALP活性顯著升高(p＜0.05);各實(shí)驗(yàn)組AST活性無顯著變化。28天雄性仔鼠:與對(duì)照組相比，低鈣染氟組ALT活性顯著降低(p＜0.05);高鈣染氟組、低鈣組和低鈣染氟組ALP活性顯著升高(p＜0.05);低鈣組、低鈣染氟組和高鈣染氟組AST活性均顯著性升高

8、(p＜0.05)。與染氟組相比，低鈣染氟組ALT活性顯著降低(p＜0.05);高鈣染氟組、低鈣組和低鈣染氟組ALP活性顯著升高(p＜0.05);各實(shí)驗(yàn)組AST活性無顯著變化。
　　2.肝組織生化指標(biāo)
　　14天雌性仔鼠:與對(duì)照組相比，低鈣染氟組和高鈣染氟組MDA的含量顯著性升高(p＜0.05)，低鈣染氟組GSH-PX活力明顯下降，低鈣染氟組SOD的活力顯著降低(p＜0.05);與染氟組相比，低鈣染氟組MDA含量顯著降低(p＜

9、0.05)，低鈣染氟組SOD的活力顯著降低(p＜0.05)。14天雄性仔鼠:與對(duì)照組相比，各實(shí)驗(yàn)組MDA含量均上升，低鈣組和低鈣染氟組GSH-PX活力顯著降低(p＜0.05)，低鈣染氟組SOD活力顯著降低(p＜0.05);與染氟組相比，低鈣染氟組SOD活力顯著降低(p＜0.05)。28天雌性仔鼠:與對(duì)照組相比，染氟組和低鈣染氟組MDA含量顯著升高(p＜0.05)，各實(shí)驗(yàn)組GSH-PX和SOD活性均降低;與染氟組相比，低鈣組和高鈣染氟組M

10、DA含量顯著降低(p＜0.05)。28天雄性仔鼠:與對(duì)照組相比，低鈣染氟組和高鈣染氟組MDA含量顯著升高(p＜0.05)，各實(shí)驗(yàn)組GSH-PX和SOD活性均降低;與染氟組相比，低鈣染氟組和高鈣染氟組MDA含量顯著升高(p＜0.05)。
　　3.肝組織Bcl-2蛋白表達(dá)水平
　　14天雌性仔鼠:與對(duì)照組相比，染氟組、低鈣組和高鈣染氟組Bcl-2蛋白表達(dá)水平有所下降，低鈣染氟組Bcl-2蛋白表達(dá)水平顯著降低(p＜0.05);與染

11、氟組相比，低鈣染氟組Bcl-2蛋白表達(dá)水平明顯下降。14天雄性仔鼠:與對(duì)照組相比，染氟組、低鈣組和高鈣染氟組Bcl-2蛋白表達(dá)水平均降低，低鈣染氟組Bcl-2蛋白表達(dá)水平顯著降低(p＜0.05);與染氟組相比，低鈣染氟組Bcl-2蛋白表達(dá)水平顯著降低(p＜0.05)。28天雌雄仔鼠:與對(duì)照組相比，染氟組、低鈣組和高鈣染氟組Bcl-2蛋白表達(dá)水平均降低，低鈣染氟組Bcl-2蛋白表達(dá)水平顯著降低(p＜0.05);與染氟組相比，低鈣染氟組Bc

12、l-2蛋白表達(dá)水平明顯降低。
　　4.肝組織Caspase12蛋白表達(dá)水平
　　14天雌性仔鼠:與對(duì)照組相比，染氟組、低鈣染氟組和高鈣染氟組均顯著升高(p＜0.05);與染氟組相比，低鈣組和高鈣染氟組均顯著降低(p＜0.05)。14天雄性仔鼠:與對(duì)照組相比，高鈣染氟組顯著升高(p＜0.05);染氟組和低鈣染氟組極顯著升高（p＜0.01）。與染氟組相比，低鈣組和高鈣染氟組顯著降低(p＜0.05)。28天雌性仔鼠:與對(duì)照組相比，

13、高鈣染氟組顯著性升高(p＜0.05);染氟組和低鈣染氟組極顯著性升高(p＜0.01)。與染氟組相比，高鈣染氟組顯著性降低(p＜0.05);低鈣組極顯著性降低(p＜0.01)。28天雄性仔鼠:與對(duì)照組相比，低鈣組顯著性升高(p＜0.05);染氟組、低鈣染氟組和高鈣染氟組極顯著性升高(p＜0.01)。與染氟組相比，高鈣染氟組顯著性降低(p＜0.05);低鈣組極顯著性降低(p＜0.01)。
　　結(jié)論:飲水型氟中毒可以使過量的氟透過胎盤屏