DREB2E參與擬南芥對于多種非生物脅迫的適應(yīng).pdf

1、在非生物脅迫中，高鹽、干旱和水澇是植物生長和作物生產(chǎn)最重要的限制因子。植物激素ABA在植物生長和發(fā)育方面起著重要的作用，它參與了多種非生物脅迫的信號轉(zhuǎn)導(dǎo)途徑。脅迫應(yīng)答基因的表達是通過不同的轉(zhuǎn)錄因子來調(diào)節(jié)，最近研究已經(jīng)證實MYB-(R1)R2R3、AP2/EREBP、WRKY等多種轉(zhuǎn)錄因子在調(diào)節(jié)植物應(yīng)對不同脅迫時有重要的作用。已經(jīng)有研究報道了DRREB2A、DREB2B等DREB家族的轉(zhuǎn)錄因子廣泛參與了ABA、干旱、高鹽、低溫等非生物脅迫

2、的應(yīng)答。在前期的研究工作中，我們發(fā)現(xiàn)ABA和活性氧處理能夠誘導(dǎo)DREB2E基因表達的變化，但是其在植物逆境脅迫適應(yīng)中的作用尚未見報道。
　　 為了進一步研究DREB2E基因的功能，本研究構(gòu)建載了DREB2E的超表達和RNAi轉(zhuǎn)基因陽性植株。以此為材料，外施ABA、H2O2、NaCl、甘露醇等觀察其幼苗生長以及根生長的表型，發(fā)現(xiàn)ABA、H2O2、NaCl、甘露醇均對超表達轉(zhuǎn)基因植株與RNAi轉(zhuǎn)基因植株的萌發(fā)率、子葉生長發(fā)育、主根長

3、度以及側(cè)根數(shù)目產(chǎn)生影響，因此我們推測DREB2E基因廣泛參與了擬南芥應(yīng)對多種非生物脅迫的反應(yīng)。
　　 通過氣孔、失水以及遠紅外實驗，我們觀察到DREB2E超表達植株的葉面溫度低于野生型，失水率與氣孔開度也顯著大于野生型，而RNAi植株在氣孔開度、失水率和葉面溫度與野生型相比無明顯差異，因此我們預(yù)測DREB2E基因參與了擬南芥氣孔運動的調(diào)節(jié)過程。
　　 同時我們獲得了DREB2E的GUS轉(zhuǎn)基因陽性植株，對DREB2E基因在

4、擬南芥的不同組織中的表達進行了分析，發(fā)現(xiàn)該基因在幼嫩植物的根、葉、花中都有表達，而在成熟植株的莖和果莢中沒有表達。
　　 通過半定量RT-PCR檢測了ABA下游相關(guān)基因的表達量，發(fā)現(xiàn)在DREB2E RNAi植株中RD29B基因表達量發(fā)生下降，從而預(yù)示著在非生物逆境脅迫條件下，DREB2E基因與RD29B基因發(fā)生了某種協(xié)同作用。
　　 利用半定量RT-PCR技術(shù)檢測DREB2E基因與RD29B基因關(guān)于ABA和H2O2脅迫濃