可溶性晚期糖基化終末產(chǎn)物受體與心力衰竭關(guān)系的臨床研究.pdf

1、1.背景
　　心力衰竭是心血管疾病發(fā)展的終末階段，也是其他許多疾病最終的死亡原因。心肌能量代謝異常、興奮-收縮偶聯(lián)障礙、心肌細(xì)胞凋亡及心肌細(xì)胞內(nèi)收縮蛋白喪失導(dǎo)致心臟收縮功能異常;鈣離子復(fù)位延緩、肌球-肌動(dòng)蛋白復(fù)合體解離障礙、心室各部舒縮活動(dòng)不協(xié)調(diào)導(dǎo)致心臟舒張功能異常。目前對(duì)心力衰竭的治療主要包括強(qiáng)心、利尿、擴(kuò)血管及心臟再同步療法等，近年來，應(yīng)用血管緊張素轉(zhuǎn)換酶抑制劑或血管緊張素受體拮抗劑、β受體阻滯劑和醛固酮拮抗劑等優(yōu)化的系統(tǒng)治療

2、后，心力衰竭患者5年死亡率仍高于60％，這提示還有一些未知的因素作用于心力衰竭的發(fā)生發(fā)展。近年來可溶性晚期糖基化終末產(chǎn)物受體(Solublereceptorforadvancedglycationendproducts,sRAGE)成為心力衰竭相關(guān)研究的突破點(diǎn)。
　　sRAGE是內(nèi)源性分泌型RAGE(es-RAGE)與基質(zhì)金屬蛋白酶剪切細(xì)胞膜表面的RAGE后釋放到血液的游離RAGE的總稱。在機(jī)體高齡、高糖、高血管緊張素Ⅱ等情況下，

3、RAGE在血管內(nèi)皮細(xì)胞、血管平滑肌細(xì)胞、心肌細(xì)胞、單核巨噬細(xì)胞、T淋巴細(xì)胞、樹突狀細(xì)胞中表達(dá)增高。其三種異構(gòu)體(全長(zhǎng)RAGE、顯性負(fù)RAGE、內(nèi)源性分泌型RAGE)中只有全長(zhǎng)RAGE與其配體結(jié)合激活細(xì)胞信號(hào)傳導(dǎo)通路，促進(jìn)機(jī)體炎癥反應(yīng)、誘導(dǎo)氧化應(yīng)激、調(diào)節(jié)心肌細(xì)胞的代謝，在血管內(nèi)皮損傷、動(dòng)脈粥樣硬化、心力衰竭的發(fā)生發(fā)展中發(fā)揮重要作用。sRAGE可競(jìng)爭(zhēng)性抑制全長(zhǎng)RAGE與配體結(jié)合引起的一系列生物學(xué)效應(yīng)，對(duì)心血管系統(tǒng)起到保護(hù)作用。此外sRAGE

4、可通過中和晚期糖基化終產(chǎn)物(Advancedglycationendproducts，AGEs)，抑制AGEs與細(xì)胞內(nèi)、外蛋白交聯(lián)引起的血管內(nèi)皮細(xì)胞及心肌細(xì)胞直接損傷。
　　大量分子生物學(xué)研究及動(dòng)物實(shí)驗(yàn)證實(shí)血清sRAGE水平與心力衰竭的發(fā)生發(fā)展有關(guān)，但目前有關(guān)血清sRAGE水平與心力衰竭的關(guān)系及在評(píng)價(jià)心衰方面作用的臨床試驗(yàn)結(jié)果存在很大的分歧。本研究重點(diǎn)在血清sRAGE水平與心力衰竭患者心臟收縮、舒張功能及心臟電生理穩(wěn)定的相關(guān)方面進(jìn)

5、行了詳細(xì)的研究，進(jìn)而探討血清sRAGE水平在心力衰竭的發(fā)生發(fā)展中的作用。
　　2.目的
　　(1)明確血清sRAGE水平在非糖尿病心力衰竭患者、合并糖尿病的心力衰竭患者、非心力衰竭的對(duì)照組中的差異。
　　(2)明確血清sRAGE水平與非糖尿病心力衰竭患者及合并糖尿病的心力衰竭患者心臟功能的關(guān)系:①血清sRAGE水平與紐約心臟功能分級(jí)（NYHA分級(jí)）的相關(guān)性;②血清sRAGE水平與心臟超聲左室射血分?jǐn)?shù)(LVFE)、E峰/

6、A峰值）的相關(guān)性;③血清sRAGE水平與血清B型利鈉肽(BNP)水平的關(guān)系。
　　(3)明確血清sRAGE水平與非糖尿病心力衰竭患者及合并糖尿病的心力衰竭患者心律失常的關(guān)系:①血清sRAGE水平與房顫發(fā)作的相關(guān)性;②血清sRAGE水平與頻發(fā)室性早搏的相關(guān)性。
　　3.方法
　　3.1資料收集
　　收集2013.1.1-2013.12.30期間入住山東大學(xué)附屬省立醫(yī)院老年心內(nèi)科，明確診斷缺血性心力衰竭的患者52例，

7、NYHA分級(jí)Ⅱ-Ⅳ級(jí)，其中男性41人，女性11人，年齡60-80歲，平均年齡79.3歲。和無心力衰竭的10例對(duì)照組，其中男性7人，女性3人，年齡60-80歲，平均年齡79.5歲。
　　3.2標(biāo)本血清的分離
　　所有個(gè)體均空腹6-8小時(shí)后抽取10ml肘靜脈血，加入惰性分離膠促凝管，靜置15min后，使用離心機(jī)2000bpm離心20min，取上清液置于EP管中待用。
　　3.3人可溶性晚期糖基化終產(chǎn)物受體(sRAGE)酶聯(lián)

8、免疫分析(ELISA)
　　本試驗(yàn)應(yīng)用雙抗體夾心法測(cè)定標(biāo)本中sRAGE水平。樣本中sRAGE與微孔板上活性辣根過氧化物酶(HRP)標(biāo)記的sRAGE抗體結(jié)合，形成抗體-抗原-酶標(biāo)抗體復(fù)合物，徹底洗滌后加四甲基聯(lián)苯胺(TMB)顯色，TMB在HRP酶的催化下轉(zhuǎn)化為藍(lán)色，并在酸的作用下最終轉(zhuǎn)化為黃色。用酶標(biāo)儀在450hm波長(zhǎng)下測(cè)定吸光度（OD值），通過標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算樣品中sRAGE的濃度。
　　3.4統(tǒng)計(jì)學(xué)分析
　　使用SPSS

9、StatisticsV19.0軟件，利用卡方檢驗(yàn)、獨(dú)立樣本均數(shù)t檢驗(yàn)，比較糖尿病合并心力衰竭患者、非糖尿病心力衰竭患者、對(duì)照組中血清sRAGE平均水平;分析糖尿病合并心力衰竭患者和非糖尿病心力衰竭患者一般基本統(tǒng)計(jì)量間的差異。利用卡方檢驗(yàn)、Pearson線性相關(guān)性檢驗(yàn)評(píng)價(jià)血清sRAGE水平與NYHA、LVEF、E峰/A峰、BNP、頻發(fā)室性早搏、房顫的相關(guān)關(guān)系。
　　4.結(jié)果
　　4.1血清sRAGE平均水平在糖尿病合并心力衰竭

10、患者、非糖尿病心力衰竭患者、對(duì)照組中分別為(0.172±0.073)μg/L、(0.170±0.055)μg/L、(0.140±0.011)μg/L，糖尿病合并心力衰竭患者與非糖尿病心力衰竭患者血清sRAGE平均水平均明顯高于對(duì)照組(p＜0.05)，糖尿病合并心力衰竭者與非糖尿病心力衰竭者血清sRAGE平均水平?jīng)]有統(tǒng)計(jì)學(xué)差別。
　　4.2血清sRAGE水平與糖尿病合并心力衰竭患者、非糖尿病心力衰竭患者心臟功能之間的關(guān)系
　　

11、非糖尿病心力衰竭患者中，血清sRAGE水平與NYHA分級(jí)間存在顯著的相關(guān)關(guān)系（卡方檢驗(yàn)P=0.024）;血清sRAGE與E/A比值之間存在明顯正性線性相關(guān)關(guān)系（Pearson線性檢驗(yàn)r=0.800，p＜0.001)，血清sRAGE水平的受試者工作曲線（ROC曲線）的曲線下面積AUC=0.778。血清sRAGE水平與LVEF和血清BNP水平均無統(tǒng)計(jì)學(xué)相關(guān)關(guān)系。
　　糖尿病合并心力衰竭患者中，血清sRAGE水平與左室射血分?jǐn)?shù)(LVEF

12、)間存在明顯正性線性相關(guān)關(guān)系（Pearson線性檢驗(yàn)r=0.456，p=0.033）。而血清sRAGE水平與NYHA分級(jí)、E峰/A峰比值、BNP水平分組之間無明顯統(tǒng)計(jì)學(xué)相關(guān)性。
　　4.3血清sRAGE水平與糖尿病合并心力衰竭患者、非糖尿病心力衰竭患者心律失常之間的關(guān)系
　　非糖尿病心力衰竭患者中，血清sRAGE水平與頻發(fā)室性早搏間存在明顯的負(fù)性線性相關(guān)關(guān)系（Pearson線性檢驗(yàn)r=-0.469，p=0.033），血清sR

13、AGE的受試者工作曲線的曲線下面積(AUC)為0.727;血清sRAGE水平與房顫發(fā)作分組間存在明顯的相關(guān)關(guān)系（卡方檢驗(yàn)P=0.046）。
　　糖尿病合并心力衰竭患者中，血清sRAGE水平與頻發(fā)室性早搏、房顫發(fā)作不同分組間均無明顯統(tǒng)計(jì)學(xué)相關(guān)性。
　　5.結(jié)論
　　血清sRAGE水平對(duì)糖尿病合并心力衰竭患者及非糖尿病心力衰竭患者心臟功能的評(píng)估具有一定的臨床意義。血清sRAGE水平升高，對(duì)心力衰竭患者心臟功能有一定的保護(hù)作