低硝酸鹽菠菜及其NR基因克隆的研究.pdf

1、硝酸鹽是強致癌物亞硝胺的前體，過量攝入會誘發(fā)消化器官的癌變，嚴重危害人類健康。人體攝入的硝酸鹽大多來自蔬菜，葉菜類蔬菜屬于易富集硝酸鹽的作物，特別是喜氮類蔬菜如菠菜，是人們攝入硝酸鹽的主要來源。因此要控制人體攝入硝酸鹽的含量首先要控制蔬菜中硝酸鹽的含量。 硝酸還原酶(Nitrate reductase，NR)能將硝酸鹽還原成無毒的NO2。提高蔬菜中的硝酸還原酶活性(Nitrate reductase activitity，NRA

2、)，不僅可以降低蔬菜硝酸鹽的含量，還可以增加同等施肥條件下蔬菜的產量，提高肥料的利用率。 本文就篩選低富集硝酸鹽的菠菜品種以及克隆NR基因并做了研究，研究結果如下： 1．采用盆栽法和水楊酸法從40個菠菜品種中篩選出：①182 ppm低氮水平下，低硝酸鹽菠菜品種--HN大葉菠菜(115.073 mg/kg)，其硝酸鹽富集量為推廣品種大葉菠菜(251.716 mg/kg)的45.7％；②400 pm高氮水平下，低硝酸鹽菠菜品

3、種--GZ圓葉品種菠菜(453.721 mg/kg)，其硝酸鹽富集量為推廣品種大葉菠菜(999.265 mg/kg)的45.4％。 2．獲得了硝酸還原酶基因的ORF序列：以400 ppm高氮水平下低硝酸鹽菠菜品種——GZ圓葉菠菜的葉片為材料，從中提取總RNA，根據(jù)已報道的菠菜硝酸還原酶序列設計一對引物，擴增其開放閱讀框，通過DNAStar推斷其氨基酸序列。推斷的氨基酸序列與報道的菠菜硝酸還原酶氨基酸序列的同源性為99％。