水楊酸鈉促進鈣蛋白酶1在下丘神經(jīng)元的表達.pdf

1、目的:1、研究水楊酸鈉（Sodium salicylate，ss）對Sprague-Dawley(SD)大鼠聽力閾值以及聽性腦干反應(Auditory Brainstem reflect，ABR)檢測Ⅰ、Ⅲ、Ⅴ波潛伏期以及Ⅰ-Ⅴ、Ⅲ-Ⅴ波間潛伏期改變，分析水楊酸鈉作用不同時間后，對大鼠聽力的影響。2、觀察鈣蛋白酶1（calpain1）在下丘定位，以及水楊酸鈉對SD大鼠下丘神經(jīng)元calpain1表達的影響。3、研究下丘鈣蛋白酶表達量與大鼠

2、聽力損害程度的關(guān)系，探討水楊酸鈉聽力損害與鈣蛋白酶1的關(guān)系。
　　方法:1、采用美國產(chǎn)Bio-logic多功能電生理儀對大鼠進行ABR檢測，將聽力閾值檢測結(jié)果小于40dB SPL的健康成年的SD大鼠歸為實驗對象。2、分組取其中符合標準、雌雄不限、體重在200g到250g范圍的健康成年大鼠72只，隨機分為4組，每各組18只大鼠。對照組:腹腔注射生理鹽水;水楊酸鈉組（ss組）:腹腔注射水楊酸鈉;鈣蛋白酶抑制劑組(ALLN組):腹腔注射

3、鈣蛋白酶抑制劑ALLN(N-acetyl-Leu-Leu-Norleucinal);ss+ALLN組:同時腹腔注射水楊酸鈉和ALLN。各組注射劑量根據(jù)每只大鼠體重計算，水楊酸鈉注射劑量為350mg/kg·d，鈣蛋白酶抑制劑注射劑量為10mg/kg·d，生理鹽水注射劑量與ss注射劑量體積相同。3、檢測在對各組大鼠進行處理前先適應性飼養(yǎng)于無特定病原體級(Specific pathogenFree，SPF)級動物房1周，并分別在注射生理鹽水及

4、藥物前1天、注射1周后以及注射4周，對各組大鼠進行聽性腦干反應檢測每只大鼠的聽力閾值，Ⅰ、Ⅲ、Ⅴ波潛伏期以及Ⅰ-Ⅴ波、Ⅲ-Ⅴ波波間潛伏期，并在每次測量之后從每組中隨機抽出6只大鼠，用4％多聚甲醛通過心臟灌注固定后取出下丘，石蠟固定后通過免疫組織化學技術(shù)檢測下丘鈣蛋白酶1表達量。
　　結(jié)果:1、隨水楊酸鈉應用時間增加，大鼠聽力閾值明顯增大(P＜0.01)，Ⅰ、Ⅲ、Ⅴ波潛伏期以及Ⅰ-Ⅴ、Ⅲ-Ⅴ波間潛伏期延長(P＜0.05)。2、在給予

5、ss處理后，隨時間增加，鈣蛋白酶1在下丘神經(jīng)元表達量增加(P＜0.01)，對照組鈣蛋白酶1表達量變化差異無統(tǒng)計學意義(P＞0.05)。
　　結(jié)論:1、長期應用水楊酸鈉會導致大鼠聽力閾值降低，且隨著應用時間延長，大鼠聽力閾值越大。2、正常情況下，鈣蛋白酶1在大鼠下丘中央核神經(jīng)元胞質(zhì)內(nèi)少量表達，長時間應用ss會引起下丘中央核鈣蛋白酶1表達量增高，且隨ss應用時間增加鈣蛋白酶1表達量增高。3、下丘中央核神經(jīng)元內(nèi)鈣蛋白酶1表達量越大對大鼠