內皮素受體在肝臟疾病進程中肝組織的表達差異.pdf

1、本文分為以下幾個部分進行探討：
　　第一部分 內皮素受體在肝血管瘤、肝硬化、肝癌及癌旁組織中表達差異
　　目的：
　　內皮素受體（ETR）是內皮素系統(tǒng)中的重要組成部分，是引起肝硬化門脈高壓的一類受體分子。研究發(fā)現(xiàn)內皮素（ET）可通過激活ETR調控多種信號通路參與纖維化過程，內皮素受體A（ETAR）參與肝癌的侵襲與轉移過程，但ETR在肝硬化-肝癌的進程中的表達差異研究甚少，本文通過檢測內皮素受體在不同進程肝組織中的表達差

2、異，旨在探討內皮素受體在肝硬化-肝癌發(fā)生及進展中的作用。
　　方法：
　　收集臨床外科手術病人肝血管瘤及肝癌標本，臨床試驗病人肝穿組織樣本（早期肝硬化），共分為作為肝血管瘤（n=13）、肝硬化組（n=15）、肝癌組（n=15）及癌旁組(n=15)。 Western blot檢測四組肝組織中ETAR、ETBR及α-SMA蛋白表達，并應用單因素方差分析統(tǒng)計四組相對灰度值有無顯著性差異。
　　結果：
　　采用Weste

3、rn blot方法檢測不同肝組織中ETAR、ETBR及α-SMA表達（圖1），通過相對灰度值分析可見ETAR在肝癌組織高表達，血管瘤次之，與癌旁比較具有顯著性差異（p<0.05），ETBR在肝硬化中表達最多，與血管瘤、癌旁及肝癌中表達有顯著差異（p<0.05）。α-SMA四者之間比較均無顯著差異（p>0.05）。
　　結論：
　　ETAR表達趨勢強弱依次為肝癌>肝血管瘤>肝硬化>癌旁，可能與HSC增殖活化、數(shù)目增多有關，所以

4、ETAR與腫瘤的生長、進展、細胞增殖、血管新生及侵襲與轉移密切相關。ETBR在肝硬化中表達最多，說明ETBR而介導HSC松弛，參與調節(jié)肝竇血流變化，介導肝竇舒張，降低門脈壓力及門脈血流。
　　第二部分 內皮素受體A在肝星狀細胞與內皮細胞上表達差異
　　目的：
　　研究己證明內皮素受體在肝臟細胞中表達，ETAR主要分布于血管平滑肌細胞和肝星狀細胞，ETBR主要分布于肝竇內皮細胞（LSECs）及肝星狀細胞（HSCs）。內皮

5、素受體具有HSCs活化的幾乎所有功能，對通過調節(jié)HSC收縮、在肝內外血管阻力及門脈高壓形成中發(fā)揮重要作用.通過第一章結論我們可基本得出ETAR與細胞增殖、血管新生、腫瘤的發(fā)生密切相關.這一章我們通過分析不同肝臟細胞—HSCs及LSECs上的內皮素受體A表達差異，進一步探討ETAR在肝臟疾病進程中的作用。
　　方法：
　　同樣按第一章方法將臨床標本分為四組：肝血管瘤組，肝硬化組，癌旁組及肝癌組。采用免疫熒光雙染法定位肝星狀細胞

6、及肝竇內皮細胞上的ETAR，通過記錄陽性細胞數(shù)及百分比，采用 Mann-Whitney檢驗和 Kruskal-Wallis檢驗分析不同肝組織中HSCs及LSECs上的ETAR表達差異是否具有顯著性差異。
　　結果：
　　統(tǒng)計結果顯示ETAR陽性細胞數(shù)在肝血管瘤、肝硬化、肝癌、癌旁共4組中，肝癌、血管瘤比肝硬化及癌旁組織ETAR表達明顯增多（p<0.05），有顯著差異，表達趨勢強弱依次為肝癌>血管瘤>肝硬化>癌旁。
　　

7、ETAR及α-SMA表達均為陽性在上述4組中，血管瘤同時表達ETAR和α-SMA細胞數(shù)較肝硬化及癌旁增多（p<0.05）。
　　ETAR與CD31表達均為陽性在上述4組中，表達強弱依次為肝血管瘤>肝癌>肝硬化>癌旁，各組之間進行兩兩比較，分析p值>0.05，無顯著意義。
　　結論：
　　ETAR在肝癌組織中表達最強，說明ETAR主要分布于血管平滑肌細胞，參與血管生成、腫瘤的發(fā)生。而ETAR及α-SMA均為陽性的細胞在血

8、管瘤組織中表達較多，說明ETAR主要分布于血管平滑肌細胞，同樣CD31及ETAR均為陽性的細胞在血管來源的正常對照組織中表達較強。因此，我們認為，ETAR與血管新生、腫瘤的發(fā)生密切相關。
　　第三部分 內皮素受體A表達與臨床指標的相關性
　　目的：
　　內皮素受體在肝硬化門脈高壓形成過程中起著重要作用，同時也參與肝癌的進展過程。本章通過分析第二章免疫熒光統(tǒng)計內皮素受體A（ETAR）陽性細胞數(shù)、ETAR與 CD31、ET

9、AR與α-SMA共同表達的陽性細胞與臨床肝硬化指標如血小板計數(shù)（PLT）、門脈內徑、脾臟厚度，肝癌指標甲胎蛋白（AFP），及肝功能如谷丙轉氨酶（ALT）、總膽紅素（TBIL）、谷氨酰轉肽酶（GGT）等的相關性，探討ETaR在肝硬化-肝癌進程中的作用。
　　方法：
　　運用SPSS軟件統(tǒng)計分析第二章不同肝組織陽性細胞計數(shù)結果與臨床指標的相關性，采用單因素方差分析的方法進行各組之間的兩兩比較，分析統(tǒng)計學意義，P值小于0.05代表

10、有顯著統(tǒng)計學意義。
　　結果：
　　統(tǒng)計資料后顯示ETAR陽性細胞數(shù)與指標PLT、AFP及門脈內徑具有相關性，p值分別為0.035、0.015、0.008，均<0.05，其中與指標PLT、AFP呈正相關，與門脈內徑呈明顯負相關（p<0.01）。ETAR與α-SMA均為陽性細胞數(shù)與指標ALT呈相關性， p值為0.047（p<0.05），Pearson系數(shù)為-0.449，呈負相關性。ETAR與CD31均為陽性細胞數(shù)與指標門脈內徑