擬南芥乙酰轉移酶相關基因RAT1和RAT2的分子遺傳學分析.pdf_第1頁
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文檔簡介

1、本研究以GUS-CCT2(CRY2的C端)為誘餌,篩選擬南芥cDNA文庫,篩選到了與之相互作用的蛋白RAT1(Related to acetyltransferase1),通過同源分析,找到與RAT1高同源性的蛋白(89.7％),稱為RAT2。RAT1和RAT2與γ-CA1、γ-CA2、γ-CA3(γ碳酸酐酶)是同源的,同時也與細菌的絲氨酸乙酰轉移酶同源。它們都與線粒體復合體Ⅰ有關。RAT1和RAT2蛋白定位在線粒體中,RAT1還定位在

2、細胞核內。rat1和rat2單突變體沒有特殊表型。在rat1單突變體與rat2單突變體的雜交后代中得不到rat1rat2雙突變體。通過對R1r1r2r2和r1r1R2r2的花粉及胚胎觀察,發(fā)現(xiàn)rat1rat2雙突變體會胚胎致死,且通過轉入35S-RAT2到R1r1r2r2植株中,這種致死表型能夠恢復。由于得不到rat1rat2雙突變植株,構建了rat2/RAT1-RNAi植株。發(fā)現(xiàn)rat2/RAT1-RNAi植株能夠正常生長發(fā)育,只是生

3、長發(fā)育延遲,在長日照條件下開花晚。實時定量PCR研究結果表明,在rat2/RAT1-RNAi植株體內,刀的表達降低了,其它開花基因的表達水平與野生型相當。所以rat2/RAT1-RNAi植株開花晚是由于FT的減少引起的。在對RAT1和RAT2的生化分析中發(fā)現(xiàn),在體外,RAT1沒有碳酸酐酶活性,但有明顯的乙酰轉移酶活性。我們推測由于RAT1與RAT2定位于線粒體中,且能與復合體Ⅰ作用,RAT1和RAT2就很可能通過影響能量代謝來起作用。在

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