中藥清毒栓對(duì)宮頸癌SiHa細(xì)胞凋亡的影響及其相關(guān)實(shí)驗(yàn)研究.pdf

1、目的：通過對(duì)中藥清毒栓體外作用于人宮頸癌SiHa細(xì)胞對(duì)其凋亡的影響的實(shí)驗(yàn)研究，探討中藥清毒栓防治宮頸癌的作用機(jī)制，進(jìn)一步完善中藥清毒栓臨床運(yùn)用的理論依據(jù)。
　　方法：
　　1.利用氯仿(三氯甲烷)提取法提取中藥清毒栓中的有效成分。
　　2.體外培養(yǎng)人宮頸癌SiHa細(xì)胞，將中藥清毒栓分為高中低三個(gè)劑量組，分別作用于宮頸癌SiHa細(xì)胞24h、48h、72h，并另設(shè)置空白對(duì)照組及中藥保婦康栓組，通過CCK-8檢測(cè)法檢測(cè)出高中

2、低不同濃度組及不同時(shí)間點(diǎn)中藥清毒栓對(duì)宮頸癌SiHa細(xì)胞體外增殖的影響，檢測(cè)出OD值，確定最佳時(shí)效點(diǎn)，以支持下一步實(shí)驗(yàn)。
　　3.線粒體膜電位檢測(cè)細(xì)胞凋亡實(shí)驗(yàn)：運(yùn)用JC-1線粒體膜電位檢測(cè)試劑盒檢測(cè)不同濃度中藥清毒栓作用宮頸癌SiHa細(xì)胞后的增殖抑制狀態(tài),從而更進(jìn)一步了解中藥清毒栓誘導(dǎo)細(xì)胞的凋亡途徑。
　　4.流式細(xì)胞檢測(cè)法檢測(cè)細(xì)胞凋亡實(shí)驗(yàn)：利用annexin-V/PI試劑盒中的熒光探針來檢測(cè)不同濃度藥物作用宮頸癌SiHa細(xì)胞

3、凋亡及對(duì)其細(xì)胞周期影響的情況。
　　結(jié)果：高劑量清毒栓在48h時(shí)對(duì)宮頸癌SiHa細(xì)胞增殖具有明顯的抑制及誘導(dǎo)細(xì)胞凋亡的作用,并可將宮頸癌SiHa細(xì)胞阻滯于G0/G1期；與空白對(duì)照組及清毒栓中，低劑量組比較，差異具有顯著性差異(P<0.01)，清毒栓高劑量與保婦康栓對(duì)照組比較，無顯著性差異(P>0.05)。
　　結(jié)論：中藥清毒栓可通過將宮頸癌SiHa細(xì)胞阻滯于細(xì)胞周期G0/G1期而促進(jìn)宮頸癌SiHa細(xì)胞的凋亡抑制其增殖，從而達(dá)