嗜酸氧化亞鐵硫桿菌中鐵硫簇調控蛋白IscR的表達、純化及性質研究.pdf_第1頁
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文檔簡介

1、中南大學碩士學位論文嗜酸氧化亞鐵硫桿菌中鐵硫簇調控蛋白IscR的表達、純化及性質研究姓名：張可申請學位級別：碩士專業(yè)：微生物學指導教師：柳建設曾嘉20080501碩士學位論文ABSTRACTABSTRACTThe[2Fe2S】clustercontainingIscRhasattractedmuchattentioninrecentyearsGeneticanalysesshowthatithasanessentialroleinthe

2、maturationofvariousironsulfurfieS)proteinsandfunctionsasacomponentofthecomplexmachineryresponsibleforthebiogenesisofFeSclustersThegeneofIscRfromAcidithiobacillusferrooxidansATCC23270wascloned，successfullyexpressedinEsche

3、richiacoliandpurifiedbyonestepaffinitychromatographytohomogenei夠ThespectraresultsoftherecombinantproteinconfirmedthattheironsulfurclusterwascorrectlyinsertedintotheactivesiteoftheproteinSite—directedmutagenesisresultsrev

4、ealedthatCys92，Cys99，andCysl07wereligatingwiththe【2Fe2S】clusteroftheproteinIronsulfur【FeS】clustersareoneofthemostubiquitousandfunctionallyversatileprostheticgroupsinnatureClusterscontain【2Fe2S】，[3Fe4S】，[4Fe4S】，or[8Fe7S】g

5、oreunitsDifferenttypesofbiological【FeS】clustershavedifferentfunctions，includingelectrontransfer，substratebinding／activation，iron／sulfurstorageregulationofgeneexpression，andenzymeactivity【FeS】clusterscouldbeincorporatedin

6、totheirproteinpartnersbothinvivoandinvitroThreedifferenttypesof[Fe—S】clusterbiosyntheticsystemshavebeendiscoveredAlthoughmostofthekeyplayersparticipatinginbiosynthesisof【FeS】clusterhavebeenidentified，themolecularmechanis

7、misstillunknownMoreover，howthedifferentproteinsinteractwitheachothertoaccomplish[FeS】proteinmaturationinvivoandhowtofaithfullyduplicatethatprocessinvitrostillneedtofurtherstudyThe【2Fe2S】clustercontainingIscRplaysanimport

8、antroleinthematurationofvariousironsulfur(FeS)proteins，andfunctionsasacomponentofthecomplexmachineryresponsibleforthebiogenesisofFe—SclustersWereportheretheassemblyof[2Fe2S】clusterinIscRfromAferrooxidansinvitrointheprese

9、nceofthreescaffoldproteinsofIscA，IscSandIscUThespectraandEPRresultsoftheholoIscRconfirmedthattheironsulfurclusterwascorrectlyassembledintotheproteinTheassemblyof【2Fe2S]clusterinIscRinvivomightalsofollowtheisc’’AUS”mechan

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