農桿菌介導的蔗糖合成酶基因轉化花生的研究.pdf

1、花生是重要的經濟作物，利用基因工程技術進行花生品質的改良已經越來越引起人們的重視。本研究將自馬鈴薯來源的蔗糖合成酶(SS)基因序列通過農桿菌介導法轉入到花生植株中，來探索外源ss基因的表達對花生植物體相關糖代謝產物的影響，并探索轉化后花生植株的相關生理變化，為選育高可溶性糖含量的ss基因轉化的花生植株提供基礎。 以花生成熟種子的子葉縱切段為外植體，經生長至對數期的農桿菌感染后轉入芽誘導培養(yǎng)基進行共培養(yǎng)，此間以高濃度的細胞分裂素/

2、生長素配比促進不定芽的分化，平均的芽分化率可達30％。繼而將生長狀況良好的不定芽切下轉入莖伸長培養(yǎng)基上，以低濃度的細胞分裂素誘導莖伸長，下一步將健壯的伸長莖轉入不含細胞分裂素的生根培養(yǎng)基中進行生根誘導。共獲得了19株花生再生植株，其中5株對應于nptⅡ基因進行的PCR檢測呈陽性，轉化率為0.83％。對這5株陽性植株進行的糖含量檢測顯示有1株葉片內蔗糖含量提高了25.6％，可溶性總糖的含量及蔗糖合成酶活性并未表現顯著變化。結果表明，就調節(jié)