用ReaL-Time qPCR方法檢測人心房和心室肌組織中成纖維細胞生長因子同源性因子mRNA的表達特征.pdf

1、成纖維細胞生長因子同源因子(Fibroblast growth factor homologousfactors，FHFs)是成纖維細胞生長因子(Fibroblast Growth Factor，FGF)家族中一種特殊的亞家族，目前主要有FHF1(FGF12)、FHF2(FGF13)、FHF3(FGF11)、FHF4(FGF14)四類，由于可以和細胞內鈉離子通道結合，影響通道的表達和功能，因此研究FHFs在人心肌組織中的表達具有重要生理

2、學意義，本實驗應用實時RT-PCR技術，檢測人心房和心室肌組織中FHFs各亞型mRNA的相對表達含量。
　　目的:建立檢測人心房和心室肌組織中成纖維細胞生長因子同源因子（FHFs）mRNA的實時熒光定量PCR方法，檢測人心房和心室肌組織中FHFs的各亞型mRNA的表達特征。
　　方法:取正常人心房肌和心室肌組織，分別用Trizol法裂解，提取mRNA，用體外反轉錄技術得到其cDNA，繼而用實時熒光定量PCR(real-tim

3、e qPCR)方法，以cDNA為模版，用FHFs各亞型特異性引物進行擴增，測定FHFs各亞型mRNA在心房肌和心室肌中的相對含量，并用瓊脂糖凝膠電泳方法對qPCR產物做定性觀測。
　　結果:人心房肌組織中，以FGF12B的表達占優(yōu)，其余亞型僅為其表達量的4％或更低;在人心室肌中，以FGF12B的表達占優(yōu)，FGF13VY/Y表達約為FGF12B的26.7±9％，其余亞型均表達量很低。
　　結論:在人心房和心室肌組織中，相比于其