NF-κB(P65)在小兒局灶性皮質發(fā)育不良(FCD)Ⅲa中的表達分析.pdf

1、研究背景:小兒癲癇是一種神經系統(tǒng)綜合征，它的病因及發(fā)作形式復雜，臨床上以反復發(fā)作、刻板發(fā)作為特點，居兒童期腦部慢性疾病的第一位，是一種致殘性的疾病。它主要因為大腦神經元被多種原因誘導致異常同步放電，進一步導致了中樞神經系統(tǒng)功能障礙。小兒癲癇嚴重影響患兒的身心健康，亦給家庭和社會帶來了沉重的負擔。癲癇中約30％為藥物難治性癲癇(refractory epilepsy，RE)，現有藥物難以控制癲癇發(fā)作，需要手術治療切除致癇灶。在手術治療的難

2、治性癲癇患兒中，約有75％為局灶性皮質發(fā)育不良(focal cortical dysplasia，FCD)。FCD是大腦皮質發(fā)育不良的亞型之一，其被認為是在胚胎發(fā)育早期神經元的正常程序（如增殖遷移分化等）受到干擾所致，其典型的病理改變是皮質分層異常和/或出現異形、異位神經元。FCD是小兒難治性癲癇中最常見的病理類型，根據其病理目前可分為單純型（包括FCDⅠ型、FCDⅡ型）和結合型(FCDⅢ)，每一分型又分為不同的亞型，其中FCDⅢ分為F

3、CDⅢa型、FCDⅢb型、FCDⅢc型、FCDⅢd。
　　核因子kappaB(NF-κB)是一種核蛋白因子，是細胞關鍵的轉錄因子之一，它可以與免疫球蛋白κB序列（位于k輕鏈基因增強子）特異結合，具有廣泛的生物學活性，是多種細胞因子的上游調控因子。其中在中樞神經系統(tǒng)發(fā)揮作用的主要是P65/P50異源二聚體，其活性受IKBa和IKBB調控。NF-κB可被多種細胞外刺激信號激活，其DNA構象變化被誘發(fā)，使靶基因的轉錄被啟動或增強，從而調

4、節(jié)細胞因子、黏附因子、炎癥反應有關的酶和趨化因子等與炎癥有關的多種基因的轉錄。大量研究發(fā)現，NF-κB參與了癲癇發(fā)病中的急性炎癥過程。研究證明，NF-κB除了參與調節(jié)TNF等細胞因子的表達，還與IL-8等趨化因子表達關系密切，因此，在炎癥反應中，NF-κB通過調節(jié)細胞因子、趨化因子等表達發(fā)揮作用。另研究表明NF-KB與神經元可塑性密切相關，NF-κB通過海馬突觸傳遞長時程增強(Long termpotentiation，LTP)調節(jié)神經

5、元突觸結構和功能變化。很多的實驗研究提示NF-κB核移位與癲癇的產生、發(fā)展與維持有密切的關系。
　　目的:
　　1 FCDⅢa是小兒難治性癲癇中常見的一種類型，其發(fā)病機制尚未清楚;
　　2目前研究發(fā)現NF-κB與癲癇形成有關，其機制可能通過介導炎癥反應實現，FCDⅢa作為難治性癲癇常見的病理類型，NF-κB在FCDⅢa中是否表達及是否參與其病理過程，還未見報道;
　　3研究NF-κB(P65)在小兒難治性癲癇FC

6、DⅢa型中的表達情況;
　　4探索NF-κB(P65)在FCDⅢa發(fā)病機制中的作用。
　　方法:選取2011年10月至2013年4月期間河北省人民醫(yī)院功能神經外科行手術治療的難治性癲癇患兒，篩選出26例FCDⅢa型難治性癲癇患兒臨床手術切除的皮層致癇灶標本作為本研究的實驗組，選取5例病理科尸檢的正常皮層標本作為對照組，利用免疫組織化學染色、WesternBlot等方法檢測NF-κB(P65)在FCDⅢa型難治性癲癇患兒腦組織

7、中的表達，并與正常腦組織的表達情況進行比較。實驗數據采用SPSS13.0統(tǒng)計學軟件進行分析。數據均以（均數±標準差）表示，兩組間均數比較采用t檢驗，以P＜0.05為差異有統(tǒng)計學意義。
　　結果:實驗組26例中，男16例、女10例，年齡2.5～14.0歲，平均年齡(8.81±2.98)歲;發(fā)病年齡0.5～7.0歲，平均發(fā)病年齡(4.31±1.84)歲;病程2～7年，平均病程(4.67±1.22)年。對照組5例，男3例、女2例，年齡4

8、.0～12歲，平均年齡(7.80±1.23)歲。免疫組化結果:FCDⅢa患兒組，NF-κB(P65)高表達，平均每個視野NF-κB(P65)免疫反應陽性細胞為(28.95±5.103)個;對照組中，NF-κB(P65)呈低表達，免疫反應陽性細胞數為(7.20±2.280)個;兩者差異有統(tǒng)計學意義(t=9.186，P＜0.05); WesternBlot檢測NF-κB(P65)蛋白水平結果:NF-κB(P65)蛋白在FCDⅢa患兒皮層中高